摘要：CRISPR/Cas系统最早发现于细菌,对入侵的病毒或噬菌体DNA具有免疫作用。基于CRISPR/Cas的免疫机制,设计开发的CRISPR/Cas9基因编辑系统已经成为真核生物基因编辑的主流工具,在拟南芥、水稻等高等植物的基因组功能研究中已经广泛应用。本研究以中国鹅掌楸纤维素合酶(Cellulose synthase,CESA)为研究对象,首次构建了具有表达中国鹅掌楸纤维素合酶(Cellulose synthase,CESA)gRNA(guide RNA)的CRISPR/Cas9基因敲除系统,以LcCESA1基因外显子5'端的第一个外显子区域的GN19NGG序列设计gRNA引物;以p201N-Cas9为载体,Gibson Assembly誖Master Mix为连接酶,通过Gibson Assembly连接技术,将CESA1-gRNA连入p201N-Cas9中,获得p201N-Cas9-CESA1-gRNA载体。根据载体中插入序列,设计了两对检测引物,经PCR鉴定,均获得了相应大小的序列;测序分析进一步证实确认gRNA已经完整准确地连入载体。p201N-Cas9-CESA1-gRNA载体能对CESA1基因进行定向编辑,对后续研究鹅掌楸纤维素合酶的基因功能具有重要意义。

摘要：为探究不同光强下4品种(种)欧洲鹅耳枥(Carpinus betulus、Carpinus betulus‘Beekman’、Carpinus betulus‘Frans Fontaine’、Carpinus betulus‘Lucas’)在秋季变色期叶片衰老的主要生理变化规律,提出秋季叶衰老期最佳光照管理措施。采用不同光照强度处理,对欧洲鹅耳枥叶衰老期叶片中叶绿素、光合参数、内源激素进行测定。结果表明,全光照条件下,4品种(种)欧洲鹅耳枥秋季叶片衰老期光合性能最佳;Carpinus betulus‘Lucas’叶片中叶绿素含量、净光合速率、内源激素含量在不同光照强度下差异不显著(P>0.05)或较其他品种(种)差异小,对光强的敏感性弱,更适合园林弱光环境的应用;净光合速率的下降和内源激素ABA含量上升是欧洲鹅耳枥叶落期叶衰老较佳的指示指标;在秋季叶片衰老期,4品种(种)欧洲鹅耳枥叶片仍可进行高效的光合作用,具有较强的光合固碳能力,有利于维持大气生态系统碳平衡,是适合园林应用的优选树种。

摘要：为探寻不同光照强度下欧洲鹅耳枥Carpinus betulus及其不同园艺品种(种)Carpinus betulus‘Beekman’、Carpinus betulus‘Frans Fontaine’、Carpinus betulus‘Lucas’的叶色及其生理变化,筛选适宜的光照强度及变色效果更好、观赏价值更高的品种,以4个欧洲鹅耳枥品种(种)为试验材料,通过不同梯度的遮阴处理,营造不同的光照强度,而后对其叶片进行叶色及生理指标的动态观测,并进行方差与相关性分析。结果表明:各欧洲鹅耳枥叶色转变的根本原因均是类胡萝卜素与叶绿素比值的升高,表现为类胡萝卜素较叶绿素稳定,分解较慢,导致类胡萝卜素在色素中的比例占优,进而叶色转黄。相关性分析显示,叶绿素总量、类胡萝卜素、花色素苷、可溶性糖、可溶性淀粉、可溶性蛋白之间呈极显著的线性相关(P<0.01),其中可溶性蛋白与其他指标为极显著负相关。结论:4个欧洲鹅耳枥品种(种)变色期存在差异,在全光照条件下有最佳的叶色表达效果,在南京地区Carpinus betulus、Carpinus betulus‘Beekman’、Carpinus betulus‘Frans Fontaine’作为园林秋叶树种有较长观赏期,类胡萝卜素是其呈色基础,叶色变换会影响可溶性糖、淀粉、蛋白质的积累。

摘要：以205株北京市银杏为研究对象,从北京市银杏的观赏性状上进行调查统计,通过层次分析法(AHP)选取A_(1)树形、A_(2)枝形、A_(3)叶形、A_(4)叶色4个评价准则和16个评价因子建立北京市银杏观赏性状评价体系,对205株北京市银杏单株进行观赏等级划分,以期为北京市银杏的园林绿化应用以及观赏良种选育提供参考依据。结果表明:总排序值中,A_(4)叶色所占权重最大,对银杏观赏价值的约束力最大;16个评价因子中B_(14)变色期叶色、B_(16)叶色期、B_(11)叶基形状是影响银杏观赏价值的主要指标,205株银杏单株可根据评价结果划分为3个观赏等级。综上所述,应用层次分析法来建立北京市银杏观赏性状综合评价体系是科学、可靠且具有实用价值的。

摘要：【目的】探究不同氮磷钾配比施肥对薄壳山核桃幼苗生理生长的影响,以期找出适合薄壳山核桃幼苗生长的一套施肥方案。【方法】以薄壳山核桃一年生品种‘马罕’(Mahan)嫁接苗为试验材料,采用土壤盆栽试验,根据L9(34)正交试验设计,进行3因子(N、P、K)3水平(N,4 g/株;P,2 g/株;K,1 g/株。N,6 g/株;P,3 g/株;K,3 g/株。N,8 g/株;P,4 g/株;K,5 g/株)配比施肥试验,以不施肥为对照,研究不同处理对薄壳山核桃幼苗生长(苗高、地径、生物量)及生理特性(可溶性糖、可溶性蛋白质、谷氨酰胺合成酶和硝酸还原酶)的影响。【结果】氮(N)、磷(P)、钾(K)对薄壳山核桃的生长指标影响效应为N>K>P;氮肥对苗高影响显著,平均高出对照(CK)39.13%;氮肥对地径也有显著影响,平均高出对照26.01%;氮肥和钾肥对幼苗地上生物量和地下生物量的影响显著,分别平均高出对照9.32%和45.27%。氮和磷对可溶性蛋白影响显著,平均高出对照19.25%;氮、磷、钾均对可溶性糖有显著影响,平均高出对照15.19%;氮对谷氨酰胺合成酶影响显著,平均高出对照72.79%;氮对硝酸还原酶也具有显著影响,平均高出对照32.1%。【结论】合理的配比施肥能够显著促进薄壳山核桃幼苗生长,同时也提高了主要碳氮代谢物的含量和关键酶的活性。

摘要：通过对欧洲鹅耳枥(Carpinus betulus)及其2个园艺品种(‘Frans Fontaine’和‘Lucas’)在北京、南京、靖江3地的碳素营养和矿质营养状况的研究分析,研究适宜各欧洲鹅耳枥营养积累及生长的地区及在营养积累方面占有优势的品种。结果表明,***在碳素营养积累方面占有较大的优势,***‘Frans Fontaine’的矿质元素含量最高;3地不同欧洲鹅耳枥叶片中矿质元素含量均为N>K>P,其生长均属于磷含量制约植物生长型,因此,在欧洲鹅耳枥的繁殖栽培中要注意磷肥的施用;北京地区各欧洲鹅耳枥叶片中的碳素营养及矿质营养含量均最大,3地中北京地区更适宜各欧洲鹅耳枥的营养积累。

摘要：以金叶银杏(Ginkgo biloba‘Golden leaves’)为母本、银杏(*** Linn.)为父本杂交产生的F_(1)代(包括黄叶型Ⅰ、绿叶型Ⅰ、黄叶型Ⅱ、绿叶型Ⅱ)实生苗为材料,当地品种‘泰兴大佛指’(‘Taixing Dafozhi’)为对照,利用Logistic方程拟合苗木生长模型,探究各材料苗木生长规律及代谢物含量和叶色的动态变化特征。结果表明:杂交F_(1)代黄叶型苗高呈“S”型增长,绿叶型苗高呈对数型增长,先快后慢;所有材料的地径均呈“S”型增长。在苗木生长150 d时,杂交F_(1)代不同苗木间的单株质量差异不显著(P>0.05)。在不同生长时间,可溶性糖含量均表现为绿叶型Ⅰ高于黄叶型Ⅰ、绿叶型Ⅱ高于黄叶型Ⅱ;在120 d时,各材料的淀粉含量较90 d大幅升高,且黄叶型Ⅰ和绿叶型Ⅰ的淀粉含量显著(P<0.05)高于其他材料;在90~120 d,可溶性蛋白质含量表现为黄叶型Ⅰ高于绿叶型Ⅰ、黄叶型Ⅱ高于绿叶型Ⅱ。在150 d时,总黄酮含量表现为‘泰兴大佛指’显著高于4个杂交F_(1)代、黄叶型Ⅰ高于绿叶型Ⅰ、黄叶型Ⅱ高于绿叶型Ⅱ。在30~90 d,黄叶型的亮度参数值(L^(*))、红/绿色相值(a^(*))、黄/蓝色相值(b^(*))整体上随时间推移显著降低,且L^(*)和b^(*)均表现为黄叶型显著高于绿叶型。在30~90 d,黄叶型的总叶绿素含量随时间推移逐渐升高,而绿叶型的总叶绿素含量在60 d达到最大值。苗木质量评价结果显示:苗木质量排名由高到低依次为‘泰兴大佛指’、黄叶型Ⅰ、黄叶型Ⅱ、绿叶型Ⅰ、绿叶型Ⅱ。综上所述,金叶银杏杂交F_(1)代中黄叶型实生苗质量优于绿叶型。

摘要：大豆疫霉侵染大豆引起的根腐病是大豆生产上的毁灭性病害之一。本研究以Ypt1基因作为靶标,利用环介导等温扩增(LAMP)技术,设计了特异性检测体系,整个过程仅需60 min,即可通过肉眼直接目测检测结果。反应后经浊度仪验证浊度变化、琼脂糖凝胶进行电泳验证和在扩增前加入染料HNB(羟基蔡酚蓝)作为反应指示剂验证扩增结果。特异性检测中,111个大豆疫霉菌株均能产生浊度曲线和扩增到梯形状的条带,同时HNB显色观察到天蓝色的阳性反应,而其它疫霉、腐霉和真菌供试菌株中均没有观察到这些现象;在灵敏度检测中,PsYpt1-LAMP技术最低检测限达到100 pg·μL^(-1),比普通PCR技术的最低检测限高出10倍;在田间应用方面,PsYpt1-LAMP检测技术明显提高了检测效率。本研究建立的LAMP检测体系可用于口岸和田间对大豆疫霉的快速检测。

摘要：本试验旨在研究饲粮中添加银杏-杜仲叶发酵物(FGEL)对脂多糖(LPS)应激肉仔鸡的生长性能、肠道结构、消化吸收功能和免疫反应的影响,并与未发酵银杏-杜仲叶(GEL)进行比较。采用2×3双因子试验设计,即2种免疫应激处理(腹腔注射LPS或注射等量生理盐水)和3种饲粮处理(基础饲粮及在基础饲粮中添加0.40%GEL或0.40%FGEL的试验饲粮)。选取1日龄健康爱拔益加(AA)肉仔鸡360只,随机分为6个处理,每个处理均设6个重复,每个重复10只鸡。试验期为21 d。在试验第13、15、17、19和21天,3个应激处理的试鸡腹腔注射500μg/kg BW的LPS,其他3个处理注射等量的生理盐水。在试验第21天最后1次注射后2~4 h进行屠宰取样。结果表明:1)与对照饲粮相比,饲粮添加FGEL的肉仔鸡料重比(F/G)有显著改善(P=0.024),饲粮添加FGEL显著缓解了LPS应激肉仔鸡平均日增重(ADG)(P=0.023)和血清D-木糖的含量(P=0.011)的降低。2)与对照饲粮相比,饲粮添加FGEL显著缓解了LPS应激肉仔鸡十二指肠(P=0.011)和空肠(P=0.030)的相对重量的减少及十二指肠(P=0.043)和空肠(P=0.014)的绒毛高度(VH)和十二指肠(P=0.012)、空肠(P=0.018)和回肠(P=0.014)碱性磷酸酶(AKP)活性的降低,并降低了LPS应激所致的十二指肠(P=0.024)和空肠(P=0.018)隐窝深度(CD)及十二指肠钠/葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)mRNA相对表达量(P=0.013)的增加。3)与添加GEL饲粮和对照饲粮相比,饲粮添加FGEL能够减缓LPS应激肉仔鸡诱导性一氧化氮合酶(iNOS)(P=0.031)、核转录因子-κB(NF-κB)(P=0.029)、干扰素-γ(IFN-γ)(P=0.017)、白细胞介素-1β(IL-1β)(P=0.020)、白细胞介素-6(IL-6)(P=0.048)和白细胞介素-10(IL-10)(P=0.037)的mRNA相对表达量的过度增加。综上所述,在本试验条件下,饲粮中添加FGEL能够通过改善免疫应激肉仔鸡的肠道结构、消化吸收功能和缓解NF-κB相关的炎性因子的过度激活,从而改善肉仔鸡的生长性能。

摘要：为研究桂花种胚发育过程及成熟机制,以紫梗籽银桂种子为研究材料,对其发育过程中胚和胚乳进行生物学观察,并对胚乳的可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白和粗脂肪等含量进行了测定和分析。结果表明,紫梗籽银桂花期为9—10月,种胚的发育大约经历三个阶段:种胚开始形成期、种胚快速形成期和种胚成熟期。随着紫梗籽银桂种子的发育,胚乳可溶性糖含量呈上升的趋势,淀粉含量呈先降后升的趋势;可溶性蛋白含量前期比较平稳,后期呈上升趋势;粗脂肪含量不断增加。紫梗籽银桂种子各类营养物质快速积累发生在花后180 d之后,此期间种胚开始大量形成,到种子成熟阶段达到峰值。