摘要：目的 应用简并引物RT-PCR扩增并克隆TF-ⅢA型锌指蛋白基因表达序列标签（EST），以最终获得新的锌指蛋白基因。方法分别用TPA和Hemin诱导人红白血病（HEL）细胞，提取总RNA。根据TF-ⅢA型锌指蛋白保守序列设计简并引物，并以之进行RT-PCR扩增，然后将其克隆到pGEM-T easy载体中测序，应用DNAsis软件分析序列并通过GenBank blast进行序列比较。结果克隆并测序了30个扩增片段，22个是锌指蛋白基因的EST,其中17个是新的锌指蛋白基因EST。结论应用简并引物RT-PCR克隆一些具有保守氨基酸顺序结构域的蛋白基因EST是可行的，并具有简便、高效等优点。此外，还可有目的地克隆一些具有重要功能结构域的蛋白质基因。

摘要：目的研究人造血增效因子(hHSF)C末端结构与其趋化活性的关系。方法用PCR方法合成编码3种hHSFC末端截短变异体DNA片段,分别重组到pET30a或pET42a中,并在***21(DE3)中进行表达。hHSF1-66和hHSF1-59用凝胶过滤和阳离子交换层析法进行分离纯化,融合蛋白GST-hHSF1-5 3经亲和层析、肠激酶(EK)酶切和凝胶过滤法进行分离纯化。hHSF3种缺失变异体进行Western blot鉴定,用飞行时间质谱法测定其相对分子质量,用改良的Boyden小室法测定其对人外周血中性粒细胞(PMN)趋化活性。结果测序证实合成的hHSF 1-66、hHSF1-59和hHSF1-53序列与设计一致,hHSF1-66/1-59表达量占菌体总蛋白的20%左右,主要以包涵体形式存在。GST-hHSF1-53表达量占菌体总蛋白的30%以上,主要以可溶形式存在。3种目的蛋白纯度均达95%左右,它们的相对分子质量分别为7206.0、6401.2和5697.3 D,均具有全长hHSF的免疫学活性。与全长hHSF相比,hHSF1-66(缺失3个氨基酸)对人PMN最大趋化活性(CI)(50 nmol/L)没有明显差异,hHSF1-59(缺失10个氨基酸)和hHSF1-53(缺失16个氨基酸,α螺旋完全缺失)最大趋化活性分别下降34.3%和70.5%。结论hHSF C末端结构,特别是α螺旋结构对维持和稳定hHSF的空间构象起着重要作用。

摘要：EGFRⅢ型变异体 (或EGFRvⅢ )是一种新型的肿瘤特异性靶点。EGFRvⅢ是正常分子经过遗传学重排成为肿瘤特异性靶点的最好例证。由于仅在肿瘤细胞中发现EGFRvⅢ ,可以应用它设计靶向性药物选择性治疗肿瘤 ,而不影响正常细胞 ,避免传统治疗中所见的副作用。以表达EGFRvⅢ的细胞为靶点的治疗方式有三种 :1 )作为毒性抗体或修饰病毒的直接靶点 ,2 )利用EGFRvⅢmRNA的特异性核酶或EGFRvⅢ及其下游信号传导分子的特异性抑制剂进行治疗 ,3)利用EGFRvⅢ触发免疫反应。概括介绍了肿瘤特异性标记物EGFRvⅢ在肿瘤治疗中的研究进展。

摘要：成功地实施随机分配依赖于两个相关的步骤:(1)产生随机分配序列用于试验组和对照组的分配;(2)随机分配方案在随机分组实施过程中的隐匿。随机分组方法有:简单随机化、区组随机化、分段(或分层)随机化、分层区组随机化及动态随机化等;随机分配方案隐匿的方法有按顺序编码、不透光、密封的信封,中心随机系统,编号或编码的瓶子或容器,中心药房准备的药物等。科研工作者在临床研究中需要根据设计方法,正确选择随机分组及随机分配方案隐匿的方法。

摘要：目的 应用Affymetrix全基因组芯片结合荧光定量PCR（quantitative real-timePCR，qPCR）技术，进行致病性DNA拷贝数变异的精细定位研究。方法以一个定位于染色体7q36的中国人遗传性三节拇指多并指综合征伴随Ⅳ型并指家系中的一例患者为研究对象。收集外周血标本，常规提取基因组DNA。应用Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array6．0芯片，将基因组DNA纯化，经过酶切、连接、扩增、标记、杂交、染色和扫描等步骤后得到原始数据，应用Affymetrix Genotyping Console3．0软件进行拷贝数分析。在经芯片分析所确定的重复范围内设计引物，采用qPCR方法进行验证，并进一步缩小断端范周、精确重复区域范围。结果将患者重复区域两断端范围由原来的113kb和33kb分别缩小到5．4kb和1．8kb，致病性DNA重复范围由原来的291～437kb精确至379～387kb。结论应用Affymetrix全基因组芯片联合qPCR技术可以实现对DNA拷贝数突变的精确、可靠的检测。

摘要：人工心脏（ＡｒｔｉｆｉｃｉａｌＨｅａｒｔ，ＡＨ）与机体的生理反馈调节没有联系，ＡＨ的控制可为被动性或主动性，内在被动性调节使ＡＨ对受体的生理需要作出有限的反应。动力性控制需要感知患者的代谢与血液动力学信号并用其调节ＡＨ功能。单一的代谢与血液动力学指标并不能提供足够的血液流量需求数据。可靠、适应性强的ＡＨ，需要将许多输入信号组合起来。选择适当的输入信号并将其融入到ＡＨ控制器的设计中仍是达到完全永久性植入人工心脏的关键步骤。

摘要：目的 了解农村妇女性观念和性行为现状及其影响因素。方法 采用分层整群抽样横断面调查设计。用听录音回答和调查员询问填写问卷两种不同的资料收集方法对海南省某县606名农村妇女进行问卷调查。结果 25％的妇女认可一般的婚前性行为,认可结婚对象婚前发生性行为的妇女占34％。自报发生过婚前性行为的妇女占15％,4％报告发生过婚前人工流产。5％的妇女报告曾在月经期发生过性行为。认可婚外性行为的妇女占4％,3％的妇女认可卖淫,对需要钱的妇女卖淫表示认可的妇女占3％。没有妇女报告发生过婚外性行为或卖淫行为。两种资料收集方法结果差异无统计学显著性意义。logistic回归分析显示低年龄、低文化程度、汉族与对婚前性行为的态度有正关联,低年龄与发生婚前性行为有正关联。结论 在农村人群中应更早地开展性健康教育,并应具有针对性。在研究中,听录音回答的调查方法并未增加敏感问题调查结果的真实性。

摘要：背景:衰老大鼠静脉注射脂多糖后能导致肺损伤,进而发现随着肺损伤的进展,影响肾功能。银杏叶提取物具有一定的清除自由基、改善血液流变学和保护血管内皮细胞等功能。目的:研究人工衰老大鼠肺损伤后是否发生肾功能不全,以验证老年多器官功能不全的肺启动机制,并观察银杏叶提取物对其是否有保护作用。设计:以实验动物为观察对象的随机对照的实验。单位:中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料:实验于2001-05/2003-01在中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成。选用36只Wistar雄性大鼠。方法:给大鼠每天1次经腹腔注入D-半乳糖(50mg/kg),连续6周,复制衰老动物模型,再随机分为3组:对照组(静脉注射生理盐水);脂多糖组(静脉注射脂多糖,5mg/kg);银杏叶提取物+脂多糖组(注射脂多糖前7d开始,每天银杏叶提取物灌胃1次,31mg/kg)。各组大鼠在给生理盐水或脂多糖后2h或6h取血和肺、肾组织。主要观察指标:用比色法测定血中肌酐、尿素氮含量;血、肺、肾组织中丙二醛、NO2-/NO3-含量及谷胱甘肽过氧化物酶及Na+-K+-ATP酶活性的测定。结果:衰老大鼠在注射脂多糖后2,6h时已形成急性肺损伤。注射脂多糖后2h血中肌酐及尿素氮含量无明显升高,而6h时均显著升高,分别为(94.7±10.3)μmol/L,(11.4±1.9)mmol/L。在注射脂多糖后2h,血和肺组织中丙二醛犤(22.5±2.6)nmol/L,(25.8±2.9)μmol/g犦和NO2-/NO3-含量犤(58.5±6.8)mmol/L,(34.6±3.8)μmol/g犦均显著升高,而谷胱甘肽过氧化物酶犤(355.1±45.0)μkat/g犦及Na+-K+-ATP酶犤(886.3±97.2)nkat/g犦下降。上述指标的变化持续至观察的6h。而肾组织中上述指标仅在注射脂多糖后6h才有显著性变化。银杏叶提取物可显著缓解上述指标的变化。结论:脂多糖所致衰老大鼠的肺损伤可进一步诱导肾功能受损。银杏叶提取物对脂多糖诱发的衰老大鼠的急性肺损伤和由此诱导的肾功能受损有明显的保护作用。

摘要：杀伤性Ｔ细胞（ＣＴＬ）是恶性疟红前期免疫反应的关键环节。本文主要就利用ＭＨＣ分子结合肽基序确定ＣＴＬ表位进行综述，并围绕如何克服ＣＴＬ的ＭＨＣ限制性，对多抗原成分疫苗的设计、多表位疫苗的设计和ＭＨＣⅠ类分子结合亚型和共用肽段等方面的研究进行了探讨。

摘要：系统性红斑狼疮（SLE）是自身免疫介导的，以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病。抗Sm抗体由于其在SEE诊断中具有高度特异性被认为是疾病的标志性抗体。目前研究认为，SmD1是其中最主要的抗原分子。本研究通过构建表达载体进行重组SmD1蛋白的表达和纯化的方法获取纯度较高的抗原，并通过生物学软件设计并化学合成SmD1抗原表位肽段，用ELISA法分别检测其在SLE中的临床意义。