摘要：目的针对临床试验中的生存数据,基于加速失效时间模型提出一种亚组识别方法。方法将Adaptive Elastic Net应用于加速失效时间模型(称为惩罚模型),通过检验协变量与治疗组别的交互项来识别亚组相关协变量。采用基于极大似然的change-point算法寻找预测计分的截断点以对患者进行亚组分类。采用二阶段适应性设计,以评价治疗效果是否存在于所识别的获益亚组人群中。对比四种模型(含协变量主效应的惩罚模型、单变量模型,以及不含协变量主效应的惩罚模型、单变量模型)的亚组识别效果。结果模拟结果显示,在样本量较小、删失率较高、获益亚组占比较小以及样本量不超过协变量个数的情况下,含协变量主效应的惩罚模型在获益亚组的识别上有明显的优势;而其他情况下,则是不含主效应的单变量模型较优。在二阶段适应性设计中,这两种模型进行亚组识别的Ⅰ类错误均控制在0.05左右;当潜在获益亚组时,相比于传统设计,适应性设计很大程度上提高了检验效能。结论含协变量主效应的惩罚模型适用于生存数据的亚组识别;相比于传统设计,二阶段适应性设计更适用于潜在获益亚组的疗效评价。

摘要：目的依据dystrophin基因缺失后断端重接可形成一段变异的DNA序列，提出一种利用缺失连接片段进行缺失型假肥大型肌营养不良症携带者检测的新方法。方法实验以来自广东省肇庆地区的一个Becker型肌营养不良（Becker muscular dystrophy，BMD）家系为研究对象，其中2例确诊的男性BMD患者，3例待诊的女性携带者，1例待诊的人工流产绒毛。先证者经外显子PCR检测确定第3．5外显子缺失，随后采用PCR步移法在相应内含子设计引物定位断裂点的位点，最后利用靠近断裂点设计的引物直接对家系的6例基因组DNA进行缺失连接片段的PCR扩增和测序。结果6例基因组DNA均扩增出阳性的产物片段且连接片段的测序序列完全一致，绒毛的性别诊断结果为女性，可以确诊本家系中的3个女性和流产绒毛均为缺失型BMD携带者。结论作者成功地将整个家系患者和携带者的缺失连接片段进行克隆和测序分析，实现了利用缺失连接片段对缺失型假肥大型肌营养不良症携带者进行准确基因诊断的设想，同时对在产前诊断上的应用前景进行了探讨。

摘要：研究放射性核素铼(188Re)标记脑胶质瘤U87-EGFRvIII(Epidermal Growth Factor Receptor Variant III)细胞反义寡核苷酸序列的制备方法,探讨其作为脑胶质瘤反义显像剂的可能性。采用细胞指数富集的配基系统进化技术(Cell-based Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,Cell-SELEX)筛选脑胶质瘤U87-EGFRvIII细胞,得到一段高亲和力的反义寡核苷酸序列U2,然后采用直接标记法进行188Re的放射性标记,按照正交实验设计进行188Re最佳标记条件的摸索,纸层析法测定标记率,通过体外稳定性实验评价188Re-U2的放化特性,测定标记物静脉注射后在大耳兔不同时相血液放射性清除曲线,应用SPECT显像观察标记物在兔体内的放射性动态分布变化。结果表明:在最佳标记条件下188Re-U2的标记率为70%±14%;经Sep-PaK C18反相柱分离纯化后,188Re-U2在生理盐水和血清中37 oC下放置24 h的放化纯度分别为70.6%和95.55%;188Re-U2在兔体内的血放射性清除迅速,主要通过肾脏排泄,其余脏器内放射性均较低。188Re直接法标记U87-EGFRvIII细胞反义寡核苷酸U2的方法简单,具有良好的标记率和体内外稳定性,并且体内分布动力学特性也比较理想。

摘要：目的优化银杏内酯AB长循环固体脂质纳米粒(GAB-LSLN)的制备工艺。方法以热融-匀质法制备固体脂质纳米粒,以平均粒径、包封率、载药量为评价指标,采用星点设计考察辅料单硬脂酸甘油酯用量、注射用大豆磷脂用量、Myrj59用量3因素对制备工艺的影响,对结果进行多元线性和二项式拟合,效应面法选取最佳工艺条件进行预测分析。结果从复相关系数上看,各指标二项式拟合方程均优于多元线性回归方程,以优化条件制备的GAB-LSLN平均粒径为169.5nm,包封率为92.3%,载药量为5.1%。结论优选的GAB-LSLN制备工艺稳定可行,包封率高,可用于生产。

摘要：目的探讨基于三维重建技术的旋股外侧动脉降支侧支皮瓣修复下肢软组织缺损的临床效果。方法 2009年3月-2010年1月,收治7例足、踝及胫前区皮肤软组织缺损患者。男6例,女1例;年龄6～51岁。交通事故伤4例,重物压伤3例。损伤部位:足部2例,踝部2例,胫前区3例。伤后至入院时间为8 h～40 d,平均20 d。创面伴骨、肌腱等组织外露,皮肤软组织缺损范围12 cm×7 cm～20 cm×14 cm。入院后对合并伤进行对症处理,4～16 d后手术。术前先行皮瓣数字化三维重建,并行皮瓣设计。术中切取大小为15 cm×9 cm～22 cm×16 cm的旋股外侧动脉降支侧支皮瓣游离移植修复缺损。供区直接缝合。结果术后皮瓣均成活,创面及供区切口均Ⅰ期愈合。患者均获随访,随访时间6～12个月。皮瓣外形、质地较好,恢复保护性感觉,能满足日常生活需要。踝关节功能满意,背伸19～22°,跖屈30～36°,正常行走。供区无明显瘢痕形成,肢体无异常。结论旋股外侧动脉降支侧支皮瓣血供可靠,操作简便,对供区影响小,术前三维重建设计可提高手术成功率,可作为修复下肢软组织缺损的理想选择之一。

摘要：目的设计PCR联合限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）快速检测HBV阿德福韦耐药变异（rtN236T）的方法以及观察阿德福韦耐药毒株的动态变化情况。方法7例乙型肝炎患者在阿德福韦单药治疗过程中出现病毒突破或应答不完全。对其系列血清标本的HBVDNA逆转录酶部分区域进行直接或克隆后测序，设计和应用PCR—RFLP方法对rt236位点的变异情况进行检测。采用Hamming距离法计算HBV部分逆转录酶区域的基因多样性。结果l例患者出现rtA18IV变异，3例为rtN236T变异。建立了基于限制性内切酶DraI或HpaI的PCR—RFLP方法检测rtN236T变异：可以检测至少10％的弱势毒株，特异性为100％。在病毒突破前8个月可以检测到耐药毒株；该耐药毒株后来成为优势毒株。1例患者停用阿德福韦3个月后野生毒株取代耐药毒株重新成为优势株。1例患者在病毒突破后继续服用阿德福韦，rtN236T突变被一个新的突变株（rtN236V）替代。拉米夫定耐药患者的HBV逆转录酶有更明显的基因多样性。结论建立了PCR—RFLP快速检测rtN236T变异的方法；阿德福韦耐药毒株可以表现为不同的转化过程。

摘要：目的利用Y染色体细胞的特异性来研究肝脏卵圆细胞分化为肝癌细胞的直接证据,从而为卵圆细胞源性的研究及将来卵圆细胞的临床应用提供理论依据。方法30只雄性Wistar大鼠喂含0·06%的3-甲基-4-二甲基偶氮苯(DAB)的饲料4周,建立动物模型。将雌性Wistar大鼠40只随机平分成对照组和实验组,对照组不接种提取的雄性Wistar大鼠卵圆细胞悬液,连续喂含DAB的饲料14周。实验组肝脏包膜下接种悬液,连续喂DAB饲料14周,以促进肝肿瘤的生成。设计引物片断,14周后提取两组大鼠肝肿瘤组织的基因组DNA,应用PCR扩增,对产物进行电泳分析。结果14周后40只雌性大鼠均见肝脏肿瘤生成,实验组电泳后均见与设计片断长度相符的电泳阳性条带,对照组则未见阳性条带。结论大鼠的卵圆细胞可分化为肝癌细胞,为卵圆细胞源性肝癌细胞的假说提供实验依据。

摘要：目的了解行海水浸泡处理对浅Ⅱ度烫伤大鼠早期炎症反应及氧自由基损伤的影响。方法取Wistar大鼠70只，按照随机数字表法分为健康对照组7只、单纯烫伤组21只、烫伤＋淡水浸泡组21只、烫伤＋海水浸泡组21只。健康对照组大鼠不行任何处理，其余3组大鼠背部均造成5％TBSA浅Ⅱ度烫伤。伤后即刻，单纯烫伤组大鼠自由活动，烫伤＋淡水浸泡组及烫伤＋海水浸泡组大鼠背部创面分别浸泡于淡水和海水中。于浸泡后（伤后）2、4、6h，单纯烫伤组、烫伤＋淡水浸泡组、烫伤＋海水浸泡组各取7只大鼠，收集大鼠血清，切取大鼠背部创面中心全层皮肤组织；健康对照组于其他组大鼠伤后6h取7只大鼠，收集血清并取相同部位全层皮肤组织。HE染色观察皮肤组织形态，ELISA法检测血清和皮肤组织TNF—α含量，羟胺法测定血清和皮肤组织SOD含量，硫代巴比妥酸法测定血清和皮肤组织丙二醛含量。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、Welch检验、LSD检验及Tamhane检验。结果（1）健康对照组大鼠皮肤组织表皮细胞排列整齐、连续，真皮层组织及附属结构清晰完整。单纯烫伤组大鼠伤后2、4、6h，创面皮肤层次及表皮无明显改变，表皮及真皮水肿、炎性细胞浸润情况随时间的延长而增强。烫伤＋淡水浸泡组大鼠伤后2、4、6h，创面皮肤表皮角质层随时间的延长而减少，表皮及真皮水肿、炎性细胞浸润增强；伤后6h部分表皮细胞崩解。烫伤＋海水浸泡组大鼠伤后2、4、6h，创面皮肤表皮角质层随着时间的延长明显减少，表皮细胞崩解逐渐增多，表皮及真皮水肿明显增强，大量炎性细胞浸润。（2）与健康对照组的（247±27）pg／mL比较，单纯烫伤组大鼠血清TNF—α含量在伤后2、4h明显升高[分别为（675±122）、（367±54）pg／mL，P〈0．05或P〈0．01]，在伤后6h明显降低[（147±27）pg／mL，P〈0．01]；烫伤＋淡水浸泡组大鼠血清TNF—α含量在伤后6h明显降低[（90±24）pg／mL，P〈0．01]；烫伤＋海水浸泡组大鼠血清TNF—α含量在伤后2、4、6h明显升高[分别为（1646±58）、（2086±114）、（2951±58）pg／mL，P值均小于0．01]。与健康对照组的（36±-123）U／mL比较，单纯烫伤组大鼠血清SOD含量在伤后2、4h明显升高[分别为（489±13）、（447±14）U／mL，P值均小于0．05]；烫伤＋淡水浸泡组大鼠血清SOD含量在伤后6h明显降低[（282±13）U／mL，P〈0．05]；烫伤＋海水浸泡组大鼠血清SOD含量在伤后2h明显升高[（461±23）U／mL，P〈0．05]，在伤后4、6h明显降低[分别为（226±8）、（205±10）U／mL，P值均小于0．01]。与健康对照组比较，单纯烫伤组、烫伤＋淡水浸泡组、烫伤＋海水浸泡组大鼠血清丙二醛含量在伤后2、4、6h明显升高（P值均小于0．01）。（3）与健康对照组比较，单纯烫伤组、烫伤＋海水浸泡组大鼠创面组织TNF—α含量在伤后2、4、6h明显升高（P〈0．05或P〈0．01），烫伤＋淡水浸泡组大鼠创面组织TNF．仪含量在伤后2、4h明显升高（P值均小于0．01）。与健康对照组比较，单纯烫伤组、烫伤＋淡水浸泡组大鼠创面组织SOD含量在伤后2、4、6h明显升高（P〈0．05或P〈0．01），烫伤＋海水浸泡组大鼠创面组织SOD含量在伤后2、4h明显升高（P值均小于0．01）。与健康对照组比较，单纯烫伤组、烫伤＋淡水浸泡组、烫伤＋海水浸泡组大鼠创面组织丙二醛含量在伤后2、4、6h明显升高（P值均小于0．01）。结论海水浸泡可加重浅Ⅱ度烫伤大鼠早期创面及全身的炎症反应以及氧自由基损伤。

摘要：从1968年美国计算机图形学之父Ivan Sutherland设计出第一款头戴式显示设备“Sutherland”开始，虚拟现实经过50年的发展，已经成为一门涉及众多科学领域的高新技术。在康复医学界，虚拟现实技术已被广泛应用于各种关于运动、感觉和心理障碍疾病的康复训练中，成为非常热门的研究方向。

摘要：目的探讨基于问题学习(problem-based learning,PBL)结合基于人体模型的医学模拟教学在住院医师创面修复教学中的应用效果。方法本研究采用试验对照方法。2022年1至12月,以解放军总医院第一医学中心接受住院医师规范化培训的60名学员为研究对象,采用随机数字表法将其平均分为试验组和对照组。试验组学员采用PBL结合基于人体模型的医学模拟教学方法,对照组学员采用传统课堂讲授结合基于人体模型的医学模拟教学方法。在为期2个月的创面修复教学结束后,通过两组学员考核成绩和问卷调查结果评价各自教学效果,采用χ^(2)检验和t检验分析相关数据。结果两组学员应用皮瓣修复创面的理论考试成绩比较,其差异无统计学意义[(88.3±5.1)分比(87.9±4.7)分,P=0.726];试验组学员的实践考试成绩高于对照组学员,其差异具有统计学意义[(92.6±5.1)分比(80.4±6.2)分,P=0.012]。问卷调查结果显示,PBL结合基于人体模型的医学模拟教学在激发学员的学习兴趣,提高其自学能力、皮瓣设计的临床应用能力和创新能力培养等方面,试验组学员赞成的比例均高于对照组学员[86.7%(26/30)比60.0%(18/30),90.0%(27/30)比50.0%(15/30),96.7%(29/30)比63.3%(19/30),90.0%(27/30)比50.0%(15/30)],其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论PBL结合基于人体模型的医学模拟教学有助于提高学员在短时间内应用皮瓣的临床实践能力,并得到住培学员的认可,实现了迅速提高学员应用皮瓣修复创面能力的培养目标。