摘要：目的 利用自行设计的引物、探针和新型铕螯合物BHHCT,建立一种半定量丙型肝炎病毒(HCV)RNA的检测方法。方法 收集44份丙型肝炎病人血清,20份正常人血清。利用中山大学达安基因有限公司RNA提取试剂提取HCV RNA,用自行设计的引物进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)。扩增产物cDNA与微孔板上的捕捉探针杂交后,借助于其上游引物5′端带有的生物素,与标记有铕的链霉亲合素特异性结合,将铕连接到微孔板上,在特定波长激发光激发下,发出荧光,进行检测。结果 铕标记HCV RNA检测法的线性范围为102-106cDNA拷贝,敏感性、特异性均为100％。结论 铕标记RT-PCR检测HCV RNA法的线性范围宽,敏感性、特异性好,检测时间短,无放射性污染,有推广应用的价值。

摘要：目的测定头孢哌酮和哌拉西林与克拉维酸、舒巴坦、三唑巴坦3种β内酰胺酶抑制剂的不同复方的最低抑菌浓度(MIC)、抗生素后效应(PAE)、β内酰胺酶抑制剂后效应(PLIE)和亚抑菌浓度后效应(PASME)。方法以肉汤稀释法测定MIC;以菌落计数法测定菌落形成单位(CFU),根据CFU做生长曲线,计算PAE、PLIE、PASME。结果不同比例复方对产β内酰胺酶菌株的MIC较单方呈2～256倍的降低。无论单方还是复方均无长PAE。3种β内酰胺酶抑制剂的PLIE对于大肠埃希菌有正有负(-2.25h～>5h),而对于肺炎克雷伯菌均为正值(0.34h～5.37h)。对于肺炎克雷伯菌,0.2MIC的头孢哌酮/舒巴坦(1/1)的PASME为0.32h,0.1MIC、0.2MIC的哌拉西林/克拉维酸(8/1)的PASME分别为2.96h、4.41h。结论同时具有长PLIE及PASME的复方,PLIE、PASME较其半衰期在给药方案的设计中更为重要;PAE、PLIE、PASME作为重要的药效动力学参数,可应用于评价新抗菌药物的药效学和优化给药方案。

摘要：目的　建立荧光定量PCR(FQ PCR)检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法。方法　以患者鼻咽部脱落细胞内DNA作为样本 ,以EB病毒基因序列中EBNA1(核抗原 1)基因片段作为扩增的靶DNA ,同时以人 β 珠蛋白DNA片段作为内参照 ,合成了两对引物 ,并设计了两个特异的荧光探针 ,优化了FQ PCR反应体系 ,同时对这两个片段进行扩增 ,每一标本得到两个Ct值 :CtE和Ctβ ,计算CtE/Ctβ ,得到单位细胞EB病毒的相对量。 结果　临床标本 2 9例中 ,阳性 2 2例 ,阴性 7例 ,临床资料证实阳性者全部为鼻咽癌 (NPC) ,阴性者全部为非鼻咽癌。结论　建立的FQ PCR检测鼻咽部脱落细胞中EBV DNA的方法 ,能反映单位细胞病毒的复制情况 ,可用于NPC的筛查 。

摘要：目的测定头孢曲松-舒巴坦复方制剂(2∶1)对产ESBLs大肠埃希菌的MIC和持续效应。后者包括抗生素后效应(PAE)、内酰胺酶抑制剂后效应(PLIE)和亚抑菌浓度后效应(PASME)。方法以肉汤试管稀释法测定MIC。将大肠埃希菌与一定冲击浓度的头孢曲松-舒巴坦作用2h后,在不同药物浓度条件下继续培养,用倾皿培养法进行菌落计数(CFU/mL),以log(CFU/mL)对培养时间(h)绘制生长曲线,计算PAE、PLIE和PASME。结果①头孢曲松和头孢曲松-舒巴坦对大肠埃希菌的MIC分别为8/4mg/L和大于256mg/L。②头孢曲松和头孢曲松-舒巴坦对大肠埃希菌的PAE为负值或很短。③舒巴坦对大肠埃希菌的PLIE在低冲击浓度(2MIC、4MIC)时为负值或很短,当浓度增加至10MIC时,其PLIE>6.5h。结论时间依赖的头孢曲松-舒巴坦对产ESBLs大肠埃希菌的PLIE存在明显的浓度依赖效应,为了提高头孢曲松-舒巴坦的临床疗效,其给药方法的设计除了要延长T>MIC外,适当提高给药的峰浓度或许亦有利于疗效的发挥。

摘要：目的研究模拟肺癌患者血浆DNA中APC基因甲基化最低检测限,确定不同甲基化检测技术在早期肺癌诊断中的价值。方法用普通甲基化特异性基因扩增(methylation specific PCR,MSP)方法检测肺癌细胞株NCI-H460细胞APC基因,以酚-氯仿经典方法提取NCI-H460细胞DNA,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入相同的健康人血浆200μl中去,得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟血浆样本中提取血浆DNA。对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以Sybr-GreenⅠ为染料进行实时荧光定量MSP检测,同时进行普通MSP检测。结果NCI-H460细胞中的APC基因启动子1A区719位点存在甲基化,实时荧光定量MSP检测模拟肺癌患者血浆APC基因甲基化的最低检测限为在200μl血浆中能检测出102个肿瘤细胞的DNA,而以普通MSP检测,200μl血浆中需投入103个以上肿瘤细胞的DNA才有弱阳性条带。实时荧光定量MSP检测技术比普通MSP检测的敏感性至少高出10倍。结论实时荧光定量MSP比普通MSP检测灵敏度高,该技术用于肺癌患者血浆DNA甲基化检测,可能有助于肺癌早期诊断。

摘要：目的 评估中国21 ～49岁男性孕前健康风险暴露状况,分析2010至2012年男性孕前健康风险暴露的变化情况.方法 利用“中国育龄夫妇孕前健康风险暴露评估核心指标”,对2010年1月1日至2012年12月31日参加“国家免费孕前优生健康检查项目”的31个省、市、自治区220个试点县的21 ～49岁男性2 030 083人进行孕前风险暴露评估.评估的风险包括行为风险、传染病风险和遗传风险等3类与子代健康密切相关的风险.分析男性孕前风险状况及其变化情况.结果 2010至2012年31省、市、自治区21～49岁男性吸烟率为31.19％（622 837/1 997 051）,中位吸烟量为10支/d,每日吸烟量随年龄增加而增大;饮酒率为31.81％（634 556/1 994 925）,中位饮酒量随年龄的增加而增大;有出生缺陷患病史、家族近亲结婚史、遗传病家族史者分别占0.12％ （2 344/1 994 324）、0.20％（4043/1 997 707）和0.94％（18 736/2000005）;有乙型肝炎病史、性病史者分别占0.67％（13 317/1 988 904）和0.05％（912/1 988 904）;孕前乙型肝炎表面抗原阳性检出率、梅毒螺旋体初筛异常的检出率分别为6.32％（124 274/1 965 821）和0.37％（7 169/1 947 021）;3类风险中,风险暴露最高的是行为风险、最低的是遗传风险.行为风险、遗传风险、传染病风险中的性病感染风险暴露均以2012年为低,而传染病风险中的乙肝感染风险暴露以2010年为低.结论 31省、市、自治区农村21～49岁男性孕前健康状况总体良好,但存在一定行为、遗传和传染病感染风险暴露.除乙肝病毒感染风险外,2010、2011和2012年孕前健康风险暴露总体呈下降趋势.

摘要：目的 评估中国育龄妇女孕前健康风险暴露状况,分析2010至2012年中国育龄妇女孕前风险暴露状况的变化情况.方法 利用中国育龄夫妇孕前健康风险暴露评估核心指标对2010年1月1日至2012年12月31日参加国家免费孕前优生健康检查项目的31个省、市、自治区220个试点县的21 ～49岁育龄妇女2 120 131人进行孕前风险评估.评估的风险包括遗传风险、生殖风险、慢病风险、感染风险、营养风险、行为风险、环境风险以及社会心理风险等8类风险.分析育龄妇女孕前风险暴露状况及其变化情况.结果 中国21 ～ 49岁育龄妇女孕前健康风险暴露的检出率为54.63％（1 124 552/2 058 648）,其中21～24岁组53.05％ （262 646/495 092）最低,45～49岁组66.94％（7 616/11 379）最高,风险随着年龄的增大而增大;8类风险中,位于前3位的暴露风险分别是营养风险35.74％ （726 826/2 033 730）、感染风险10.16％ （206 983/2 037 022）和慢性病风险6.96％（142 130/2 042 110）.2010、2011和2012年妇女孕前健康风险暴露的检出率分别为55.35％（182 087/328 991）,56.03％（502 888/897 511）和52.82％（439 577/832 146）.营养风险、感染风险、行为风险和遗传风险暴露均以2011年为高,而8类风险均以2012年为低;3年中不同年龄组妇女的8类孕前健康风险暴露的检出率均以21～ 24岁组为低,以45 ～49岁组妇女最高,孕前健康风险暴露有随妇女年龄增加而增大的趋势.结论 中国育龄妇女孕前健康状况总体良好,但存在一定的风险.2010、2011和2012年中国育龄妇女孕前健康风险暴露呈下降趋势.