摘要：目的构建人CDH22基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默大肠癌细胞的CDH22基因表达,为研究CDH22在大肠癌转移中参与的信号转导机制提供研究基础。方法利用在线软件设计人CDH22基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核酸后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组,获得真核表达慢病毒干扰载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助质粒和CDH22基因重组慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染大肠癌细胞SW480,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰CDH22基因的细胞亚系。结果成功构建CDH22真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8×105U/ml。荧光定量PCR结果表明,所获得的细胞克隆11中CDH22 mRNA水平的表达显著降低。结论成功构建出CDH22基因慢病毒RNAi表达载体,并获得CDH22基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系,为研究CDH22在大肠癌转移中的作用机制提供了研究基础。

摘要：目的构建在哺乳动物细胞表达的HPC2真核表达突变载体,并在U2OS细胞中表达。方法从人U2OS细胞中克隆HPC2 cDNA片段,并利用Gateway技术构建pcDNA3.2/V5/HPC2质粒。将质粒用脂质体瞬时转染U2OS细胞,细胞裂解后用Western blot分析HPC2的表达情况。设计突变引物,以HPC2质粒为模板进行PCR,将PCR产物连接并转化扩增,得到特定位点突变的pcDNA HPC2质粒。结果 PCR、酶切、测序均表明pcDNA-V5/HPC2突变质粒构建成功,并可在U2OS细胞中表达。结论成功构建了pcDNA-V5/HPC2突变真核表达载体,为研究HPC2的功能提供了有力的工具。

摘要：目的克隆人PRL-3基因并构建其原核表达载体。方法设计PRL-3特异性引物,提取人大肠癌细胞系SW480总RNA,用RT-PCR方法获取人PRL-3cDNA。经T-A克隆,通过双酶切鉴定及测序确认后,构建人PRL-3基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PRL-3。结果成功扩增出人PRL-3全长cDNA,并构建pGEX-4T-1-PRL-3原核表达载体,测序结果表明PRL-3全长cDNA与GenBank中PRL-3序列完全一致,SDS-PAGE胶分析表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了重组蛋白。结论获得人PRL-3基因全长cDNA并构建其原核表达载体,使其在大肠杆菌中获得了高效表达,为深入研究PRL-3基因在大肠癌发生发展中的作用奠定了基础。

摘要：目的构建PRL-3基因慢病毒干扰载体及建立PRL-3基因稳定干扰的结直肠癌细胞亚系,为PRL-3基因功能研究奠定基础。方法设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,与pENTRTM/U6线性载体定向连接,构建pENTRTM/U6真核入门表达载体。通过与pENTRTM/U6 entry clone与pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST载体进行重组,获得pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体。利用包装细胞293FT获得重组的慢病毒,感染大肠癌细胞株SW480细胞,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰PRL-3基因的细胞亚系。结果成功构建PRL-3pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度为6×105U/L。RT-PCR、Western blotting结果表明,克隆1PRL-3 mRNA及蛋白显著降低。结论成功构建人PRL-3基因特异性的慢病毒干扰载体,获得PRL-3基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系。

摘要：从确定教学目标、课程设置、编写讲义、收集教学涂片及实习课安排等方面对新开课程临床细胞病理学进行了教学设计,并探讨了实施策略和体会.

摘要：目的:构建HPC2不同截短功能片段的真核表达载体,并检测各片段在骨肉瘤U2OS细胞中的表达。方法:以质粒pcDNA3.2-V5/HPC2为模板,分别设计各片段PCR引物进行扩增,EcoR I酶切鉴定PCR产物,正确的PCR产物进行连接后转化到DH5α感受态细胞中并涂板筛选,从而得到带有V5标签的不同截短动能片段的表达载体,提取质粒并转染U2OS细胞,Western blot法鉴定目标蛋白的表达。结果:测序及酶切的结果均表明HPC2不同功能片段的真核表达载体构建成功,并能够在U2OS细胞中表达。结论:成功构建了HPC2不同功能域片段的真核表达载体。

摘要：我国医学高等教育日趋国际化，教师必须针对留学生的自身特点，在教学实践中做出相应调整，以期达到较好的教学效果。本文从确定教学目标、选定教材、安排教学进度、提高教师英语授课的水平、增进教学效果、严格科学管理及规范考试等方面对留学生病理学全英语教学进行了教学设计，并探讨了实施策略和体会。

摘要：“微创”技术随着新世纪外科的发展逐渐走近临床，因此在现代临床教学过程中要贯穿“微创”意识，要把树立“微创”观念作为对现代外科医生的基本要求，培养临床医生的微创外科技术，从而适应现代科技和社会医疗的发展。

摘要：基于校园网和广东省专业信息资源库平台,建设了"肿瘤病理学专业信息资源库"并进行了设计和结构上的优化探讨,力争做到目标明确,针对性强;适用广泛,多层次性;覆盖面广,分类翔实;形式多样,结构清晰;多种检索,手段新颖,目标是建立符合中国国情的病理切片资源库,为教学提供丰富的病理切片,为科研提供准确具有重要参考价值的科研素材,为临床应用建立优秀的继续教育和在岗培训门户,并将进一步开发应用病理图片数据库及基于Web的远程继续教育试验等.

摘要：病理学形成性练习是按教学目标编制的一组练习题,按照教学设计理论的评价反馈原理而设置,须在课堂上完成.我们对2002级本科生及专科生进行了病理学部分章节形成性练习的教学尝试,同时对该届学生进行了问卷调查,共取得653份有效问卷,分析如下:学生要适应练习,积极参与;题目要多种多样,紧扣内容;教师要大胆探索,勇于实践,这样才能保证形成性练习的有效开展.