摘要：目的：建立并评价从血标本中检测曲霉菌基因的real-time PCR方法。方法：用自行设计的高效率引物探针对标准菌株及临床疑似病人血标本进行检测，对方法的敏感性、特异性进行评价。结果检测出曲霉菌基因敏感性达10拷贝ITS I基因，相当于5～10CFU／ml，与人类基因组、其他真菌及细菌无交叉反应。29例临床疑似标本阳性率为69％，与临床诊断符合率为86％。结论：real-time PCR检测血中曲霉菌基因有较高的敏感性、特异性，有一定的临床应用前景。

摘要：目的建立人血浆中阿奇霉素的高效液相色谱/质谱/质谱(HPLC-MS/MS)测定法,测定受试者口服阿奇霉素颗粒后的血药浓度,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法19名健康受试者采用随机双交叉试验设计,单剂量口服阿奇霉素颗粒受试制剂和参比药物各500 mg,用HPLC-MS/MS测定用药后不同时间血药浓度。血药浓度-时间数据经DAS 2.0统计软件处理,计算主要药动学参数,并进行两种制剂的生物等效性评价。结果受试制剂和参比制剂的Tmax分别为(2.5±1.1)h和(2.6±1.7)h,Cmax分别为(574.6±209.2)***-1和(594.5±229.9)***-1,t1/2分别为(44.7±15.2)h和(42.0±13.0)h,AUC0-144分别为(5 319.6±2 507.8)***-1和(5 710.7±2 710.1)***-1,AUC0-∞分别为(5 704.2±2 858.7)***-1和(6 010.0±2 808.1)***-1,以AUC0-144计算,相对生物利用度为(94.2±15.7)%。两制剂的主要药动学参数无显著性差异。结论受试制剂与参比药物生物等效。

摘要：目的　探讨早期、快速检测嗜肺军团菌的方法。方法　根据嗜肺军团菌特异的巨噬细胞感染增强子mip基因设计引物 ,通过聚合酶链反应合成一段特异的 2 6 0bp长链DNA探针 ,采用反向斑点杂交法检测生物素标记细菌DNA ,并应用于痰标本的检测。结果　所合成的 2 6 0bpDNA探针具有高度特异性 ,只和嗜肺军团菌杂交 ,与其他细菌、真菌、病毒无交叉反应 ,该探针最低可检测出 1ng的细菌DNA。杂交法和培养法分别检测 10 0份痰标本 ,两者的阳性率分别为 8%和 2 %。结论　该方法快速、特异 ,对嗜肺军团菌的早期诊断具有较高的应用价值。

摘要：背景:越来越多的研究事实表明免疫系统不是一个仅有自主调节的孤立系统,而是与中枢神经系统之间存在双向联系。目的:探讨哮喘大鼠肺脏和大脑中c-fos表达的分布及其意义。设计:随机对照实验。单位:南方医科大学南方医院肿瘤科和珠江医院神经外科。材料:实验在2004-01/08在南方医科大学南方医院肿瘤科实验室和珠江医院神经外科完成。选择成年健康雄性大鼠14只。随机分为实验组10只和对照组4只。方法:实验组第1天用卵蛋白10mg加氢氧化铝干粉200mg与灭活百日咳菌苗5×109个配成2mL混悬液腹腔注射,于第15天开始用10g/L卵蛋白超声雾化吸入,2次/h,共3d,制作卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,对照组第1天用生理盐水2mL腹腔注射,于第15天用生理盐水雾化吸入,30mL/d,共3d。所有大鼠在麻醉状态下灌流固定取肺和脑组织,采用免疫组织化学卵白素-生物素-过氧化物复合物法和图像分析等技术观察Fos蛋白在肺脏和大脑内的分布情况。主要观察指标:Fos蛋白在脑内不同区域和肺脏中的分布。结果:14只大鼠均进入结果分析。①哮喘组大鼠肺脏和大脑中c-fos表达明显高于对照组(P<0.05);Fos阳性产物在脑内主要集中分布在额顶皮质、边缘前脑(扣带皮质、梨状皮质和中央杏仁核等)、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区、下丘脑室周核、孤束核、最后区和延髓腹外侧区内;小脑内无明显Fos分布密集区。②哮喘组气道壁及肺组织中可见大量的c-fos阳性细胞,阳性炎症细胞主要分布于黏膜层、黏膜下层及平滑肌周围;而对照组动物气道及肺组织中无或偶见免疫反应极弱的c-fos阳性细胞。结论:哮喘大鼠不仅肺脏中c-fos表达明显增加,而且在延髓内脏带及其上行投射神经核团(下丘脑、杏仁核等)表达也较多,说明原癌基因c-fos表达可能与哮喘神经免疫调节密切相关。

摘要：目的:建立一种利用DNA探针快速检测烟曲霉菌的斑点杂交方法。方法:在烟曲霉特异的碱性蛋白酶基因序列内设计引物,聚合酶链反应合成一段465bp的DNA探针,用地高辛标记探针并与烟曲霉、黄曲霉、念珠菌、隐球菌等真菌以及细菌DNA行斑点杂交,并将该方法应用于临床标本的检测。结果:所合成的探针具有高度特异性,与其他真菌、细菌间无交叉反应,该方法的敏感性达100fg。100份临床标本曲霉培养阳性者6份,杂交阳性者13份。结论:斑点杂交法具有快速、敏感、特异的优点,对烟曲霉菌感染的快速诊断有重要意义。

摘要：目的建立一种快速检测葡萄球菌和甲氧西林耐药葡萄球菌的斑点杂交技术。方法设计金黄色葡萄球菌nuc基因、甲氧西林耐药mecA基因、葡萄球菌tuf基因的特异引物,用聚合酶链反应合成其特异DNA探针,并用生物素标记,分别与固定在硝酸纤维素膜上的标准菌株和临床分离株模板DNA杂交,观察其敏感性和特异性。结果3对引物分别扩增出270bp、310bp、370bp3种DNA探针,均具有高度特异性。50株金黄色葡萄球菌tuf、nuc基因均为阳性,mecA基因阳性者22株。30株表皮葡萄球菌tuf基因均为阳性,nuc基因均为阴性,mecA基因阳性者9株。而其他非葡萄球菌与3种DNA探针杂交结果均为阴性。该方法可检测出1ng细菌DNA。结论斑点杂交技术检测耐甲氧西林葡萄球菌快速、有效,具有较高的应用价值。

摘要：目的了解患者及家属对生活护理实施者的选择情况,以制订个性化的生活护理计划,提高生活护理质量。方法自行设计患者及家属生活护理选择状况2份调查表,对50例患者及其陪护家属进行调查。结果84.0%患者愿意部分生活护理由家属承担,56.0%～72.0%患者选择非技术性类生活护理(刷牙、漱口、洗脸等)由家属承担,技术性类生活护理(翻身拍背等)选择由护士承担;58.0%和54.0%家属选择生活护理由家属承担或在护士指导下由家属承担,76.0%家属因不能为患者做任何事而感到焦虑不安。结论应针对患者和家属的实际需求制订生活护理计划,提高生活护理质量。

摘要：目的:探讨早期、快速检测肺炎支原体的方法。方法:根据肺炎支原体特异的P1基因设计引物,通过聚合酶链反应合成一段特异的162bp长链DNA探针,采用反向斑点杂交法检测生物素标记支原体DNA,并应用于痰标本的检测。结果:所合成的162bpDNA探针具有高度特异性,只和肺炎支原体杂交,与其它细菌、真菌、病毒无交叉反应,该探针最低可检测出1ng的DNA。杂交法和培养法分别检测100份痰标本,两者的阳性率分别为12%和2%。结论:该方法快速、特异,对肺炎支原体的早期诊断具有较高的应用价值。

摘要：目的 了解我国因支气管哮喘（哮喘）急性发作住院患者的临床特征及住院费用情况.方法 回顾性调查并分析全国29个省、自治区、直辖市的29家三级甲等医院2013-2014年因哮喘急性发作入院的患者.通过事先设计的病例报告表搜集患者的一般资料、入院前情况、治疗转归、并发症、住院费用及其构成等信息,并对住院费用的影响因素进行了分析.结果 共纳入3 240例患者,男性1 369例（42.3％）,女性1 871例（57.7％）.41.5％（1 346/3 240）的患者在入院前1年之内曾因哮喘急性发作住院治疗或急诊就诊,仅28.0％ （907/3 240）的患者在入院前规律应用哮喘治疗药物.共有73例（2.3％）入住重症监护室（ICU）,并应用机械通气.8例患者死亡,哮喘急性发作住院患者病死率为0.25％.所有患者住院费用中位数为9045（6 431,13 035）元,其中药品费占52.1％,辅助检查费占27.6％,治疗费占9.6％.药品费中,哮喘治疗药物费用仅占22.7％,而抗菌药物占44.0％.住院费用随着哮喘急性发作严重程度的增加而增加,入住ICU、应用机械通气、合并肺炎及入院前1年内有因哮喘急性发作住院或急诊就诊史患者的平均住院费用更高.结论 我国因哮喘急性发作住院的患者中女性占多数,不规律用药的患者比例高.我国哮喘急性发作患者的住院病死率低于国外文献报道.哮喘急性发作患者的单次住院费用显著高于哮喘患者全年维持治疗费用.药品费用占住院费用的大部分,而在药品费用中,抗菌药物所占比重最高.

摘要：背景:既往有很多关于培养神经元或胶质细胞内钙的研究。然而关于高渗条件下共同观察神经元和胶质细胞内钙变化的研究目前较少。目的:探讨高渗刺激后大鼠下丘脑神经元和星形胶质细胞(AST)内钙的变化。设计:随机对照实验研究。单位:一所大学医院的神经外科和一所大学神经科学研究所的实验室。材料:实验在南方医科大学医院神经外科和解放军第四军医大学全军神经科学研究所完成。新生两三天的SD大鼠2只和孕18d大鼠胚胎6只,清洁级,由解放军第四军医大学实验动物中心提供。方法:体外联合培养的神经元和AST经钙荧光指示剂Fluo-3负载后,用激光扫描共聚焦显微镜测定高渗NaCl溶液影响前后的细胞内钙水平随时间变化情况。主要观察指标:联合培养的神经元和AST的形态观察及等渗和高渗状态下神经元和AST内Ca2+含量测定。结果:高渗刺激使培养神经元和AST内钙水平先升高后降低,最后维持在比高渗刺激前稍高的静息钙水平上。AST钙水平达到峰值的速度略快于神经元。结论:神经元和AST内Ca2+在渗透压信息传递过程起作用。