摘要：目的优化西罗莫司纳米结构脂质载体(sirolimus nanostructured lipid carriers,SRL-NLC)分散液的处方,并考察其体外释放度。方法采用星点设计-效应面法(central composite design-response surface methodology,CCD-RSM)优化SRL-NLC分散液的处方,并以粒径、分布系数、载药量和包封率作为评价指标,采用正相透析袋法考察SRL-NLC分散液在0.4%SDS(十二烷基硫酸钠)溶液中的释放度。结果经优化的SRL-NLC分散液平均粒径82.54 nm、分布系数0.207,Zeta电位-18.0mv、载药量1.829%和包封率91.3%,SRL-NLC分散液在0.4%SDS溶液中能持续释放120 h,累积释放量为60.1%。结论经优化的处方可行性和重现性均较好,SRL-NLC分散液在0.4%SDS溶液中累积释放度为60.1%。

摘要：目的 构建人MEK5基因的小干扰RNA（siRNA）重组腺病毒表达载体,观察其在胃腺癌SGC7901细胞中对MEK5的表达抑制.方法 设计并合成针对人MEK5基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,以MluⅠ及XhoⅠ克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,将得到的重组穿梭质粒用PmeⅠ线性化后在大肠埃希菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组.将PacⅠ酶切鉴定正确的重组腺病毒质粒经乙醇沉淀后转染293A细胞,包装得到具有感染能力的pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒.病毒体外转导人胃腺癌SGC7901细胞,Western印迹法检测其对MEK5表达的抑制.结果 经酶切和测序鉴定均证实pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误.Western印迹检测结果显示pAd-MEK5-siRNA2可抑制MEK5基因的表达,其有效抑制率达75.5 %.结论本研究成功地构建了针对人MEK5基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步深入研究MEK5基因在人胃腺癌细胞中的作用和功能奠定了基础.

摘要：目的根据基因库中的人肝素酶(HPSE)基因序列,构建针对肝素酶基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染MDA-MB-231细胞后观察其对肝素酶基因的干扰作用。方法设计肝素酶靶向的发夹状siRNA,合成2条互补的寡核苷酸链共4对,退火后连接入pGPU6/GFP/Neo载体,转化后进行序列鉴定,转染MDA-MB-231细胞,荧光照片,RT-PCR(real-time PCR)检测肝素酶mRNA的表达情况。结果设计出4条针对肝素酶的siRNA,将退火后的双链寡核苷酸片段克隆到pGPU6/GFP/Neo载体,经过阳性菌落酶切鉴定与测序,结果正确。再将siRNA载体转染到MDA-MB-231细胞株,RT-PCR检测肝素酶mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论成功构建了针对肝素酶基因的siRNA载体,转染到MDA-MB-231细胞株后细胞肝素酶基因的表达明显降低,从而为肿瘤治疗提供了一种新的方法。

摘要：护理本科实习生毕业论文的设计是临床教学过程中的一个重要环节,是培养学生学习能力、思维能力、实践能力和科学研究能力的重要途径.我院从2006年开始组织护理本科实习生进行毕业论文开题论证,通过护理部积极的组织实施和教师的认真指导,取得了较好的效果,但也发现学生在论文开题中存在选题过大、查新不准、设计不够科学等问题,影响了论文撰写质量和学生能力的培养.为提高护理本科实习生毕业论文开题的质量,本文对116篇护理本科实习生毕业论文开题中存在的问题进行分析,并提出相应对策.