摘要：目的分析解脲支原体(UU)对喹诺酮类耐药基因突变位点及突变类型,为临床筛选新的耐药基因,寻找作用于UU新靶点的抗生素提供理论依据。方法收集临床耐喹诺酮UU标本,提取DNA,用设计的喹诺酮耐药决定区中GyrA、GyrB、ParC,ParE基因特异性引物PCR扩增目的序列并进行测序分析,寻找与耐药相关的突变位点。结果PCR扩增目的基因序列后测序分析,ParC基因是UU喹诺酮耐药的主要突变位点,出现了6个点突变,造成3个位点的氨基酸序列改变;GryA、GryB和Par E基因出现的都是无义突变,氨基酸序列并未改变。结论ParC基因是UU喹诺酮耐药的主要突变位点。临床上应重点针对Par C基因的突变进行相关研究,以降低UU耐药基因突变引起的耐药率上升。

摘要：目的:采用环介导等温扩增(LAMP)技术扩增血培养瓶阳性标本中病原菌的DNA,实现血流感染病原体的快速检测。方法:设计七种常见血流感染病原菌的LAMP特异性引物;应用LAMP技术分别检测七种菌的标准菌株和5株临床菌株,验证引物的特异性;回顾性实验应用LAMP检测已用传统鉴定方法确证过的血培养阳性标本;前瞻性实验应用LAMP与传统培养方法同时检测血培养阳性标本;统计分析该方法检测血流感染病原体的特异性、灵敏度等临床性能。结果:回顾性实验显示该技术的灵敏度为93%,特异性达100%,准确度为94.80%,整体和单个菌的检测数据通过χ^(2)检验计算后都显示其与传统技术无统计学差异。前瞻性实验显示该技术的灵敏度为83%、特异性为100%,准确度为88.23%,与传统技术有较好的一致性,无统计学差异;该技术还能检测混合感染,优于其他核酸检测技术。结论:LAMP技术有快速简便、高灵敏度、高特异性等特点,作为血液感染的实验室诊断手段具有较好的应用前景。