摘要：目的 构建靶向性血小板衍生生长因子(PDGF)B链的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒,为进一步研究PDGF基因功能奠定基础.方法 根据PDGF-B链序列设计合成含靶向PDGF基因siRNA转录模板的茎环结构,与两端分别有Bam HI、HindIII酶切位点的pSilencer3.1-Hlhygro质粒连接,转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.结果 PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实PDGF siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致.结论 成功构建了靶向性PDGF基因的siRNAs表达质粒.

摘要：目的研究靶向PDGF-B链的小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSCs)细胞外基质分泌的影响。方法根据PDGF-B链序列设计合成siRNA序列,将siRNA序列插入pSilencer3.1-H1hygro质粒,酶切后测序鉴定;PDGF-B链siRNA表达质粒转染HSCs,潮霉素筛选阳性细胞株,RT-PCR和Westernblot分别检测PDGFmRNA和蛋白的表达;将各组筛选的阳性HSCs细胞株培养,MTT观察各组细胞增殖,放射免疫法检测HSCs细胞株上清液中透明质酸和Ⅲ型前胶原的表达。结果成功构建3种表达PDGF-B链siRNA表达质粒,RT-PCR和Westernblot结果表明各siRNA表达质粒阳性HSCs细胞PDGFmRNA和蛋白表达均有明显抑制。PDGF-B链siRNA表达质粒HSCs细胞组较对照组能明显降低HSCs增殖,下调透明质酸和Ⅲ型前胶原表达。结论靶向PDGF-B链的siRNA能降低HSCs增殖和分泌细胞外基质的能力,具有抗纤维化治疗的潜力。

摘要：目的:合成靶向survivin基因的shRNA并构建pGenesil-1-shRNA质粒表达载体,研究其对大肠癌Lovo细胞生物学效应的影响。方法:设计2条特异性靶向survivin基因的shRNA,与pGenesil-1质粒载体连接,导入大肠癌Lovo细胞、筛选稳定细胞株,Western Blot检测蛋白表达,流式细胞技术检测细胞生长周期,MTT法描绘细胞生长曲线。结果:筛选的稳定表达细胞内survivin蛋白的表达水平降低,survivin基因低表达的Lovo细胞停滞于G2/M期从而导致细胞生长速度减慢。结论:靶向survivin基因的shRNA能有效降低survivin基因在体内的表达,抑制大肠癌细胞的生长,为大肠癌基因治疗的可行性提供了有力的证据。

摘要：目的了解广州市胃部不适患者幽门螺杆菌感染现况,探讨幽门螺杆菌感染的饮食相关因素。方法广州市3所医院因胃部不适进行胃镜检查的患者共626例,对其采用快速尿素酶实验检测幽门螺杆菌,采用自行设计的问卷进行饮食因素等方面的资料收集。应用χ2检验、秩和检验和多因素Logistic回归进行资料分析。结果广州市3所医院胃部不适患者幽门螺杆菌阳性率为47.9%。幽门螺杆菌感染率男女间差异无统计学意义,但随年龄增长呈现逐渐升高的趋势(P<0.01)。饮食因素中,酸奶、绿茶和豆类是幽门螺杆菌感染的保护因素,而腌熏食品是幽门螺杆菌感染的危险因素。结论广州市3所医院被调查的胃部不适患者幽门螺杆菌感染率较高,应加强健康宣传,提倡酸奶、绿茶和豆类饮食,减少腌熏饮食,降低幽门螺杆菌感染率。