摘要：目的评价治疗新生儿持续性肺动脉高压(PPHN)措施的有效性和安全性,为临床应用提供指导。方法通过数据库检索出符合纳入分析条件的相关文献9篇,采用Meta分析方法进行定性、定量综合分析,得出合并优势比(OR)及其95%可信区间。结果目前尚无随机病例对照试验(randomized controlled trial,RCT)对过度通气、高频通气、控制性碱血症、扩血管药物(硫酸镁、妥拉苏林、前列腺素与前列环素、米力农)肺表面活性物质、治疗PPHN的临床效果进行评价;口服西地那非可降低PPHN患儿的氧合指数(OI)(P0.05);成本-效果分析吸入一氧化氮(iNO)治疗PPHN,每个患儿多花费1141美元,增量成本-效果比为33234美元;ECMO治疗PPHN可减少住院期间新生儿病死率(P0.05)。结论iNO可显著升高患儿的动脉血氧分压,ECMO治疗可减少患儿的病死率,但增加治疗成本;口服西地那非治疗PPHN疗效评价的随机对照实验(RCT)样本量较少,需要进一步加大样本量。对传统治疗PPHN的措施应进行设计严格、多中心、大样本的RCT。

摘要：目的探讨支气管肺发育不良(BPD)早产儿伴肺动脉高压(PH)的危险因素,并构建早期预测PH发生的列线图预测模型。方法采用回顾性队列研究设计,分析2019年1月至2022年12月入住苏新云新生儿围生期协作网7家合作单位新生儿重症监护病房出生胎龄<32周且确诊BPD的777例早产儿的临床资料,包括出生体重、出生胎龄等围生期资料及住院期间临床指标。计算机随机按8∶2比例分为训练队列和验证队列,采用非参数检验或χ^(2)检验比较两队列间差异;根据是否存在PH,分为PH组和非PH组。在训练队列中采用单因素Logistic回归和多因素Logistic回归分析筛选BPD伴发PH的高危因素,基于BPD严重程度和高危因素构建列线图预测模型,并采用Bootstrap法进行内部验证。最后,应用训练队列和验证队列对预测模型进行模型区分度准度、临床适用度的评估。结果777例BPD早产儿中130例伴发PH,发生率为16.7%。777例BPD早产儿出生胎龄为28.7(27.7,30.0)周,其中男454例(58.4%),女323例(41.6%)。训练队列共622例,其中PH组105例、非PH组517例;验证队列共155例,其中PH 25例。训练队列多因素Logistic回归分析结果显示,5 min Apgar评分低(OR=0.87,95%CI 0.76~0.99),剖宫产出生(OR=1.97,95%CI 1.13~3.43),小于胎龄(OR=9.30,95%CI 4.30~20.13),有血流动力学意义的动脉导管未闭(OR=4.49,95%CI 2.58~7.80),晚发型败血症(OR=3.52,95%CI 1.94~6.38)和呼吸机相关性肺炎(OR=8.67,95%CI 3.98~18.91)均为BPD伴发PH的独立危险因素(均P<0.05)。基于独立危险因素和BPD严重程度构建列线图模型,训练队列和验证队列中列线图模型的受试者工作特征曲线的曲线下面积分别为0.83(95%CI 0.79~0.88)、0.87(95%CI 0.79~0.95),列线图校准曲线接近于理想的对角线,临床决策曲线高于两条极端曲线。结论5 min Apgar评分低、剖宫产出生、小于胎龄、合并有血流动力学意义的动脉导管未闭、晚发型败血症、呼吸机相关性肺炎的BPD早产儿发PH的风险增加。据此及BPD严重程度建立的列线图模型为预测BPD伴发PH的发生风险提供一定的参考价值,有助于临床医生早期进行个体化干预。

摘要：目的:构建心肌细胞特异性过表达miR-19b的转基因小鼠,并对其进行表型分析。方法:先确定载体插入的酶切位点,根据CloneEZRPCR Cloning Kit重组原理设计相应引物,以小鼠基因组为模板克隆出带有miR-19b前体序列(pre-miR-19b)的目的片段,利用重组酶连接到带有alpha-MHC启动子的载体上。将所得载体线性化后,采用显微注射方法注射到小鼠胚胎干细胞内。再将所得的重组胚胎干细胞移植入假孕的C57BL/6J雌鼠子宫内,在所得的子代,即Founder小鼠中采用特异的引物鉴定出转基因小鼠,并选出相应的品系,进行表型分析。结果:成功构建miR-19b转基因小鼠,且miR-19b转基因小鼠舒张期室间隔厚度、舒张期左室游离壁厚度以及射血分数均有升高。结论:心肌特异性过表达miR-19b可以导致心脏肥大。

摘要：目的构建鼠miR-20b慢病毒表达载体,检测其在P19细胞中的过表达效果。方法设计并合成含有miR-20b成熟序列的编码短发卡状RNA(shRNA)的双链DNA。将shRNA克隆入慢病毒载体,与Pcgvp、Rev和Vsvg包装质粒共转染HEK-293T细胞包装病毒,收取病毒上清液,纯化后感染P19细胞。荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量PCR检测慢病毒感染后miR-20b的相对表达量。结果经双酶切分析及测序验证,成功构建了miR-20b的过表达载体。慢病毒感染P19细胞的效率可达到70%以上,miR-20b表达水平明显升高。结论成功构建了鼠miR-20b的慢病毒表达载体,包被的病毒可以在P19细胞中实现过表达效果。

摘要：目的:制备兔抗人LYRM1蛋白的多克隆抗体并对其进行初步鉴定。方法:预测LYRM1蛋白的抗原表位,设计并合成出一段由17个氨基酸组成的多肽,将合成肽与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联作为抗原,免疫新西兰大白兔,制备抗LYRM1蛋白的多克隆抗体,利用ELISA、Westernblot鉴定其效价及特异性,并将该抗体用于人脂肪组织LYRM1的表达检测。结果:制备了兔抗人LYRM1蛋白的多克隆抗体并证实此抗体效价较高、特异性较强。结论:采用人工合成多肽作为半抗原成功制备了人类肥胖相关新基因LYRM1的多克隆抗体。

摘要：目的：通过对有行为问题儿童视觉效率和视觉信息处理能力的评估与分析,了解其视知觉发育情况,为实施有针对性的早期干预、提升学习能力提供依据。方法：通过Achenbach儿童行为量表（CBCL）,以1个或1个以上因子分超过该因子第98百分位数为判断标准筛选出有行为问题的6～11岁儿童71例,按1∶2配对设计筛选同性别且年龄相差不超过3个月的无行为问题儿童142例。采用发育性眼动测试和快速命名测试分别评估儿童视觉效率和视觉信息处理能力。结果：行为问题组儿童发育性眼动测试的异常检出率高于正常对照组（纵向测试29.6%vs.5.6%;横向测试26.8%vs.7.0%,P〈0.01）,行为问题组儿童快速命名测试中的异常检出率高于正常对照组（物体命名19.7%vs.10.6%;颜色命名15.5%vs.5.6%;数字命名28.2%vs.4.9%;汉字命名19.7%vs.9.2%;数字汉字命名21.1%vs.7.0%;数字汉字颜色命名33.8%vs.11.3%;均P〈0.05）。结论：行为问题儿童可能存在视知觉发育的缺陷,对行为问题儿童进行视知觉发育的评估有助于早期识别和早期干预。

摘要：目的观察芳香烃受体(AHR)基因沉默后对P19细胞向心肌分化进程中WNT信号通路的影响。方法根据小鼠AHR基因序列设计并构建AHR基因的shRNA真核表达载体,将AHR干扰质粒转染至P19细胞,通过G418筛选出稳定的AHR基因沉默表达的阳性细胞株,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测P19细胞分化过程中WNT信号通路中关键基因GSK3β、β-catenin mRNA的表达水平。结果构建的AHR-shRNA表达质粒能显著抑制AHR基因的表达;随着P19细胞向心肌细胞分化,实验组β-catenin基因的相对表达量低于对照组,而GSK3β基因的相对表达量则高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论干扰AHR基因表达对心脏发育过程中WNT信号通路产生调节作用。

摘要：目的：探讨学龄前注意缺陷多动障碍（ADHD）儿童的视觉-运动整合能力特点,为实施有针对性的早期干预方案提供依据.方法：采用1∶1病例对照的设计,选取符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版（DSM-Ⅳ） ADHD诊断标准的4～6岁儿童（混合型37例、注意缺陷为主型28例、多动/冲动为主型14例）及正常对照各79例.采用视觉-运动整合发育测验（VMI）来评定视觉-运动整合情况.结果：ADHD儿童VMI测验异常检出率高于对照组（32.9％ vs.7.6％,P＜0.01）；ADHD各亚型VMI测验异常检出率从高到低依次为混合型、注意缺陷为主型、多动/冲动为主型,各亚型组间差异均有统计学意义（45.9％ vs.25.0％ vs.14.3％,均P＜0.05）；ADHD儿童的VMI测验得分低于正常对照组[（90.2±19.4） vs.（100.5±10.7）,P＜0.05],混合型ADHD儿童的VMI测验得分低于注意缺陷为主型和多动/冲动为主型[（84.5±23.1） vs.（93.7±15.2）,（97.9±11.5）；均P＜0.05].结论：学龄前ADHD儿童可能存在视觉-运动整合能力方面的缺陷,对学龄前ADHD儿童视觉-运动整合能力的评估有助于早期识别和早期预防学习和行为问题.

摘要：目的 建立多重Taqman探针实时RT-PCR法同步检测肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A16型（CA16）和包括EV71、CA16的肠道病毒通用型（EV）.方法 回顾性研究.根据EV71、CA16和EV的保守序列,设计并合成相应的引物和探针,对该体系进行灵敏度、特异性和重复性验证.收集2012年4至7月南京医科大学附属南京儿童医院收治的176例疑似手足口病患儿咽拭子标本作为实验组,另收集10名在此期间到我院体检的健康儿童、10例门诊流感样患儿和90例我院呼吸科收治的呼吸系统疾病患儿咽拭子标本作为对照组.应用该方法对以上286份标本进行EV71/CA16/EV的同步检测.应用SPSS 13.0统计软件进行统计分析.结果 该方法EV71、CA16和EV3个通道的检测限均为1.0×103拷贝/ml；对9株肠道病毒和3株非肠道病毒毒株核酸的检测结果均正确,特异度100％；对1.0×103拷贝/ml、1.0× 104拷贝/ml、1.0×105拷贝/ml的重组质粒进行重复性实验,其变异系数分别为0.44％ ～ 1.04％,0.38％～0.73％,0.46％ ～0.90％；运用多重Taqman探针实时RT-PCR法与实时RT-PCR法对176例疑似手足口病患儿临床标本进行检测和结果比对,两种方法的一致性为97.2％ （171/176）,Kappa=0.94.结论 建立了同步检测EV71/CA16/EV的多重Taqman探针实时RT-PCR法,该方法灵敏度高,特异性好,可为临床快速诊断EV71、CA16和EV感染提供依据,有较强的临床及科研应用前景.

摘要：目的探讨降钙素原(PCT)对新生儿脓毒症的诊断价值。方法检索Cochrane图书馆、PubMed、Ovid、Springer数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库(1990年1月至2009年10月)中的文献,按照诊断试验的纳入标准筛选文献,提取纳入研究的特征信息(研究背景、设计信息和诊断参数信息)。数据分析采用Meta-DiSc1.4和SPSS12.0软件,检验异质性,并根据异质性结果选择相应的效应模型。对所有研究予以加权定量合并,计算敏感度、特异度及其95%CI。绘制汇总受试者工作特征(SROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC),最后进行敏感度分析和不同组间敏感度比较。结果共检索出相关英文文献446篇,中文文献98篇,其他语种文献21篇。阅读标题和摘要,按照纳入标准,最终获取文献33篇(英文文献18篇,中文文献11篇,其他语种文献4篇),入选新生儿3599例。3篇文献新生儿出生时检测脐血PCT水平临床诊断早发型脓毒症,汇总敏感度、特异度和SROCAUC分别为77.7%、82.8%和0.8337;8篇文献新生儿出生后至12h检测血清PCT水平临床诊断早发型脓毒症,汇总敏感度、特异度和SROCAUC分别为76.7%、87.1%和0.8965;4篇文献新生儿出生后12～24h检测血清PCT水平临床诊断早发型脓毒症,汇总敏感度、特异度和SROCAUC分别为76.6%、88.5%和0.8844;6篇文献新生儿出生后24～48h检测血清PCT水平临床诊断早发型脓毒症,汇总敏感度、特异度和SROCAUC分别为69.8%、88.2%和0.8947;15篇文献新生儿出生后≥72h检测血清PCT水平临床诊断晚发型脓毒症,汇总敏感度、特异度和SROCAUC分别为79.0%、92.3%和0.9632;15篇文献新生儿出生后≥72h检测血清PCT水平确诊晚发型脓毒症,汇总敏感度、特异度和SROCAUC分别为84.5%、80.9%和0.9345。PCT检测敏感度分析表明,国家、研究人群、疾病严重程度和PCT检测阈值的不同是产生异质性的原因。结论PCT对新生儿脓毒症诊断效能较高,临床可多应用该诊断指标,有助于脓毒症的早期诊断,同时临床上需要注意联合PCT和其他诊断指标,进一步提高新生儿脓毒症诊断的敏感度和特异度。