摘要：背景:内皮型一氧化氮合酶表达产物对内皮细胞的影响是血管外科基础研究中的重要课题,对于生物人工血管的研制有重要意义。目的:构建内皮型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3.1/eNOS,以脂质体为介导观察其在血管内皮细胞中的转染效率,评价表达产物内皮型一氧化氮合酶的酶学活性及其对内皮细胞生长的影响。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2005-07/2007-05在南京大学医学院附属鼓楼医院生物化学实验室完成。材料:质粒PCMV-eNOS由勋阳医学院张群林教授惠赠。pcDNA3.1真核表达载体由南京大学博士后贾立军馈赠,pcDNA3.0/EGFP质粒由戚金亮博士提供。大肠杆菌DH5a和人脐静脉内皮细胞株(ECV304)为南京大学生物系保存。方法:采用分子生物学技术,先用限制性核酸内切酶EcorⅠ酶切质粒PCMV/eNOS,电泳回收3.6kb编码人内皮型一氧化氮合酶cDNA序列,克隆入质粒pcDNA3.1的EcorⅠ酶切位点,通过内皮型一氧化氮合酶cDNA序列中的XhoⅠ酶切位点筛选其插入载体的方向,构建pcDNA3.1/eNOS重组质粒。以Lipofec-tamine为介导将其与pcDNA3.0/EGFP共转染分离培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)。主要观察指标:①观察转染后对ECV304生长的影响,在流式细胞仪和荧光显微镜下计算转染效率。②以反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学检测内皮型一氧化氮合酶基因的表达,测定内皮型一氧化氮合酶活性以及一氧化氮产量。③观察施加不同因素(L-精氨酸、氯化钙、乙二胺四乙酸、L-NAME)对内皮型一氧化氮合酶活性及一氧化氮合成的影响;同时检测此时ECV304生长所受影响。结果:以脂质体为介导转染人脐静脉ECV304后,其转染效率为(32.6±2.6)%,反转录-聚合酶链反应和免疫组织化学检测到相应的内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,与对照组有明显差别;同时在上述不同因素影响下内皮型一氧化氮合酶活性出现明显差别;随着培养液一氧化氮浓度升高,ECV304生长曲线下降。结论:成功构建pcDNA3.1/eNOS,在脂质体介导下能高效转染ECV304并良好表达,Ca2+是内皮型一氧化氮合酶的必要激活条件,ECV304的增生受到高浓度一氧化氮抑制。

摘要：目的探讨新型哺乳体位装置对经阴道分娩产妇乳头皲裂发生率和纯母乳喂养率的应用效果。方法 2017年7-12月,便利抽样法选择南京市某三级甲等综合性医院产科经阴道分娩的初产妇为研究对象。按照住院号的单双数将其分为观察组和对照组(各145例)。对照组按照常规母乳喂养指导模式,观察组在对照组的基础上使用新型辅助哺乳体位装置,比较两组产妇乳头皲裂发生率、皲裂程度及纯母乳喂养率。结果产后42 d观察组乳头皲裂发生率及皲裂程度低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。住院期间观察组纯母乳喂养率为51.7%,对照组为72.4%,差异有统计学意义(P<0.05);产后6个月随访,观察组纯母乳喂养率为86.2%,对照组为68.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论辅助哺乳体位装置的使用可有效降低乳头皲裂的发生率,提高纯母乳喂养率,值得临床借鉴使用。

摘要：目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制RRM2基因表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及侵袭能力的影响。方法:针对RRM2基因设计siRNA,利用阳离子脂质体Lipofectamine2000TM将siRNA片段导入Ishikawa细胞中。用荧光显微镜观察转染情况,流式细胞术检测细胞转染率、凋亡率及细胞周期,用MTT比色法检测siRNA对Ishikawa细胞增殖的影响,半定量q-PCR和Western blot分别检测RRM2在mRNA和蛋白水平上表达的变化,用transwell小室检测细胞体外侵袭能力。结果:设计的siRNA能有效地抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,降低侵袭能力,诱导细胞凋亡,并使细胞阻滞于G1期,减少S和G2期的细胞,同时RRM2在mRNA及蛋白水平上的表达明显减少,而对照的错义序列组Ishikawa/Neg-ative-siRNA则没有上述效应。结论:体外合成的siRNA可降低子宫内膜癌Ishikawa细胞中RRM2的表达,且抑制细胞增殖,降低细胞侵袭能力,促进细胞凋亡并诱导生长停滞。

摘要：目的研发压力性损伤(pressure injury,PI)临床决策支持系统,探讨其在临床PI管理中的应用效果。方法成立研发小组,构建PI领域知识库和护理文书数据库,设计人机交互规则,以实现动态评估预警、智能判读推荐、实时监测分析等功能。比较该系统应用前后PI入院风险评估及时率、预防措施落实与风险评估合格率、护理记录缺陷率、医院获得性PI发生率和高风险患者医院获得性PI发生率等指标。结果应用PI临床决策支持系统后,PI入院风险评估及时率从84.78%提高至95.94%,PI预防措施落实与风险评估合格率从90.15%提高至99.13%,PI护理记录缺陷率从16.42%下降至8.70%,与应用前比较,差异均有显著统计学意义(P<0.001)。系统应用后,医院获得性PI发生率和高风险患者医院获得性PI发生率均下降。结论 PI临床决策支持系统为护士提供准确、客观的决策依据,提高了护理质量及管理效率。

摘要：下蒂瓣法巨乳缩小成形术由Robbins在1977年设计并应用于临床,1988年起我们应用几何原理进行受区乳晕和新乳晕的设计,并改进了Robbins术式,共治疗中、重度乳房肥大者38例,取得了满意效果。

摘要：目的胆囊癌作为胆道系统中一种恶性程度极高的肿瘤,早期诊断困难、预后极差,因此准确鉴别胆囊病变对早期发现胆囊癌具有重要意义。目前胆囊癌的诊断主要依赖于超声、CT(computed tomography)等传统影像学方法,但准确性较低。显微高光谱能够在获取生物组织图像信息的同时从生化角度对生物组织进行分析,从而实现对胆囊癌的早期诊断,相比于传统医学图像更具优势。因此,本文基于胆囊癌显微高光谱图像设计了一种基于多尺度融合注意力机制的网络模型,以提高分类准确率。方法提出多尺度融合注意力模块(multiscale squeeze-andexcitation-residual,MSE-Res)。MSE-Res模块引入改进的多尺度特征提取模块实现通道维上特征的融合,用一个最大池化层和一个上采样层代替1×1的卷积层来提取图像的显著特征。为了弥补池化层丢失的局部信息,在跳跃连接中加入一个1×1的卷积层。在多尺度特征提取模块后,引入注意力机制来学习不同通道间特征的相关性,实现通道间特征的融合,并通过残差连接使网络在提取图像深层特征的同时避免出现过拟合现象。结果在胆囊癌高光谱数据集上进行实验,本文模型的总体分类精度、平均分类精度和Kappa系数分别为99.599%、99.546%和0.990,性能优于SE-ResNet(squeeze-and-excitation-residualnetwork)和Inception-SE-ResNet(inception-squeeze-andexcitation-residual network)。结论本文提出的MSE-ResNet能够有效利用高光谱图像的空间信息和光谱信息,提高胆囊癌分类准确率,在对胆囊癌的医学诊断方面具有一定的研究价值和现实意义。

摘要：目的 探讨人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)后股骨柄前倾角(femoral stem anteversion,FSA)的相关因素,为临床术前设计FSA、降低置换术后髋关节脱位风险提供参考。方法 以2021年10月—2022年9月收治且符合选择标准的93例(103髋)THA患者作为研究对象。其中男48例,女45例;年龄25~88岁,平均58.5岁。身体质量指数18.00~37.84 kg/m2,平均24.92 kg/m2。诊断:股骨头坏死51例(57髋),骨关节炎35例(39髋),先天性髋关节发育不良7例(7髋)。基于手术前后CT图像测量以下指标:术前指标包括股骨颈前倾角(femoral neck anteversion,FNA)、股骨旋转角(femoral rotation angle,FRA)、髋臼前倾角(acetabular anteversion,AA),并计算联合前倾角(combined anteversion,CA),即术前FNA与AA之和;术后指标为FSA,并计算术后股骨前倾角变化值,即术后FSA与术前FNA的差值。基于术前X线片测量以下指标:股骨皮质厚度指数(cortical thickness index,CTI);股骨髓腔开口指数(canal flare index,CFI),并根据Noble分类法对股骨近端髓腔解剖形状分型(香槟杯型、正常型、烟囱型);股骨颈干角(neck-shaft angle,NSA);偏心距(femoral offset,FO)。应用Pearson相关分析、单因素方差分析、Point-biserial相关分析术后FSA、术后股骨前倾角变化值分别与患者诊断、股骨近端髓腔解剖类型、性别、年龄以及术前FNA、FRA、AA、CA、NSA、FO、CTI、CFI相关关系。以FSA作为因变量,纳入与其可能存在相关关系的自变量进行多重线性回归分析。结果 基于CT图像测量示,术前FNA(15.96±10.01)°、FRA(3.36±10.87)°、AA(12.94±8.83)°、CA(28.9±12.6)°,术后FSA(16.18±11.01)°,术后股骨前倾角变化值(0.22±9.98)°。基于术前X线片测量示,CTI 0.586±0.081;CFI4.135±1.125,其中股骨近端髓腔为香槟杯型23髋、正常型68髋、烟囱型12髋;NSA(132.87±7.83)°;FO(40.53±10.11)mm。患者术前FNA与术后FSA差异无统计学意义(t=-0.227,P=0.821)。Pearson相关分析示术后FSA与术前FNA及CA、术后股骨前倾变化值、年龄成正相关(P0.05)。多重线性回归分析示FSA与FNA、CA、年龄、FRA存在线性相关(F=10.998,P<0.001),最佳拟合优度模型为FSA=0.48×FNA–2.551。结论 与THA术后FSA相关的因素包括患者年龄以及术前FNA、CA、FRA和术后股骨前倾变化值,其中术前FNA与之关系最密切。术前设计手术方案时应注意患者FNA,必要时扫描髋关节周围CT以详细了解股骨近端解剖结构。

摘要：目的:从流产胚胎中分离出神经干细胞并培养、扩增和进行鉴定,为神经干细胞移植寻找源泉。方法:实验于2001-02/2005-06在加拿大多伦多大学和南京大学附属鼓楼医院完成。收集流产的胎儿脑组织,备人胚胎大脑组织细胞悬液制免疫磁珠法分离神经干细胞,实验设计共随机选择24个分离的单个神经干细胞通过反转录酶聚合链反应技术的方法用DNA扩增仪检测单个细胞中nestin神经干细胞标记物,betaactin为内参对照。以结果:分离的人胚胎神经干细胞生长、扩增正常,nestin阳性细胞纯度极高。结论:免疫磁珠法对胚胎神经干细胞的分离,及反转录聚合酶链反应技术在神经干细胞鉴定中的应用是值得进一步探讨的途径。

摘要：目的调查我国急诊急救专科护士培训基地资源配置及培训现状,为优化基地建设、促进专科护士发展提供借鉴。方法自行设计急诊急救专科护士培训基地现状调查问卷,采用便利抽样法对我国13家急诊急救专科护士培训基地进行调查。结果中华级、省级、市级培训基地分别为2家、6家、5家;13家基地均设有专科护士培训管理组织,设有带多媒体设备的教学用房、临床技能实训室,提供医疗信息网络资源;6家基地近5年在国际期刊发表论文;近5年承担了国家级、省部级、市级、院级护理课题的基地分别有2家、5家、9家、12家。护理师资中专科护士占52.46%;近5年接受过师资培训比例为46.96%;7家基地在培训开始前依据学员的入学考核情况、年资、学历、工作医院级别等对其进行合理分组,5家基地表示会开展专科护士再培训工作,仅1家基地表示计划在专科护士取得资格证3~5年后开展再认证工作。结论我国急诊急救专科护士培训基地基本情况良好,但缺乏培训基地评价与再认证机制;基地师资力量有待加强;基地缺乏专科护士远期能力评价体系,未来可开展相关研究以体现专科护士的专业价值。

摘要：合成生物学借助工程化技术在人工生物系统的设计与构建方面已经取得了长足进展,尤其在CAR-T细胞的开发和应用中为实体肿瘤治疗带来了深刻变革。在合成生物学技术的支持下,新一代的CAR-T细胞可以在靶向肿瘤后激活细胞因子释放通路,实现CAR-T细胞在肿瘤部位的自我调节;工程化的T细胞在CAR的基础上也可以表达其他受体元件(如正交型IL-2、IL-9受体等),通过人工给药干预可在体内实现多功效、特异性刺激,这对于实现CAR-T细胞在体内的精准刺激和克服抑制性肿瘤微环境等意义非凡。此外,智能化CAR回路系统如synNotch基因回路系统和CAR开关系统等研究结果表明,CAR-T细胞可以通过自身基因回路的反馈或人工给药干预来发挥或终止杀伤功能,可有效保证CAR-T细胞在治疗过程中的安全性。虽然针对实体肿瘤靶点难题的CAR-T细胞开发目前尚未有突破性进展,但对于有明确靶点的肿瘤,Ⅰ期临床试验结果已经显示CAR-T细胞治疗实体肿瘤具有巨大潜力。因此,明确当下CAR-T细胞治疗实体肿瘤的作用机制和应用现状,可以对后续开发高效低毒CAR-T细胞提供新思路。