摘要：背景和目的双链RNA特异性地降解相应序列的mRNA,导致转录后水平的基因沉默。肺耐药相关蛋白的过度表达与白血病细胞多药耐药密切相关。本研究旨在探讨白行设计的LRP特异性siRNA能否发挥特异性降解LRPmR- NA、抑制蛋白质表达的作用。方法构建LRP真核表达载体pcDNA3．0／LRP。以pcDNA3．0／LRP、pEGFP-C1、二者的特异性siRNA分别组和,转染K562细胞。以RT-PCR方法和流式细胞术检测LRP mRNA和蛋白质水平的变化,以荧光显微镜检测GFP的表达的变化。结果K562细胞转染pcDNA3．0／LRP后,LRP mRNA水平明显升高,蛋白质表达由阴性转为阳性,阳性率30％;LRP特异性siRNA与pcDNA3．0／LRP共同转染K562细胞,LRP mRNA和蛋白质表达均明显降低,由阳性转为阴性;LRP特异性siRNA与pEGFP-C1共同转染K562细胞,GFP的表达与pEGFP-C1单独转染无差异;GFP特异性siRNA与pcDNA3．0共同转染K562细胞,LRP mRNA水平和蛋白质表达与pcDNA3．0／LRP单独转染无差异。结论 LRP特异性siRNA在K562细胞中能够特异性地降解LRPmRNA、抑制其蛋白质表达。该研究将为利用 siRNA逆转LRP引起的白血病细胞MDR奠定理论基础。

摘要：目的评价美罗培南与多西环素、环丙沙星、舒巴坦及头孢哌酮/舒巴坦联合用药对泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌效应。方法采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对50株临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度,并计算部分抑菌浓度(FIC)指数判定联合效应。结果美罗培南与多西环素联用后,其MIC50显著下降,FIC指数分布:FIC≤0.5占38%,0.52为0。美罗培南与环丙沙星联用后,其MIC50下降不明显,FIC指数分布:FIC≤0.5为0,0.52为0。美罗培南与舒巴坦联用后,其MIC50明显下降,FIC指数分布:FIC≤0.5为26%,0.52为0。美罗培南与头孢哌酮/舒巴坦联用后,其MIC50有所下降,FIC指数分布:FIC≤0.5为10%,0.52为0。结论美罗培南与多西环素、舒巴坦或者头孢哌酮/舒巴坦联合,对泛耐药鲍曼不动杆菌均表现为协同和相加作用,没有无关作用和拮抗作用,具有良好的体外抗菌活性;而美罗培南与环丙沙星联合表现出的相加作用和无关作用比例相当,对泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性较差。

摘要：肺耐药相关蛋白（LRP）是与多药耐药（MDR）相关的糖蛋白。在儿童白血病及成人急性髓系白血病（AML）中，LRP表达是独立的预后决定因素之一，其过度表达造成患者对化疗不敏感，提示预后不良.近年来，小分子干扰RNA（siRNA）介导的RNA干扰（RNAi）既可以特异地降解同源mRNA序列，从而有效阻止相应蛋白质的表达，并且与相应的单链反义核酸相比，siRNA造成的基因抑制效率更高、特异性更好，所需有效浓度却大大减低。国内外学者将siRNA技术应用于消减慢性粒细胞白血病bcr／abl基因以及逆转p蛋白引起的MDR等的研究，取得了良好的效果。我们设计合成了LRP特异性siRNA-LRP，并转染丁酸钠（NaB）诱导的高表达LRP的K562细胞模型（K562／N），观察siRNA-LRP抑制LRP基因和蛋白表达、消除LRP改变细胞内药物蓄积和分布作用的效果，以期为逆转LRP介导的肿瘤细胞MDR、提高难治性和复发性白血病患者疗效探索新的方法，并探讨以siRNA介导的RNAi用于肿瘤细胞MDR治疗的可行性。

摘要：目的：建立并评价从血标本中检测曲霉菌基因的real-time PCR方法。方法：用自行设计的高效率引物探针对标准菌株及临床疑似病人血标本进行检测，对方法的敏感性、特异性进行评价。结果检测出曲霉菌基因敏感性达10拷贝ITS I基因，相当于5～10CFU／ml，与人类基因组、其他真菌及细菌无交叉反应。29例临床疑似标本阳性率为69％，与临床诊断符合率为86％。结论：real-time PCR检测血中曲霉菌基因有较高的敏感性、特异性，有一定的临床应用前景。

摘要：目的探讨IL-18基因单核苷酸多态性rs1946519和rs360718与宫颈癌关系,为研究宫颈癌患病风险奠定基础。方法常规方法对107例原发性宫颈癌患者和80名正常人群外周血进行基因组DNA抽提,并自行设计引物和探针,用等位基因特异性杂交技术对IL-18基因rs360718和rs1946519位点进行TaqMan探针荧光定量PCR分型,应用χ2检验统计分析病例组和对照组等位基因频率、等位基因型频率及其患病风险。结果宫颈癌患者组与对照组IL-18rs360718TT和GT基因型频率及其G和T等位基因频率比较无显著性差异(P>0.05);而宫颈癌患者组与对照组IL-18rs1946519AA、AC和CC基因型频率及A和C等位基因频率差异显著(P<0.05),AC和CC基因型及C等位基因的患病风险分别为2.883,2.750和1.611。宫颈癌与正常人群中IL-18rs1946519和rs360718位点有6种基因型,比较发现AC+TT基因型频率较正常对照组高,有显著性差异(P<0.05)。结论IL-18rs360718等位基因变异与宫颈癌的易感性无关;IL-18rs1946519与宫颈癌的发生有密切关系,具有AC+TT基因型的人发生宫颈癌的危险性相对较高。

摘要：目的探讨微滴式数字PCR(ddPCR)技术在快速、精确诊断新生儿侵袭性真菌感染(IFI)中的临床应用价值。方法选择真菌高度保守序列18S rRNA为目标序列,通过引物设计,建立ddPCR检测真菌体系。在深圳一家医院新生儿重症监护室采集了有IFI高危因素和/或临床症状的83例患者血样(n=83),采用血培养及ddPCR法分别对血样进行真菌检测。结果 ddPCR检测真菌体系的特异性为100%,灵敏度可以达到3.2 copies/μL,重复性良好。临床试验中,22例确诊/临床诊断IFI患儿血样中,ddPCR检测阳性19例。61例拟诊/非IFI患儿血样中,ddPCR法检测结果有2例阳性。结论初步证明ddPCR技术可用于新生儿IFI的检测,该技术是新生儿IFI筛查甚至诊断很有前途的工具。

摘要：背景癌症患儿治疗过程中面临不同程度的症状困扰,科学、快速、准确地评估患儿真实症状对于临床干预尤为重要。目的引进英文版儿科症状筛查工具(SSPedi),并在癌症患儿及其父母中检验量表信效度。设计横断面研究。方法采用Brislin翻译模型对SSPedi汉化翻译,行跨文化调适和预调查后形成中文版SSPedi患儿自评版(SSPedi-C)和SSPedi父母代评版(SSPedi-P)。正式调查选取2022年12月1日至2023年5月26日在南方医科大学南方医院儿科和南方医科大学珠江医院小儿血液科住院治疗的8~18岁癌症患儿及其父或母。在患儿入院当天或第2天,由1名经统一培训的调查人员进入病房,向患儿及其父母分别发放和回收纸质版中文版SSPedi-C和SSPedi-P。问卷数据由调查人员当天录入、核对后行项目分析和信、效度分析。主要结局指标中文版SSPedi-C和SSPedi-P的信度和效度指标。结果220例(95.6%)有效问卷进入本文分析,220例癌症患儿年龄8~17(11.3±2.3)岁,男130例(59.1%),女90例。患儿父或母年龄28~59(40.2±5.2)岁;量表填写人为父亲50名(22.7),母亲170名。项目分析:中文版SSPedi-C和SSPedi-P的15个条目临界比值分别为3.987~8.824和4.817~13.829,P均0.900。结论中文版SSPedi在癌症患儿及其父母中具有良好的信效度,简便易行,可作为评估8~18岁癌症患儿症状困扰程度的工具。

摘要：【目的】探讨早产儿脑白质损伤(WMD)的围产期高危因素及血细胞参数的相关性,为早期发现并规避早产儿WMD的发生提供科学依据。【方法】采用回顾性病例对照研究设计,收集南方医科大学附属深圳市妇幼保健院新生儿科2018年1月1日至2020年12月31日经核磁共振检查诊断为WMD的早产儿85例为病例组,并以胎龄为匹配条件选取同期115例经核磁共振检查未诊断WMD患者作为对照组。采用SPSS22.0统计学软件进行围产期相关因素的单因素分析、血细胞参数单因素分析、构建多因素Logistic回归模型分析WMD的相关因素,并对其中有意义的连续性变量进行接受者操作特性曲线分析,以获得WMD危险因素截断值,最后进行有序Logistic回归分析WMD严重程度的影响因素。【结果】①围产期相关因素单因素分析显示,两组在孕期贫血率、产前足疗程激素使用率、早发败血症发生率、机械通气(≥7 d)比例、低血压发生率、早产儿脑室周围-脑室内出血(PIVH)Ⅲ-Ⅳ级及有血流动力学意义的动脉导管未闭(hsPDA)发生率之间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。②生后第1周的两组血细胞参数单因素分析显示,两组在生后第1周的白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、单核细胞(MONO)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、血小板(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)之间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。③Logistic回归模型显示,机械通气(≥7 d)是WMD发生的独立危险因素,而生后1周内较高的MCH和PLT以及产前足疗程激素治疗是WMD发生的保护因素。④MCH诊断WMD的AUC为0.708,95%CI为(0.595,0.820),截断值为37.10 pg。PLT诊断WMD的AUC为0.669,95%CI为(0.551,0.787),截断值为227.50×10^(9)/L。⑤有序Logistic回归分析,结果显示:早发型败血症是WMD严重程度的危险因素,而胎龄和血小板分布宽度则是其保护因素及血细胞学指标。【结论】早产儿机械通气(≥7 d)、生后1周血细胞MCH和PLT减低可能是预测早产儿WMD发生的独立危险因素及相关血细胞学指标,而产前应用足疗程的糖皮质激素则是其保护因素;早发型败血症及越小的胎龄及PDW可能是WMD严重程度的危险因素。

摘要：目的设计一种新型的术后加压止血束带,增加上肢静脉造影术和PICC置管等术后穿刺点的止血效果,减少护理人员的操作难度。方法在常规止血带的基础上,在止血带的中间止血位处的两侧增加2个夹带,通过夹带将止血棉的两端插在夹带的中部,可将止血棉夹紧固定于气囊处的束带体上。结果将止血棉夹紧固定在气囊处的束带主体上,以便医护人员将与气囊相对应位置的束带主体处和止血棉一同贴在患者出血部位,通过一只手按压束带主体,另一只手将远离套环的束带主体的一端从套环中向后穿过,可使束带主体的左右两端进行连接,再沿着套环的左侧向前拉扯后贴在束带主体上,可使公魔术贴粘在母魔术贴上对束带主体进行固定,避免止血棉窜位偏移。结论加压止血束带能降低医护人员的操作难度,缩短出血时间,增加止血效果,方便医护人员使用。

摘要：目的构建人组织因子基因RNA干扰载体,为达到阻止凝血过程的启动打下基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计人组织因子基因(NM_001993)干扰片段,合成shRNA序列,再制备双链寡核苷酸(dsoligo),退火后形成的dsoligo双链克隆到pENTRTM/U6载体的粘性末端,连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒DNA小提、测序。将构建的载体转染到脐静脉内皮细胞,应用RT-PCR和免疫荧光验证载体对目的基因的干扰情况。结果测序证实阳性克隆为pENTRTM/U6-TF-shRNA,转染到脐静脉内皮细胞后组织因子的表达受到明显抑制。结论成功构建出凝血途径的人组织因子基因RNA干扰载体,为研究组织因子基因RNA干扰载体在凝血疾病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。