摘要：目的 建立一种能快速、准确检测环境中屋尘螨过敏原Der p 1基因的逆转录环介导等温扩增可视化(RT-LAMP)技术。方法 用Primer Explore 4.0对Der p 1基因进行RT-LAMP引物设计与筛选,提取屋尘螨、粉尘螨、热带无爪螨、腐食酪螨总RNA,利用优化的RT-LAMP反应体系分别扩增4个螨种的Der p 1基因,评价方法的特异度和灵敏度。采集74份哮喘患儿的床尘样品,提取总RNA进行Der p 1基因RT-PCR和RT-LAMP检测。结果 利用优化的RT-LAMP方法检测4种螨的Der p 1基因,只有屋尘螨阳性,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物呈现特征性梯形条带,肉眼和紫外灯下均观察到绿色荧光。建立的RT-LAMP对Der p 1基因的最小检测量为1.0×10^(-6 )μg,敏感性比常规RT-PCR高10倍;检测74份床尘样品,阳性率85.1%,与RT-PCR阳性率70.3%比较差异具有统计学意义(χ^(2)=4.72,P<0.05)。结论 建立的屋尘螨过敏原Der p 1基因RT-LAMP较常规RT-PCR灵敏度和特异性更高,可用于屋尘螨过敏原污染的快速检测。

摘要：肺移植是治疗终末期肺病的有效方法之一。由于冷保存时间及边缘供肺应用等因素限制,肺移植发展远不如肝肾移植。离体肺灌注(ex vivo lung perfusion,EVLP)的应用,使供肺处于生理条件下,有利于减轻供肺冷缺血损伤,同时可评估修复肺功能。在国外,离体常温灌注广泛应用于肝、肺等器官移植手术前,并取得了良好的效果。在我国,EVLP还未系统开展。我们利用自行研究设计的肺离体常温灌注系统对冷保存后的供肺进行EVLP,并对其应用效果进行分析,以期为今后研究提供系统平台。