摘要：目的:介绍一种简易、多用途的小鼠固定装置的制作和使用方法。方法:选用废弃的50 m L离心管,按设计方案进行切割、组装制成简易小鼠固定装置。选取60只小鼠,随机分为2组,对照组采用传统固定方法,研究组则采用本装置固定,先后对小鼠进行尾静脉注射、断尾采血、膝关节腔内注射,观察比较两组操作时间和成功率等指标。结果:单个50 mL离心管仅重约12 g,制作时间约15 min。对照组和研究组小鼠尾静脉注射时间分别是(32.10±1.97)s和(30.27±2.20)s,成功率均为100%,断尾采血时间分别是(30.10±1.73)s和(28.67±1.55)s,成功率也均为100%,两组在操作时间上差异均具有统计学意义(P0.05)。两组膝关节腔内注射时间分别是(40.77±2.73)s和(38.73±2.16)s,成功率分别为83.33%和95.00%,两组在操作时间及成功率方面差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:该小鼠固定装置具有材料易得、制作简单、携带方便、用途多样等优点,为实验小鼠的固定提供了一种新的安全、实用的方法。

摘要：背景:中药对早期糖尿病肾病有较好的防治作用,这一作用是基于中药有效成分的多样性而作用于糖尿病肾病不同靶点所引起的。目的:观察消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增生的影响,并探讨其可能的作用机制。设计:对照观察。单位:南京医科大学第一附属医院内分泌科。材料:实验于2003-07/2004-05在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成。大鼠系膜细胞株HBZY-1:购自武汉大学中国典型培养物保藏中心。方法:系膜细胞按说明进行传代培养备用。①不同刺激浓度分组:高糖+消可宁组(消可宁分别取20.0,40.0,60.0,80.0,120.0,200.0g/L);正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30mmol/L,分别刺激72h进行观察。不同刺激时间分组:正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30mmol/L;高糖+消可宁组,细胞液中葡萄糖浓度为30mmol/L,消可宁浓度为60g/L;3组分别在刺激24,48,72h给予观察。②将配置好的细胞悬液放入96孔培养板,每孔加200μL。培养板放置体积分数为0.05CO2,37℃孵箱24h后,取出弃上清,加入各组含不同药物及浓度的细胞液,每孔200μL。将96孔板放入37℃含体积分数为0.05的CO2空气和100%湿度培养箱中孵育。不同刺激浓度组别于72h后分别向板孔中加20μL4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),不同刺激时间组别于24,48,72h后分别向板孔中加20μL4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),之后均在37℃培养箱中温育4h,置镜下观察4-甲基偶氮四唑蓝掺入细胞内,吸出上清,加入150μL二甲基亚砜使用甲醇溶解,用平板摇床摇匀振荡30s,于酶标仪492nm波长读数,并记录吸光度值。主要观察指标:不同培养时间及不同消可宁培养浓度下系膜细胞增殖情况(吸光度值)。结果:①不同刺激时间各组系膜细胞增殖的情况:(下转第201页)高糖对照组刺激24,48,72h系膜细胞吸光度值分别为0.685±0.010,0.750±0.087,0.659±0.018,高于正常糖对照组(0.586±0.054,0.598±0.040,0.527±0.047,P<0.05),高糖对照组及正常糖对照组葡萄糖刺激系膜细胞48h吸光度值高于24h(P<0.05),刺激72h吸光度值低于48h,(P<0.05)。高糖+消可宁组药物刺激72h后系膜细胞吸光度值为0.538±0.023,低于高糖对照组(P<0.05)。②不同浓度消可宁刺激系膜细胞增生情况:消可宁自浓度为60.0g/L起,可明显的阻止高糖对系膜细胞的过度刺激作用,并随着浓度的增加,这种作用逐渐增强,但过高的浓度(120.0g/L)则出现细胞脱落死亡,极高的药物浓度(200.0g/L)则不见存活的细胞。结论:高糖培养的系膜细胞在消可宁刺激72h后表现出较强的抑制系膜细胞增殖的作用,在一定范围内呈剂量依赖的方式,但过高的药物浓度又表现出很强的细胞毒性。

摘要：目的:构建小鼠NOMO1基因RNA干扰载体,比较其对P19细胞NOMO1基因的抑制效率,以研究NOMO1基因与P19细胞向心肌细胞方向分化的关系。方法:利用Designer3.0软件设计小鼠NOMO1基因干扰片段,合成shRNA序列,再行寡核苷酸双链的合成,退火后形成的寡核苷酸双链克隆到pGPU6/Hygro载体的黏性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒扩增,质粒DNA抽提,使用PstⅠ、BamHⅠ进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆。将小鼠NOMO1基因RNA干扰载体转染P19细胞,以RT-PCR技术验证NOMO1基因在P19细胞中的mRNA表达。以DMSO诱导分化方案诱导P19细胞向心肌细胞分化,采用定量RT-PCR技术检测P19细胞中α-MHC等基因mRNA的表达,评估NOMO1与P19干细胞向心肌细胞方向分化的关系。结果:双酶切证实shRNA正确插入质粒,测序结果表明插入的序列正确。载体转染的P19细胞筛选稳定表达株,经RT-PCR和Western blot验证4个位点设计的干扰质粒对NOMO1在P19细胞中的mRNA表达均具有较高的抑制效率。转染后P19细胞的α-MHC基因mRNA表达则显著下调(P<0.05)。结论:成功构建小鼠NOMO1基因RNA干扰载体,为研究NOMO1基因与P19细胞向心肌细胞方向分化的关系提供了稳定的转染细胞工具,NOMO1可能通过诱导α-MHC等基因表达,促进P19干细胞向中胚层的分化。

摘要：目的通过临床观察评价国产四类新药复方盐酸二甲双胍片治疗2型糖尿病的临床疗效和安全性。方法采用随机、双盲、双模拟、平行对照、多中心研究设计,用药观察周期为12周。试验组(A)72例服用复方盐酸二甲双胍片加模拟格列苯脲片;对照组(B)72例服用盐酸二甲双胍片加格列苯脲片。结果降血糖效果:试验组和对照组治疗2周、4周、8周、12周后各时点空腹血糖都较治疗前有显著降低,但两组间下降率比较在2周、4周、8周无统计学差异,仅在12周时,有统计学差异,对照组下降率比试验组低。在治疗12周后,两组餐后2小时血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、都较用药前显著下降,但组间比较无统计学差异。空腹胰岛素、空腹C肽、餐后2小时胰岛素、餐后2小时C肽仅试验组餐后2小时C肽较用药前明显升高,其余指标两组与用药前比较无统计学意义,组间比较也无差异。两组病人用药后疗效分析,有效率和显效率相近,无统计学差异。安全性观察:两组不良反应共7例,两组不良反应发生率比较无显著性意义。结论对糖尿病患者而言,复方二甲双胍是一种安全有效的降糖药物,可予临床推广使用。

摘要：目的探讨适合住院患者胰岛素注射部位轮换的方法,提高胰岛素注射质量。方法将307例使用胰岛素治疗控制血糖的糖尿病患者按时间顺序分为观察组154例及对照组153例。对照组按照常规的腹部环形轮换法注射胰岛素,观察组对照自行设计的胰岛素注射部位轮换图及使用说明进行胰岛素注射。结果观察组注射部位不规范轮换率和一周内注射重复率显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论运用胰岛素注射部位轮换图能较好地提高护士为患者注射胰岛素的规范性,减少了由于护士轮班而造成的部位选择不确定性及注射部位的重复率。

摘要：目的探讨基于CDIO教育模式的护理创新实践在提高护士胰岛素注射皮下脂肪增生识别技能中的应用效果。方法以2020年南京医科大学第一附属医院内分泌科60名专科护士为研究对象,其中内分泌科一病区30名护士设为对照组,二病区护士30名设为观察组。对照组采用传统教育方法,观察组使用CDIO教育模式管理,通过构思-设计-实现-运作4个步骤进行护士专项技能教育指导。比较两种教育模式下,护士对胰岛素注射皮下脂肪增生的及时发现率和正确识别率。结果观察组护士对胰岛素注射皮下脂肪增生及时发现率为86.8%,高于对照组护士的27.4%(χ^(2)=93.364,P<0.05)。观察组护士对胰岛素注射部位皮下脂肪增生正确识别率为23.1%,高于对照组护士的10.7%(χ^(2)=5.668,P<0.05)。结论基于CDIO教育模式的实践可提高护士对胰岛素注射部位皮下脂肪增生及时发现率和正确识别率,该模式可推广至范围更广的非内分泌科护士专业培训甚至胰岛素注射患者的健康教育中。

摘要：目的：避免胰岛索紧急脱敏治疗过程中因操作不熟练、计算不准确等人为因素对结果造成的影响，提高脱敏治疗的效率。方法：选择2006年3月～2014年9月收治的2型糖尿病患者9例，使用自行设计的“皮试结果观察记录表”和“胰岛素脱敏治疗执行单”，方便临床护士操作、核对、观察和记录。结果：9例患者实施脱敏治疗均获得成功，无明显低血糖反应发生。结论：运用胰岛素脱敏治疗执行单，流程简单易执行、表格简明易掌握，简化了护士反复计算的繁琐过程且节省大量时间，便于临床护士快速、熟练、准确地执行，提高了脱敏治疗的效率，保证了患者的安全。

摘要：目的探讨临床路径教学法、以问题为基础教学法联合教学在内分泌科临床见习教学中的应用效果。方法选取177名2018年9月1日-2019年2月28日某医科大学2015级临床医学本科生作为教学研究对象,将177名某医科大学2015级临床医学本科生随机分为CPTM+PBL联合组、PBL组及LBL组,每组各59人。采用内分泌科教研室设计的教学问卷调查表,分别从理论知识掌握度、主观能动性训练及临床诊疗思维培养,对3组学生进行教学效果评估,教学效果采用教学前后评分的差值δ表示。结果与教学前相比较,教学后LBL组学生只有理论知识掌握度评分提高,P<0.05,而PBL组及CPTM+PBL联合组学生的理论知识掌握度、主观能动性训练及临床诊疗思维培养的评分显著提高,差异具有统计学意义,P<0.001。与LBL组相比较,PBL组及CPTM+PBL联合组学生的理论知识掌握度、主观能动性训练及临床诊疗思维培养的δ评分均得到提高,P<0.05,其中CPTM+PBL联合组学生的临床诊疗思维培养δ评分更高于PBL组,P<0.05。结论在内分泌科临床见习中,CPTM与PBL联合教学可以相互取长补短,培养学生更加全面、完整的临床分析能力,提高教学质量。

摘要：目的构建过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因RNA干扰的真核表达载体,转染小鼠3T3-L1前体脂肪细胞,并鉴定其干扰效果。方法选择设计2条针对小鼠PPARγ基因的干扰靶序列,构建真核表达载体PLKO.1-PPARγ-GFP-shRNA1/2,以PCR鉴定并进行序列分析。证实质粒构建成功后,转染小鼠3T3-L1前体脂肪细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(eGFP)的表达,计算转染效率;采用实时定量PCR法和Western印迹检测载体对PPARγ基因的表达干扰效果;采用油红染色观察PPARγ在脂肪细胞分化过程中对脂滴形成的作用。结果成功构建PPARγ干扰质粒PLKO.1-PPARγ-GFP-shRNA1/2,PCR和DNA测序证实序列与设计完全一致;荧光显微镜下观察到3T3-L1细胞绿色荧光蛋白的表达,证实重组质粒成功转入细胞,转染效率(92.67±1.53)%;实时荧光定量PCR和Western Blot印记试验均显示PLKO.1-PPARγ-GFP-shRNA1/2转染的3T3-L1细胞PPARγ基因分别被特异性抑制;靶点1干扰效率[(78.2±2.1)%]高于靶点2[(55.8±4.3)%],差异有统计学意义(P<0.05),靶点1初步鉴定为有效靶点。油红染色显示PLKO.1-PPARγ-GFP-shRNA1/2转染均可抑制3T3-L1脂肪细胞分化和脂滴聚集。结论成功构建了靶向干扰PPARγ基因的shRNA真核表达质粒PLKO.1-PPARγ-GFP-shRNA1/2,并筛选出有效抑制靶基因的表达质粒,初步验证PPARγ基因对脂肪细胞分化的作用,为进一步研究提供了有效的分子生物学工具。

摘要：目的探讨信息化查检表在非内分泌专科护士胰岛素笔规范注射培训中的应用效果。方法设计胰岛素笔注射查检表,对接入信息化护理系统;由各科室护士长对照查检表负责所在科室护士的基线调研及规范注射的培训落实;3个月后,护理部质量管理委员会便利抽取88名护士集中进行培训后考核调研。结果护士胰岛素笔规范注射的总不合格率由7.86%降至3.50%。结论胰岛素笔注射查检表降低非内分泌专科护士胰岛素笔规范注射的不合格率,推动全院胰岛素笔注射的同质化护理行为。