摘要：背景:采用传统水提法提取的消淤接骨散药效不明显,推测可能为有效成分提取不充分所致。目的:正交实验进行消淤接骨散醇提取工艺设计。方法:以处方的醇浸膏得率和君药骨碎补有效成分柚皮苷含量为考察指标,采用L9(34)正交实验法进行优选,HPLC法测定柚皮苷含量,对消淤接骨散醇提取工艺进行优化筛选。观察醇浸膏得率,柚皮苷含量及吸醇率。结果与结论:第3次醇提的醇浸膏得率及柚皮苷提取量所占比率均大于10%,应进行3次醇提方可完全提取药物成分。药材吸醇率平均值为265.67mL/g,表明提取时第1次应多加3倍量溶剂。正交实验结果分析,由极差R值大小显示,各因素作用主次为加醇量>乙醇体积分数>提取时间,方差分析结果表明:乙醇体积分数、加醇量两因素的影响具有显著性意义(P<0.05)。最佳优选工艺即药材加乙醇回流提取3次,第1次加6倍量体积分数65%乙醇提取2h,第2次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h,第3次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h。较以往中药提取工艺可更有效得出药物有效成分、节省不必要的工艺流程,且该工艺操作简单,重复性好,柚皮苷含量高。

摘要：背景:不同疾病状态的个体由于体内生化病理环境的差异,其单核-巨噬等细胞对各种体内外刺激因素的反应性亦存在一定差异。目的:拟观察健康个体与冠心病患者外周血单核源性巨噬细胞泡沫化过程的差异。设计、时间及地点:细胞水平的对比观察实验,于2007-06/12在珠江医院中心实验室完成。对象:选择本院收治的冠心病高危及冠心病患者,纳入标准:符合冠心病的临床诊断标准。另选健康个体作为对照,均经临床体格检查和生化检查符合健康人判断标准,受试者对试验知情同意。方法:采用一次性密度梯度超速离心法从血浆中分离低密度脂蛋白,以Cu2+诱导法对其进行氧化修饰。分别采用密度梯度离心法和塑料吸附法从健康个体、冠心病高危及冠心病患者外周血中分离单核细胞,以80nmol/L佛波酯刺激48h使之转化为巨噬细胞。实验按单核细胞取材群体不同分为3组,即健康个体组、冠心病高危组和冠心病组,同时设对照组,对照组只加培养基,实验组另加氧化低密度脂蛋白至终末浓度为80mg/L。主要观察指标:培养24h和48h后收集细胞,油红O染色观察细胞内脂滴变化;高效液相色谱分析细胞内胆固醇的变化。结果:单核细胞经80nmol/L佛波酯诱导24h后,光学显微镜下可见冠心病高危组和冠心病组大部分细胞已由圆形变成多角形状,形态变化较对照组及健康个体组明显。48h后,光镜下可见单核细胞已转化为典型的巨噬细胞。油红O染色发现,与80mg/L氧化低密度脂蛋白共孵育48h后培养细胞中出现了大量的红染颗粒。高效液相色谱法测定细胞内胆固醇提示细胞内总胆固醇明显增加,其中胆固醇酯含量大于游离胆固醇,符合泡沫细胞的特征。同时发现,来自冠心病患者体内的单核细胞更易被诱导形成巨噬细胞,且其发生泡沫化程度较健康、冠心病高危个体者高。结论:源自冠心病高危、冠心病患者体内的单核细胞较健康个体者更易被诱导分化形成巨噬细胞,且后者更易发生泡沫化。