摘要：目的设计和开发一种^(68)Ga标记的蛙皮素(BBN)类似物分子影像探针^(68)Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)-聚乙二醇(PEG)4-BBN,研究其靶向胃泌素释放肽受体(GRPR)高表达前列腺癌及在胰腺组织中低摄取的能力。方法基于BBN多肽的氨基酸序列,设计合成前体DOTA-PEG4-BBN,并在^(68)Ga标记后进行质量控制。选取GRPR高表达的前列腺癌PC3荷瘤裸鼠模型和GRPR低表达的结直肠癌HT29荷瘤裸鼠模型各3只,通过microPET/CT显像对比观察^(68)Ga-DOTA-PEG4-BBN的肿瘤摄取情况。选取PC3荷瘤裸鼠模型6只,其中3只模型鼠使用胃泌素释放肽阻断1 h,通过microPET/CT显像对比观察^(68)Ga-DOTA-PEG4-BBN的肿瘤摄取情况。显像后,对未阻断组3只PC3荷瘤裸鼠模型的离体组织进行放射性计数,测定^(68)Ga-DOTA-PEG4-BBN生物分布情况,以每克组织百分注射剂量率(%ID/g)表示。采用两独立样本t检验分析数据。结果^(68)Ga-DOTA-PEG4-BBN合成时间40 min,放射化学产率为50%~60%(未衰变校正),放化纯>95%;血清37℃温育4 h,其放化纯仍>95%。MicroPET/CT显像结果表明,PC3肿瘤部位的摄取是GRPR阻断后肿瘤部位的3.2倍[(1.34±0.24)与(0.42±0.03)%ID/g;t=5.47,P=0.005]。未阻断组PC3荷瘤裸鼠模型生物分布显示,^(68)Ga-DOTA-PEG4-BBN注射后1 h显像,15 min后胰腺的摄取[(0.150±0.058)%ID/g]明显低于肾脏、肺、肝脏的摄取[(9.452±0.234)、(0.720±0.041)、(1.572±0.213)%ID/g;t值:11.28~53.02,均P<0.001],探针对GRPR高表达荷瘤裸鼠模型的肿瘤/胰腺摄取比值可达16.92。结论新型探针^(68)Ga-DOTA-PEG4-BBN不仅能够特异性识别GRPR高表达肿瘤,还在胰腺组织中呈现低摄取,展现出其在前列腺癌分子影像诊断领域潜在的应用价值。

摘要：输尿管支架是泌尿外科常用的内引流工具之一,是泌尿外科手术的基本组成部分。然而输尿管支架留置会引起一系列并发症,这不仅影响疾病的治疗效果,还会增加再入院风险,降低患者的生活质量。目前除了改进输尿管支架的材料与设计外,健康宣教和药物干预也是预防和治疗输尿管支架相关并发症的重要手段。文章主要对输尿管支架相关并发症及其防治策略研究进行综述。

摘要：输尿管支架已经成为临床治疗泌尿系统疾病最重要的设备之一，关于其材料应用的研究正在从支架材料研究、涂层技术革新等方面不断发展，以应对更为复杂的临床需求。目前有关双J管的改良设计层出不穷，可降解的生物材料也有望成为未来主流，输尿管涂层技术以及药物洗脱支架技术也为输尿管支架提供了一个很有希望的研究方向。本文旨在回顾近五年输尿管支架材料的研究进展，综合描述输尿管支架材料的最新进展，以指导临床应用与针对性治疗。

摘要：目的 建立肾癌腹腔镜下肾部分切除术中肾段动脉阻断的风险评估模型.方法 第一阶段回顾性分析2009年12月至2011年9月107例行腹腔镜下肾段动脉阻断肾部分切除术的肾癌患者的临床资料.男63例,女44例.年龄11 ～ 80岁,平均（58.1±10.1）岁.该阶段通过医生经验及CTA决定血管阻断方案.经过多重Logistic回归分析,利用向后消除方法选择变量,并建立风险评估模型以辅助设计阻断方案.第二阶段于2011年10月至2014年6月应用模型对141例肾癌患者行腹腔镜下肾段动脉阻断肾部分切除术.男84例,女57例.年龄51 ～ 75岁,平均（59.9±8.6）岁.比较两阶段手术结果.结果 将肾段动脉角度、目标动脉内径、距腹主动脉距离、肾门距离、肾中线距离等5个潜在因素纳入研究,通过Logistic回归分析最终建立回归方程.与第一阶段相比,第二阶段应用模型后,阻断成功率从74.8％ （175/234）提高至94.2％（227/241）（P＜0.001）,手术总时间从（88.6±10.9）min降至（80.2±16.6） min （P＜ 0.001）,术中出血从（198.7±111.6）ml减少至（168.5±117.8）ml （P =0.042）.热缺血时间、术后住院天数、R.E.N.A.L评分和最终阻断支数与第一阶段相比无明显差异（P＞0.05）.结论 风险评估模型能够预测阻断成功率,有助于设计肾段动脉阻断方案.

摘要：背景:国内外关于邻苯二甲酸二丁酯导致雄性生殖系统畸形发生机制的探讨多集中于邻苯二甲酸二丁酯干扰胚胎期睾丸睾酮合成途径的研究,对其基因表达调控的因素及功能蛋白质之间相互干扰的网络效应却并不明了。蛋白质组学能够从整体水平反映蛋白质组分,并筛选功能相关蛋白。目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白表达谱的影响,分离并鉴定差异表达蛋白质。设计、时间及地点:随机对照动物实验,实验于2006-08/2007-10在南京医科大学动物实验中心及南京医科大学生殖医学重点实验室完成。材料:将孕鼠随机分为实验组和对照组,每组5只。妊娠14～18d。方法:实验组按800mg/(kg·d)染毒孕鼠,对照组予大豆油5mL/d。妊娠21d取出胚胎大鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定,并选择关键蛋白进行验证。主要观察指标:①两组蛋白的电泳差异比较。②酶切,MALDI-TOF分析,数据库检索,生物信息学检索结果。③两组蛋白Western blotting检测及免疫组织化学染色结果。结果:共筛选出33个差异表达蛋白(t≥2.831,P<0.05),其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,包括膜联蛋白A5、过氧化物酶6、泛素羧基末端水解酶L1等。运用Western blotting,验证了膜联蛋白A5在实验组表达量明显高于对照组,通过免疫组织化学方法,发现膜联蛋白A5主要定位在胎鼠睾丸Leydig细胞中。结论:实验运用蛋白质组学方法,建立了邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露雄性仔鼠睾丸与正常仔鼠睾丸蛋白质差异表达谱系,鉴定出14个蛋白点,确定了膜联蛋白A5在胎鼠睾丸的定位。

摘要：目的明确超重及肥胖人群肾周及皮下脂肪组织基因表达的变化。方法选取97例行肾脏手术的患者，其中35例超重/肥胖者，62例非肥胖者。对2组人群的临床资料、斜腹部皮下及肾周脂肪组织的各种基因表达水平进行分析。结果超重/肥胖组人群的体重指数、腰围以及收缩压、静息心率、空腹血糖、血肌酐较非肥胖组明显增高（P〈0.05或P〈0.01）。超重/肥胖组肾周脂肪组织的脂肪细胞体积明显较非肥胖组增大，解耦联蛋白1（UCP1）的mRNA和蛋白表达量明显减少，同时超重/肥胖组人群肾周脂肪中的CIDEA、脂联素mRNA表达量降低，而瘦素、单核细胞趋化蛋白1、白细胞介素（IL）-6、IL-10 mRNA表达量增高，差异具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。2组人群的斜腹部皮下脂肪相关基因表达无明显差异。结论不同部位的脂肪组织特征不同，在肥胖发生发展中的作用也不尽相同。超重/肥胖患者肾周脂肪组织的棕色化功能减弱，同时伴有脂肪因子的表达改变。

摘要：目的总结"零缺血"技术在肾肿瘤保留肾单位手术中的研究进展。方法以"肾肿瘤""零缺血""肾部分切除术""保留肾单位手术""栓塞""激光""水刀""微波消融""射频消融"和"renal cell carcinoma""kidney neoplasms""zero ischemia""off-clamp partial nephrectomy""nephron sparing surgery""embolization""laser""water jet""microwave""frequency ablation"为中、英文关键词,在中国知网、万方数据库、SinoMed、PubMed等中英文数据库中检索2002年1月—2018年8月间有关"零缺血"相关技术,以及其在肾肿瘤保留肾单位手术中应用的相关文献,检索到文献1 482篇,剔除内容不符合、无法获取全文、重复性研究或存在设计缺陷的文献,最终纳入42篇文献,对其进行总结、分析。结果"零缺血"技术是基于对供应肾肿瘤的段动脉进行解剖分离并给予特异性阻断,或者在切除肿瘤时不阻断肾蒂血管的方法。在治疗肾肿瘤的同时,可最大限度地保护肾脏功能,在肾肿瘤的治疗中具有重要作用,可操作性强;但应关注该技术的相关并发症。结论"零缺血"技术在肾肿瘤保留肾单位手术中具有重要作用,显示出了很好的应用前景;但其安全性、实用性仍需进一步研究探讨。

摘要：背景:前期动物实验结果显示在肾移植前或移植后注射4次1×107的间充质干细胞能够诱导免疫耐受,延长移植物的生存时间,但是效果明显弱于环孢素A。目的:在前期实验基础上,通过调整间充质干细胞的给予次数,并比较不同剂量的效果,进一步确定具体给药方案。设计、时间及地点:随机分组,细胞学体内实验,于2008-03/12在南京医科大学动物实验中心完成。材料:以雄性Wistar大鼠为供体,雄性Lewis大鼠为受体,共35对,建立肾移植模型。运用密度梯度离心法由3只健康雄性Wistar大鼠骨髓内分离培养间充质干细胞。方法:建模后,采用抽签法将受体随机分为4组:低、高剂量间充质干细胞组(n=10,11),于开放血流前1周及开放血流时分别静脉注射间充质干细胞1×106,1×107,此后1次/d,持续2周;环孢素A组(n=8),移植后2d腹腔注射经PBS液稀释的环孢素A,0.5mg/(kg·d),1次/d至死亡;无治疗对照组(n=6),移植后直接腹腔内注射PBS液,1次/d至死亡。主要观察指标:移植后第3,5,10,15,25,40天观察血清肌酐水平,移植后第4天各组中随机抽取2只受观察移植肾组织学改变,同时记录移植受体大鼠生存期。结果:受体大鼠35只均成功建立模型进入结果分析。与环孢素A相比,使用1×107间充质干细胞治疗对受体大鼠生存期有类似的延长作用。1×106间充质干细胞延长受体存活时间作用明显减弱。不同剂量间充质干细胞组移植后第5天肌酐水平较无治疗组及环孢素A治疗组均有一定程度降低(P<0.05),其他时间点差异均不显著。高剂量间充质干细胞及环孢素A组移植肾间质浸润较其他组有明显改善,绝大多数肾小球及动脉均无特殊改变。无治疗对照组表现出典型的严重急性排斥反应,低剂量间充质干细胞组表现出的排斥反应明显缓和。结论:移植前及移植中给予2剂后,在移植后2周内每日给予1×107的间充质干细胞可以达到有效地免疫调节作用,保护移植后早期移植物功能,延长动物的生存期,作用与环孢素A类似。

摘要：目的:研究人类精子膜表面是否存在电压依赖性阴离子通道(VDAC),并研究其生物学特性。方法:设计VDAC的特异性引物,从睾丸cDNA文库中用PCR技术扩增该通道的基因产物,用分子克隆技术体外表达重组VDAC的蛋白质。从精子表面用1%TritonX-100提取及氯仿/甲醇分离疏水性的膜表面蛋白,用免疫印迹法检测精子表面是否存在天然VDAC蛋白质。结果:人类睾丸cDNA文库含有VDAC的基因表达,人类精子膜表面发现靠N端α螺旋连接在精子膜上的VDAC蛋白质。结论:人类精子膜表面镶嵌VDAC蛋白质,该通道是以α螺旋连接在精子膜上,调控精子膜内外离子的转运和信号的转导,对精子的运动和功能至关重要。

摘要：目的构建含人类疱疹病毒8型(HHV-8)致瘤基因K1的真核表达质粒,并将其导入内皮细胞(EC)和前列腺癌细胞(PC-3)中进行表达。方法根据GenBank中登记的K1基因核酸序列设计PCR引物,在其5′端及3′端分别引入Xho I和Xba I酶切位点,并在其下游引入Flag标签蛋白序列用于后期K1蛋白表达的检测。以含有K1基因的HHV-8 DNA为模板扩增K1基因,经双酶切纯化后将其克隆入真核表达载体pCI-neo中。重组质粒经核酸测序鉴定后分别瞬时转染EC和PC-3细胞系,于转染后48 h提取细胞RNA及蛋白,分别以RT-PCR和Western blot检测K1基因的转录和表达情况。结果成功构建了含K1基因的重组质粒pCI-K1。核酸序列分析显示,克隆的K1基因全长928 bp,与GenBank中登记的K1基因100%同源,引入的Flag序列完全正确。经pCI-K1转染后的EC及PC-3细胞中均可检测到K1 mRNA转录和蛋白表达。结论重组质粒pCI-K1构建成功,并在EC和PC-3细胞中正确表达。