摘要：根据家蚕抗菌肽CMⅣ的氨基酸序列,利用***偏爱的密码子设计并合成其突变体DNA,克隆到融合表达载体pEZZ318中,在***中进行融合表达,经亲和层析得到26mg/L的融合表达产物.用化学方法裂解该融合表达产物,得到了具有抗菌活性的突变体抗菌肽CMⅣ.

摘要：《生物化学》以生物体为对象,研究其生命的化学本质,是生命科学领域的核心课程。长期以来,由于生物化学课程知识点多、范围广和内容抽象,在一定程度上会影响学生学习的自信心,压抑其学习过程中的兴趣,致使学习的积极性不高。最近10~20年里,国外将科学(science)、技术学(technology)、工程学(engineering)及数学(mathematics)的教育与艺术学(arts),特别是与艺术学中的音乐结合实施教学,形成一种所谓的STEAM(STEM+Arts)策略,对STEM教育进行辅助,取得了不错的效果。基于以上情况,结合国内生物化学教学实际,笔者尝试将生物化学歌曲应用于课堂教学过程中,辅助教学。生物化学歌曲可以将抽象难懂的生物化学知识转变成悦耳动听的歌曲,在教学过程中能激发学生的学习兴趣,活跃课堂气氛,使学生在学习过程中爱上生物化学;在生物化学歌曲的创作过程中,能促进学生的思考创新,内化重点难点,使深奥的问题形象化;在学习过程中用歌声展现生物化学的魅力,让知识成为有趣的知识,让其成为有趣的学习者。本文介绍了国内生物化学歌曲发展壮大历程,结合具体实例从利用生物化学歌曲引入教学、理解生物化学内容、密切联系生活三方面评论了生物化学歌曲在辅助生物化学教学中的应用,并从歌词的改编、旋律的选择、歌曲的传唱、教学的设计等方面需要注意的问题进行讨论。

摘要：根据从中国家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ）蛹中提取的抗菌肽ＣＭＩＶ的氨基酸序列，设计兼顾大肠杆菌和昆虫两种不同体系偏爱密码子的ＣＭＩＶ基因序列；用固相合成法合成６段寡聚核苷酸，通过二步电泳法快速纯化之，复性，连接并克隆到ｐＵＣ９中，转化大肠杆菌ＪＭ１０９；在Ｘ－Ｇａｌ、ＩＰＴＧ、ＡｍｐＬＢ平板上挑选白色克隆，用限制性酶谱法筛选含有合适插入片断的质粒ＤＮＡ；然后通过序列分析得到了含有与设计完全一致的ＣＭＩＶ基因序列的阳性克隆。

摘要：目的：研究已分离纯化的末端脱氧核苷酰转移酶（ＴｄＴ）的理化性质及其抑制因子的化学本质。方法：用一系列电泳方法分析ＴｄＴ及抑制因子的化学组成、等电点及分子量，并自行设计一组酶活力检测实验，以分析判断抑制因子的化学本质。结果：等电聚焦电泳表明ＴｄＴ有３个条带，ｐＩ分别为５．８、６．３、６．９，抑制因子有４个条带，ｐＩ分别为５．３、６．４、６．８、７．０。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示ＴｄＴ有５个条带，分子量分别为３８０００、４６０００、５２０００、６６０００、８７０００，抑制因子有２个条带，分子量为２００００和２４０００。抑制因子是一种脱氧核糖核苷酸酶。结论：抑制因子与ＴｄＴ紧密伴随，参与生物体内ＴｄＴ活力的调节。

摘要：目的利用RNA干扰技术,以COX-2为靶基因,构建靶向COX-2基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达质粒并进行鉴定分析。方法设计、合成1对COX-2编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,经退火形成互补双链,通过定向克隆至质粒pGenesil-1,构建shRNA真核表达载体。转化JM109大肠杆菌,提取质粒进行酶切鉴定和测序分析;RT-PCR和Western blot检测重组表达质粒对COX-2mRNA和蛋白表达的抑制效果。结果酶切证实目的DNA定向克隆至载体上,测序分析结果与目的序列相同。RT-PCR和Western blot结果显示,与未转染组比较,pshRNA-COX-2重组表达质粒对β-actin基因无明显影响,而对COX-2有明显抑制作用。COX-2mRNA和蛋白表达的抑制率分别为66.9%和50.3%。结论成功构建的靶向干扰COX-2基因重组质粒能够显著抑制COX-2基因表达。

摘要：N-甲酰肽fMet-Leu-Phe(fMLP)是来源于细菌的化学趋向性小肽。已知fMIP是活化中性颗粒白细胞的强激活剂,因此阐明fMLP受体(FRP)结合fMLP的结构域对控制炎症的发生、中性白细胞在组织中的浸润具有重要意义。用改进的方法构建了FPR的5个嵌合体及2个突变体,并鉴定了他们结合fMLP的亲和性,取得以下结果:(1)和其他G蛋白偶联性受体不同,FPR的细胞外氨基端结构域(残基1～26)对fMLP结合的重要性不显著。(2)FPR在细胞外的3个环区(loop)对配体的结合是关键性的,其中环区1和环区3尤为重要。(3)FPR的跨膜结构域(TMD)中某些点突变能导致FPR不能和它的配体fMLP充分结合,表明FPR的跨膜结构域也参与对配体的结合。这些结果有助于设计新的FPR颉抗剂。

摘要：电化学方法在生命科学研究中的应用越来越广泛。这是因为，生命活动包含了各种各样的电子传递及氧化还原过程，而电化学则是研究电子运动及相关氧还反应的较好方法。同时，生命现象本质问题的解决需要借助更多的研究方法和实验技术来实现。但是，同其他研究手段一样，随着生命科学的飞速发展及相关研究问题的深入，电化学技术也存在一定的局限性。为此，国内外电化学工作者设计了各种电化学装置，发展了一些电化学理论及技术，其中，一种被称为"蛋白膜伏安法"的技术发展极为迅速，并且己应用到生命科学研究的许多方面。

摘要：提出了一种预测蛋白质变体活性的简单模型.这种模型不涉及复杂的理论运算,而是试图通过分析蛋白质疏水核心和疏水表面区域的氨基酸定点突变后分子结构的变化,来预测变体的活性变化,以肿瘤坏死因子的两处亮氨酸残基(L29,L157)突变后的活性变化为例,验证了该模型的可靠性.在此基础上,提出了提高肿瘤坏死因子活性的分子设计方案并进行了实验验证.

摘要：应用新的融合方法制备抗菌肽ＣＭＩＶ变体；了解重组型抗菌肽变体对几株临床耐药菌的抗性。通过基因工程的手段，将合成的抗菌肽ＣＭＩＶ的ｃＤＮＡ与根据金黄色葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）的ＩｇＧ结合结构域设计并合成的ＺＺ结构域基因融合，在大肠杆菌细胞中表达；用制备的ＣＭＩＶ变体进行抑菌圈试验和液相试验。结果表明５ｕｌ（１０ｕｍｏｌ／Ｌ）抗菌肽可在大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１平板上产生直径１５ｍｍ的抑菌圈；抑制５０％大肠杆菌生长的抗菌肽浓度约０．２ｕｍｏｌ／Ｌ。６种青霉素抗性的革蓝氏阴性菌的抑菌圈直径在６～１３ｍｍ之间；而同样的条件下，对革蓝氏阳性菌——金黄色葡萄球菌的作用很弱。用新的融合方法可通过大肠杆菌体系制备有活性的抗菌肽变体。

摘要：根据天然抗菌肽B的结构特点,选用植物偏爱密码子,设计相应编码区,加接大麦α-淀粉酶信号肽序列,并对碱基序列作如下调整:（1）将编码区中Met替换成Val;（2）N端增加三个氨基酸;（3）用Gly残基替代C端的酰胺。利用三个寡聚核苷酸单链互为引物与模板,PCR扩增技术合成全长207bp的新型抗菌肽基因,克隆于pGEM-T Easy载体上,经DNA序列分析证实,合成的SB嵌合基因碱基序列符合设计要求。