摘要：目的:探讨扭转原肠胚形成同系物1基因(twisted gastrulation protein homolog 1,TWSG1)对胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响。方法:设计3条TWSG1基因相关的siRNA,将对数生长期MGC-803细胞分为空白对照组、阴性对照组、siRNA1干扰组、siRNA2干扰组和siRNA3干扰组,待细胞汇合率达70%～80%时分别转染空载体、连接siRNA1、siRNA2和siRNA3的载体。采用q PCR和Western blotting检测各组细胞TWSG1 m RNA和TWSG1蛋白的表达水平,筛选干扰效率最高的稳定细胞株。用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果:各转染组细胞中siRNA1干扰效率最高。与空白对照组和阴性对照组相比,siRNA干扰组细胞TWSG1表达下调(P<0.05),其细胞增殖显著增加(P<0.05),凋亡显著减少(P<0.05)。结论:siRNA干扰MGC-803细胞中TWSG1基因的表达后,可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡。

摘要：目的构建siRNA干扰扭转原肠胚形成同系物1(TWSG1)表达质粒,观察TWSG1基因对人胃癌细胞株SGC-7901增殖与凋亡的影响。方法设计TWSG1基因的siRNA转染细胞SGC-7901,构建稳定细胞株,使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测稳定细胞株,使用蛋白印迹法检测稳定细胞株,CCK8检测细胞增殖,进行细胞周期检测。结果成功构建真核表达质粒。成功转染SGC-7901细胞株后,使用siRNA干扰TWSG1表达,siRNA干扰TWSG1表达的SGC-7901细胞灰度值显著低于内参。于24、48、72h时CCK8检测其OD值:siRNA干扰的SGC-7901细胞在48、72h时分别增殖339%、850%;空白组SGC-7901分别增殖173%、644%。细胞周期检测siRNA干扰组中S期细胞比例增高。结论siRNA干扰SGC-7901细胞中TWSG1基因的表达后,能有效促进SGC-7901细胞的增殖。