摘要：背景与目的:通过聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增免疫球蛋白重链(immunoglobulinheavychain,IgH)基因对其克隆性的检测,可以辅助诊断淋巴瘤。缺点是假阴性率较高,在石蜡包埋组织中尤为明显。本研究拟采用手工显微切割、免疫球蛋白重链和轻链(immunoglobulinlightchain,IgL)联合测定等方式,探讨该方法在石蜡包埋组织中非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin\slymphoma,NHL)诊断中的价值。方法:选用1对IgH引物、1对T细胞受体γ(Tcellreceptorγ,TCRγ)、TCRγ引物、2对新设计的轻链引物,通过PCR、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及银染技术,检测经形态学及免疫组织化学确诊的58例石蜡包埋组织标本,包括39例B细胞淋巴瘤、16例T细胞淋巴瘤和3例淋巴结反应性增生组织。以DG75和Jurkat淋巴瘤细胞系DNA作为对照。结果:IgH引物P1在39例B细胞淋巴瘤检出阳性率79.5%(31/39),假阳性率6.25%(1/16),IgL引物在B细胞淋巴瘤检出阳性率71.8%(28/39),假阳性率12.5%(2/16),经统计学分析二者检出率无显著性差异(P>0.05)。二者联合检测,B细胞淋巴瘤阳性检出率可以达到92.3%,假阳性率并无明显提高(12.5%)。以上重排引物在反应性增生淋巴结组织中均未检出。结论:IgH与IgL引物联合检测可明显提高石蜡包埋组织中B细胞淋巴瘤的检出率,并为B-NHL的诊断及鉴别诊断提供了有效的辅助手段。

摘要：目的构建针对FMNL2基因的shRNA表达载体，以用于后续的功能学实验，并观察其对SW620细胞增殖的影响。方法依据设计shRNA的原则，针对人FMNL2的mRNA序列，设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列，构建重组质粒PGenesil—FMNL21和PGenesil—FMNL22，并设阴性对照PGenesil—HK。转柒重组质粒至SW620中，转染48h后荧光显微镜下观察转柒率，应用荧光定量PCR法检测PGenesil—FMNT21和PGenesil-FMNL22的瞬时干扰效果；应用M1Tr法检测转染48h和72h后对SW620增殖活性的影响。结果酶切及测序证实重组质粒构建成功；转染48h荧光显微镜观察转染率：PGenesil，FMNL21为（60、8±2．8）％，PGenesil—FMNL22为（58．7±2．9）％，PGenesil，HK为（62．6±1．7）％，三者之间差异无统计学意义（P〉0．05）；PGenesil—FMNL21对FMNL2基因的抑制效率最高为77、1％；转染12、24、48、72、96h后PGenesil—FMNT21对FMNT2的抑制率分别为13．5％、57．3％、80．3％、62、4％、33、2％；MTlP检测在转染48h和72h后，实验组细胞的增殖活性小于对照组细胞的增殖活性（P〈0．05）。结论PGenesil—FMNL21和PGenesil—FMNL22均有沉默FMNL2基因的作用，其中PGenesil，FMNL21的沉默作用最大；FMNL2可能对促进细胞的增殖有一定的作用。

摘要：目的观察总结海水环境中感染创伤弧菌（vibrio vulnificus，Vv）后局部组织和器官的病理学特点，为临床Vv感染的诊治提供一定的实验依据。方法128只SPF级昆明小鼠，随机分成4组，每组32只，分别为海水Vv菌液浸泡组（A组）、等渗盐水Vv菌液浸泡组（B组）、单纯无菌海水浸泡组（c组）以及单纯无菌致伤组（D组）。每组又随机分成0，6，12，24h4个不同时间组，每组8只。D组小鼠仅无菌致伤，A、B、C组小鼠在无菌致伤后按分组设计均浸泡于相应液体中45～60min。于不同时段对各组局部肌组织及主要脏器组织进行取材、制片、HE染色和观察；采鼠尾血进行Vv的分离培养。结果A组创伤组织的损伤最为严重：0h时，可见肌纤维变性、溶解和断裂，但炎症反应不明显；12h时肌组织溶解坏死更加明显，肌间隙增宽，渗出及出血明显，并伴有大量中性粒细胞浸润；24h时，肌组织大片溶解坏死，微脓肿形成。总体来讲，Vv感染的A、B两组要比未感染的c、D两组病变严重，而组织修复过程也要缓慢。海水菌液浸泡组脱离浸泡后24h时仍无好转趋势，并且该组部分小鼠Vv血培养结果为阳性。Vv血培养阳性的小鼠其主要脏器也出现不同程度的损伤，以肺和肾脏的广泛出血性损伤为主。结论在海水环境中Vv经由皮肤伤口侵入后，其伤口往往表现为感染早、发展快且病变严重的特点。感染组织病理学特点为组织大片的溶解坏死和大量中性粒细胞浸润并伴有脓腔形成；Vv可经伤口人血，引发败血症，并导致小鼠肺、肾等多脏器的损伤。

摘要：目的制备用于斑马鱼胚胎早期cd99l2基因时空表达检测的地高辛标记RNA探针。方法设计引物,构建cd99l2/pGM-T重组质粒,用SacII和SalI分别进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6RNA聚合酶和T7RNA聚合酶转录合成地反义和正义地高辛标记的RNA探针,用整体原位杂交法检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的表达。结果成功构建了cd99l2/pGM-T重组质粒,体外转录获得反义和正义RNA探针,反义探针杂交检测证实cd99l2基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中中枢神经系统呈现高表达,正义探针未检测到表达信号。结论本研究制备的反义cd99l2RNA探针,兼顾了特异性和敏感性,能有效检测斑马鱼胚胎早期cd99l2基因的定位表达,而正义探针可以作为阴性对照,为进一步探究cd99l2基因在斑马鱼发育过程中的作用机制奠定了基础。

摘要：从确定教学目标、课程设置、编写讲义、收集教学涂片及实习课安排等方面对新开课程临床细胞病理学进行了教学设计,并探讨了实施策略和体会.

摘要：我国医学高等教育日趋国际化，教师必须针对留学生的自身特点，在教学实践中做出相应调整，以期达到较好的教学效果。本文从确定教学目标、选定教材、安排教学进度、提高教师英语授课的水平、增进教学效果、严格科学管理及规范考试等方面对留学生病理学全英语教学进行了教学设计，并探讨了实施策略和体会。

摘要：基于校园网和广东省专业信息资源库平台,建设了"肿瘤病理学专业信息资源库"并进行了设计和结构上的优化探讨,力争做到目标明确,针对性强;适用广泛,多层次性;覆盖面广,分类翔实;形式多样,结构清晰;多种检索,手段新颖,目标是建立符合中国国情的病理切片资源库,为教学提供丰富的病理切片,为科研提供准确具有重要参考价值的科研素材,为临床应用建立优秀的继续教育和在岗培训门户,并将进一步开发应用病理图片数据库及基于Web的远程继续教育试验等.

摘要：目的构建人CDH22基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默大肠癌细胞的CDH22基因表达,为研究CDH22在大肠癌转移中参与的信号转导机制提供研究基础。方法利用在线软件设计人CDH22基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核酸后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组,获得真核表达慢病毒干扰载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助质粒和CDH22基因重组慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染大肠癌细胞SW480,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰CDH22基因的细胞亚系。结果成功构建CDH22真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8×105U/ml。荧光定量PCR结果表明,所获得的细胞克隆11中CDH22 mRNA水平的表达显著降低。结论成功构建出CDH22基因慢病毒RNAi表达载体,并获得CDH22基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系,为研究CDH22在大肠癌转移中的作用机制提供了研究基础。

摘要：病理学形成性练习是按教学目标编制的一组练习题,按照教学设计理论的评价反馈原理而设置,须在课堂上完成.我们对2002级本科生及专科生进行了病理学部分章节形成性练习的教学尝试,同时对该届学生进行了问卷调查,共取得653份有效问卷,分析如下:学生要适应练习,积极参与;题目要多种多样,紧扣内容;教师要大胆探索,勇于实践,这样才能保证形成性练习的有效开展.

摘要：目的克隆人PRL-3基因并构建其原核表达载体。方法设计PRL-3特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人PRL-3cDNA。经T-A克隆,通过双酶切鉴定及测序确认后,构建人PRL-3基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PRL-3。结果成功扩增出人PRL-3全长cDNA,并构建pGEX-4T-1-PRL-3原核表达载体,测序结果表明PRL-3全长cDNA与GenBank中PRL-3序列完全一致,SDS-PAGE胶分析表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了重组蛋白。结论获得人PRL-3基因全长cDNA并构建其原核表达载体,使其在大肠杆菌中获得了高效表达,为深入研究PRL-3基因在大肠癌发生发展中的作用奠定了基础。