摘要：目的 构建耐辐射奇球菌prM基因缺失回补菌株,为进一步研究PprM蛋白的功能奠定实验基础.方法 设计并合成HA-pprM基因（HA为流感病毒血凝素）全长的引物,以无突变的pGEX-6p-1-pprM载体为模板,PCR扩增出携带NdeⅠ酶切位点的HA-pprM基因全长,经NdeⅠ酶切后,与pRADK载体连接并转化大肠杆菌,经培养、提取质粒及纯化后,采用酶切鉴定以及基因测序方法确认插入序列的正确性;采用CaC12法将构建好的重组质粒pRADK-HA-pprM转化到耐辐射奇球菌pprM基因缺失的菌株中,通过Western blot验证HA-PprM融合蛋白的表达.结果 构建的重组质粒pRADK-HA-pprM经NdeⅠ酶切鉴定结果符合目的条带大小（438 bp）,测序结果显示插入的寡核苷酸序列及方向与预期的一致,Western blot结果显示HA-PprM融合蛋白的相对分子质量约为13 000.结论 笔者成功构建了重组质粒pRADK-HA-pprM,为进一步研究与PprM蛋白相互作用的靶DNA的筛选奠定了良好的基础.

摘要：随着我国药学事业的飞速发展,《药物化学》课程的教学改革显得愈加重要。《药物化学》是一门实践性很强的学科,"互联网+"时代下的药物化学教学尤其重视实践能力的培养和训练,从而提高学生分析问题、解决问题的能力,培养学生药物设计创新能力。本文旨在从《药物化学》课程特点出发,立足于本课程实际情况和适应社会的需要,探索《药物化学》有效的教学模式和教学方法,提高该课程的教学质量,培养出适应社会需要的合格的药学专业人才。

摘要：药物分析是一门实践性很强的学科,笔者以药物分析实验教学为研究对象,对实验教学中的几点心得体会进行总结。首先,根据实验课程的教学目标和课程特点,结合国内外该课程的发展现状,合理设计实验内容,适当增加实验的深度和广度,激发学生的学习兴趣;其次,在目前高等教育转型背景下,有必要加强学生在实验过程中的环保意识培养,养成良好的实验操作习惯,提高实验综合素质;最后,针对学生对新生事物好奇的特征,在传统分析实验的基础上创建新的实验内容,创新实验手段,提高学生的学习积极性和主动性。同时,以建立讨论小组的方式提升学生的探索创新精神。

摘要：为分析结肠上皮癌变进程中的差异表达蛋白质,筛选结肠癌诊断候选标志物,先采用激光捕获显微切割技术(LCM)纯化人正常结肠组织和结肠癌组织,再采用同位素标记对蛋白质进行相对和绝对定量(i TRAQ),然后结合强阳离子柱分离和反相液质联用(2D-LC-MS/MS)鉴定差异表达蛋白质。试验共鉴定了1 042个非冗余蛋白,筛选出与人结肠癌变相关的差异蛋白162个,其中在结肠癌中表达上调的蛋白质68个,表达下调的蛋白质94个,功能分析表明,这些差异蛋白质涉及内质网蛋白质加工、糖酵解/糖原异生、黏着斑细胞连接、调节微丝组装和细胞外基质受体相互作用等分子功能。进一步采用Western blotting及免疫组织化学技术(IHC)验证了其中差异蛋白S100A9的表达,证实了定量蛋白质组学结果的可靠性。研究表明:差异表达蛋白质与结肠癌变相关,并有可能成为结肠癌诊断的候选分子标志物,为进一步深入研究这些蛋白质在结肠癌发生和发展进程中的分子机制,为结肠癌的发病机制研究提供新线索。

摘要：目的 对无转移肺腺癌和有转移肺腺癌表达差异蛋白质进行生物信息学分析.方法 利用Cytoscape软件对前期发现无转移肺腺癌和有转移肺腺癌表达差异的20个蛋白质进行基因本体论（GO）功能富集分析和蛋白质相互作用网络构建.结果 20种肺腺癌转移差异表达蛋白质的主要生物学过程为葡萄糖分解和酒精分解等过程,主要分子功能为磷脂酶A2抑制剂活性和钙依赖的磷脂结合,蛋白质相互作用网络为包含245种不同蛋白质和230种不同蛋白质相互作用关系.结论 葡萄糖分解过程、酒精分解过程、磷脂酶A2抑制剂活性和钙依赖的磷脂结合及ACTB、ANXA1、ANXA2、ANXA3、VCP、NPM1、KRT1、SUMO4等关键蛋白质在人肺腺癌转移过程中发挥重要作用,为进一步研究提供线索.