摘要：目的研究基于64排螺旋CT扫描数据的三维肝脏虚拟手术的设计和仿真效果，以及基于自由设计模型系统（FreeForm Modeling System）的虚拟手术的可行性。方法采集正常人肝脏64排薄层扫描数据集，利用医学三维重建软件（MIMICS软件）进行肝脏及其肝内血管三维重建，并将重建的肝脏及其管道模型、人工绘制肝脏肿瘤模拟物导入FreeForm Modeling System，利用力反馈设备（PHANTOM），对肝脏模型进行手术切割。结果通过旋转和放大目标物体，肿瘤与肝内血管的立体关系能清晰展示。根据手术原则，使用PHANTOM操纵“手术刀”，仿真左外叶切除，术中肝内管道结构容易识别，其过程基本符合临床肝脏肿瘤切除的手术过程并可调节目标物体的强度，感受切割时力反馈的大小。结论利用FreeForm Modeling System虚拟手术系统仿真肝脏手术切割，可以制定合理的个体化手术方案，减少并发症发生，提高手术成功率。

摘要：目的探讨孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)是否参与乳腺癌细胞增殖及化疗药物敏感度的调控,为乳腺癌的化疗提供参考依据。方法设计合成以PGRMC1为靶标的siRNA1、2,用lipofectin2000转染人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231(ER-,PR-)和低转移细胞株MCF-7(ER+,PR+),QRT-PCR检测转染siRNAs后PGRMC1基因mRNA水平变化,Western blot法检测蛋白表达变化,以siRNA-GFP为阳性对照,未处理组为空白对照。CCK8法检测转染前后DTX敏感度。应用1/2的IC50DTX作用转染组与对照组,流式细胞仪检测各组细胞周期变化,Annexin V/PI阳性细胞百分比,对比各组细胞凋亡率、死亡率,双氢二氯荧光黄染色阳性率判定各组细胞内ROS水平。JC-1染色后,免疫荧光显微镜下观察各组细胞线粒体膜电位变化。结果以PGRMC1为靶标设计的siRNA1、2对该基因mRNA及蛋白表达显著抑制在70%以上,细胞增殖受抑,对化疗药物敏感度增高,与非转染组相比G2期细胞比例明显增加,凋亡细胞比率明显增加,细胞内ROS水平也随之升高,线粒体膜电位下调。结论 PGRMC1参与了乳腺癌细胞增殖及化疗敏感度的调控。

摘要：目的研究三维重建技术在儿童腹部肿瘤中的临床应用价值。方法利用自主研发的医学图像处理与模拟软件,对儿童腹部肿瘤CT图像进行分割、三维重建,根据重建结果对肿瘤与周围脏器及血管的关系进行分析,并对手术难易程度及可切除性进行评估。手术中进行拍照、录像,与重建结果进行对比。术后再用病理结果对肿瘤组织来源进行验证。结果例1:三维重建的模型显示肿瘤占居腹部和盆腔大部,形状不规则,其内有一不规则高密度骨质样物,腹主动脉、髂血管位于肿瘤后侧,与肿瘤有一定的距离。术前预测为畸胎瘤。经手术验证,重建结果符合患者个体化实际情况。肿瘤内为大量褐色液体,内含少量毛发及骨骼样组织。术后病理证实为囊性成熟性畸胎瘤。例2:重建的模型显示腹主动脉、腹腔干及其分支、肝动脉、门静脉主干及分支、脾静脉等结构均清楚显示,胃网膜血管迂曲增粗,肿瘤来源于胰腺,胰体尾受压萎缩,仅保留少量胰头组织。术中结果证实肿瘤来源于胰腺,胰体尾受压。术后病理证实为胰腺实性-假乳头状瘤。结论三维重建技术可对儿童腹部肿瘤进行准确定位,并于术前进行肿瘤性质及来源预测,有利于手术方案的合理设计,降低手术风险。

摘要：背景:作者先前已成功建立小动物移植模型,并验证了受者经供体凋亡细胞预处理后能够诱导免疫耐受。目的:验证60Coγ射线体外处理后的供者淋巴细胞预输注诱导猪肝移植特异性免疫耐受的可能性,为不作常规免疫抑制处理成年大动物的移植免疫耐受诱导提供可行的途径。设计、时间及地点:于2004-06/2007-02在南方医科大学南方医院动物研究所完成随机对照动物实验。材料:版纳小型猪16只为供体组,西藏小型猪16只为受体组,五六月龄,体质量15～17kg,雌雄不拘,共行原位肝移植手术16只次。方法:将受体猪按随机数字表法分为2组(n=8),空白对照组受体猪无特殊处理;供体淋巴细胞预处理组受体猪在术前7d经耳静脉注射60Coγ射线处理过的供体淋巴细胞。主要观察指标:应用AnnexinV/PI双标法检测60Coγ射线处理后的淋巴细胞凋亡率,并与正常淋巴细胞进行对照。观察两组受体猪移植术后的存活时间,术后检测肝功能指标及肝脏病理变化。结果:成功建立非转流小型猪原位肝移植模型16例。①60Coγ射线体外处理后的淋巴细胞凋亡率明显高于正常淋巴细胞(P0.05)。结论:60Coγ射线体外照射可以诱导淋巴细胞凋亡,60Coγ射线体外处理过的淋巴细胞预输注未能够诱导小型猪同种异体肝移植特异性免疫耐受。

摘要：目的设计一种新型混合型生物人工肝(HBAL)并通过对模拟肝衰竭血清的净化作用评价其疗效,探讨其临床应用的可行性。方法选用中国人肝细胞株-1(CL-1)作为肝细胞供体,在微重力环境下,肝细胞微载体共培养方法培养至第5天,细胞总量约4.0×109个,细胞密度约为4.0×1010/L,在无菌环境下灌入自制生物反应器中,制成生物部分,非生物部分采用血液灌流+胆红素吸附,生物部分和非生物部分通过两套聚乙烯胶管构成一个封闭的环路,监测模拟肝衰竭血清中未结合胆红素、鹅去氧胆酸,胆酸、血氨经过HBAL循环后浓度的变化以及生物反应器中肝细胞功能、形态及肝细胞活性的变化。结果整个治疗过程中循环前24h内,模拟肝衰竭血清中未结合胆红素(UBD)、鹅去氧胆酸(CDCD),胆酸(CA)和血氨(AA)的浓度分别从(335.3±6.0)、(395.0±5.6)、(155.7±4.5)、(39.0±2.6)μmol/L下降至(106.0±10.9)、(131.8±28.7)、(42.2±7.3)、(3.5±1.0)μmol/L,与0h比较差异有统计学意义(P=0.041),24h后浓度下降趋于平稳;循环48h后,CL-1细胞功能发生变化,生物反应器中模拟肝衰竭血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)分别从(25.9±4.2)IU/L、(22.0±3.6)IU/L、(0.28±0.09)μmol/L升高至(31.0±2.6)IU/L、(31.6±8.0)IU/L、(0.41±0.12)μmol/L,与0h比较差异有统计学意义(P=0.027);并且整个反应器中肝细胞的数量和活力在循环48h后也呈现显著性下降(P=0.044)。结论(1)构建了一种新型灌流型生物反应器,该生物反应器中的CL-1细胞能够保持较高的活性和良好的功能。(2)新型混合生物型人肝可以显著降低模拟肝衰竭血清中的未结合胆红素、鹅去氧胆酸,胆酸、血氨的浓度,具有清除这些毒性物质的功能,提示其具有明显的肝功能支持作用。

摘要：背景:骨髓间充质干细胞具有极强的自我复制能力和多向分化潜能,但当体外分离培养的骨髓基质干细胞移植到体内后,其分布和定居情况不明,这关系到骨髓基质干细胞是否可以作为靶细胞治疗应用于临床。目的:探索绿色荧光蛋白标记的大鼠骨髓间质干细胞(MSCs),经不同途径移植到同种异体大鼠,其定居于肝脏的能力。设计:析因设计。单位:广东省第二人民医院普外科/中山大学博士后科研基地,南方医科大学珠江医院普通外科,中山大学附属第三医院器官移植科。材料:实验于2003-01/2004-12在解放军第一军医大学基础部药理教研室完成。选取清洁级成年SD大鼠36只,随机分为5组:CCL4+门静脉移植组(6只)、门静脉移植对照组(6只)、CCL4+尾静脉移植组(6只)、尾静脉移植对照组(6只)、混合组(12只)。方法:①从大鼠骨髓中分离培养获取骨髓间充质干细胞,以绿色荧光蛋白进行标记,体外扩增后,以细针移植骨髓间充质干细胞悬液,移植量为0.5mL/100g。②CCL4+门静脉移植组:骨髓间充质干细胞移植前3d,每天按20g/L的CCL42.5mL/kg体质量灌胃饲养,首次计量加倍,标记的骨髓间充质干细胞从门静脉移植。门静脉移植对照组:骨髓间充质干细胞移植前正常饲养,标记的骨髓间充质干细胞从门静脉移植。CCL4+尾静脉移植组:骨髓间充质干细胞移植前3d,每天按20g/L的CCL42.5mL/kg体质量灌胃饲养,首次计量加倍,标记的骨髓间充质干细胞从尾静脉移植。尾静脉移植对照组:移植前正常饲养,标记的骨髓间充质干细胞从尾静脉移植。混合组:前4组条件下,各设2只大鼠移植未标记的骨髓间充质干细胞;另设CCL4喂养3d和正常喂养大鼠各2只,不行骨髓间充质干细胞移植。③于移植后的第3,7天,通过荧光定量PCR检测各组移植的骨髓间充质干细胞在大鼠肝脏的表达。主要观察指标:①骨髓间充质干细胞的分离纯化、体外扩增及表型鉴定结果。②绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞结果。③移植同源异体骨髓间充质干细胞后大鼠的生长情况观察。④各组肝脏组织中绿色荧光蛋白阳性DNA数的定量检测结果。结果:实验选取SD大鼠36只全部进入结果分析。①Percoll梯度分离液分离大鼠骨髓,所获得的细胞传代、扩增后,形态呈基本一致的梭性。细胞表面不表达CD34与CD45,而表达CD29,CD44,CD90等骨髓间充质干细胞的表面标志,是骨髓中区别于造血干细胞的另一群处于未分化状态的非定向干细胞。②骨髓间充质干细胞转染24h后即可见发绿色荧光的细胞。48～72h阳性细胞明显增多,强度增强,高倍视野下转染率达20%～30%,多为明亮的绿色荧光的细胞。作为对照的骨髓间充质干细胞中未发现发绿色荧光的细胞。③所有大鼠从不同途径移植标记或未标记的同源异体骨髓间充质干细胞后,第1天精神、食欲差,少活动;移植后第2天基本恢复正常饮食和精神,各组大鼠之间无明显差异。④除混合组外,其余各组于移植术后第3,7天,肝脏内均可检测到含绿色荧光蛋白阳性细胞。且CCL4+门静脉移植组、CCL4+尾静脉移植组肝脏组织中的绿色荧光蛋白阳性DNA数显著高于门静脉移植对照组、尾静脉移植对照组升高(P<0.05)。结论:干细胞定居于肝脏的时间与细胞数量可能与肝脏是否受损有关,与移植途径关系不密切。正常动物肝脏未受损情况下,干细胞可定居于肝脏,定植的细胞量与移植途径、移植后时间相关。

摘要：目的设计并制作举肠器,通过电视腹腔镜下行左半结肠、直肠手术验证其安全性、可靠性。方法将西藏小型猪随机分为两组:处理组与对照组,每组15头,然后在电视腹腔镜下对实验猪的远端直行部位的结肠、直肠系膜进行分离操作,处理组术中使用举肠器,对照组不使用举肠器。比较两组的手术时间、出血量及CO2气体用量。结果实验中两组均无动物死亡,处理组的手术时间、出血量及CO2气体用量三项指标明显优于对照组。结论在电视腹腔镜下行左半结肠、直肠手术中应用举肠器使手术操作简单,且安全、可靠。