摘要：目的综合评估Elecsys血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)检测试剂在中国人群中辅助诊断肝细胞癌(HCC)的临床价值。方法研究采用多中心病例-对照设计,连续收集首次确诊且未经治疗的HCC患者样本、良性肝病患者样本和干扰性样本进行Elecsys PIVKA-Ⅱ与甲胎蛋白(AFP)检测,并对受试者的多项临床信息进行汇总分析。计算特定阳性截断值下PIVKA-Ⅱ(21.29 ng/ml)和AFP(400 ng/ml)用于HCC诊断的效能。采用Kruskal-Wallis检验或受试者操作特征曲线进行统计学分析。结果最终在5家中心共纳入448例受试者,其中包括185例HCC病例。以良性肝病组为对照组时,PIVKA-Ⅱ的诊断灵敏度和准确率均高于AFP:84.86%对比30.81%和89.01%对比63.66%,而特异度略低。敏感性分析显示在该特定阳性截断值下,PIVKA-Ⅱ的临床性能在AFP阴性受试者亚组、不同病因亚组及多个巴塞罗那癌症分期的HCC患者亚组(含早期HCC)中的灵敏度均>80%。同时,PIVKA-Ⅱ的受试者操作特征曲线下面积亦略高于AFP(0.9200对比0.8809)。结论Elecsys PIVKA-Ⅱ在中国人群中的临床性能良好且稳定,有潜力改善临床AFP阴性HCC诊断和早期HCC监测中的漏诊现状以进一步提升中国人群HCC精准辅助诊断效率。

摘要：本共识围绕医学物理学科的教育现状、专业方向建设、课程设计、实习要求及研究生毕业标准等方面探讨了中国医学物理学科的建设与发展,以应对社会对健康与医疗服务需求的增长及医疗设备国产化的挑战。目前,中国医学物理教育面临教育途径多样性、课程设计差异性、师资短缺等问题,在此,讨论了整合国际经验,构建全面、规范化的医学物理学科体系的策略,体系涵盖放射治疗物理、医学影像物理、核医学物理、放射防护物理、放射生物物理及放射工程物理等方向,并强调人工智能技术的融合,以提高诊疗的准确性和效率。此外,还探讨了医学物理研究生教育的改进,包括师资和教学环境建设、专业课程设置等;还需建立教学质量评估机构,确保教育内容与国际标准一致,反馈学生和雇主的需求。本共识提倡全面提升医学物理学科的规模和影响力,提升教育质量和专业水平,实现教育的精细化和精英化,并加强国内外合作,以期达到国际先进水平,支撑“健康中国2030”政策目标。

摘要：通过构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-Ⅴ)的小片段发夹状RNA(shRNA)干扰表达质粒,研究了shRNA表达质粒沉默GnT-Ⅴ基因后对LoVo细胞增殖、黏附以及迁移、侵袭能力的影响.设计了靶向GnT-Ⅴ基因的小干扰RNA(siRNA)靶序列,构建shRNA表达载体并转染人结肠癌LoVo细胞,通过G418筛选建立稳定低表达GnT-Ⅴ基因的细胞株.分别采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测shRNA对GnT-Ⅴ基因mRNA及蛋白质表达的影响.并通过CCK-8增殖实验、异质黏附实验、划痕愈合实验、趋化运动实验、细胞侵袭实验评价pGPU6/GFP/Neo GnT-ⅤshRNA对人结肠癌LoVo细胞增殖、黏附以及迁移、侵袭能力的影响.实验成功地构建了GnT-Ⅴ shRNA表达质粒,并且该质粒明显下调GnT-Ⅴ的表达,LoVo GnT-Ⅴ/1564和LoVo GnT-Ⅴ/2224的mRNA水平的抑制率分别为82%和71.5%,蛋白质水平的抑制率分别为68%和56%.选择干扰效率较高的LoVo GnT-Ⅴ/1564进行进一步实验.CCK-8增殖实验显示,与阴性对照组相比,LoVo GnT-Ⅴ/1564的增殖受到明显抑制(P<0.001),尤以72h为著;下调GnT-Ⅴ表达可增强LoVo细胞的黏附能力(t=-3.357,P<0.01),而显著抑制LoVo细胞的趋化运动能力(t=44.051,P<0.001);划痕实验结果也显示抑制GnT-Ⅴ表达延长LoVo细胞的愈合时间;用Matrigel胶介导的细胞侵袭实验结果显示,LoVo GnT-Ⅴ/1564和LoVo GnT-Ⅴ/NC的穿膜细胞数分别为(5.10±1.25)个和(39.55±2.16)个,GnT-Ⅴ/1564组较阴性对照组明显减少(t=61.626,P<0.001).结果表明,靶向GnT-Ⅴ的shRNA真核表达质粒可以显著降低GnT-Ⅴ的表达,从而抑制LoVo细胞的增殖、迁移和侵袭能力,因此,该GnT-Ⅴ的siRNA序列可能成为治疗结直肠癌的有效靶点.

摘要：目的设计和克隆所有EB病毒(EBV)已知和预计的编码基因作为cDNA探针用于构建EBV微阵列,以促进研究EBV在其相关疾病中的发病学作用.方法cDNA探针首先由Oligo6.0,Blast和Primer Primier软件设计和筛选全 EBV基因组探针,它们的长度被定在300～600 mer并且具有高度特异性.从B95-8细胞和NPC组织的基因组DNA和 RNA中,通过PCR和RT-PCR方法扩增这些探针,之后克隆入T/A克隆载体.所有的探针被测序鉴定.结果除LF1和LF3基因在B95-8细胞的EBV基因组中不存在外,其余85个基因片段(BWRFl基因有7个重复阅读框架)和两个EBERs基因被成功克隆.结论EBV cDNA探针的设计和克隆为制备EBV微阵列和进一步研究EBV基因组在其相关疾病中的作用奠定了基础.

摘要：目的研制人类免疫缺陷病毒(HIV)快速筛查的寡核苷酸芯片并初步应用于临床。方法以HIV2个基因型(包括9个亚型)的32株典型性代表株和HIV2特有的vpx序列的保守序列为靶序列,设计长寡核苷酸探针,并制备成Oligo芯片。样品经随机特异性引物PCR标记后与芯片杂交,PCR产物同时进行测序分析。结果1例HIV患者芯片杂交结果阳性,20名健康对照血清均为阴性。阳性标本的序列分析表明,芯片杂交结果符合测序的分型结果。结论此芯片可初步用于检测血清HIVRNA,并对HIV基因(亚)型进行分析。

摘要：目的探讨Polo样激酶I（PLK1）基因对胶质瘤细胞增殖的影响和可能机制。方法根据PLKl基因特点，设计并用化学方法合成了5个小干扰核糖核酸分子（siRNA）（P1、P2、P3、P4和P51。以这5个siRNA转染人胶质瘤TJ905细胞后，分别采用荧光实时定量RT—PCR和Westernblot检测儿KJmRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和Westernblot方法检测癌细胞增殖和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白水平，用TRAP—ELISA方法检测胶质瘤细胞端粒酶活性。结果所设计的5个siRNA均能明显抑制胶质瘤TJ905细胞PLKImRNA水平，以P4效果最好。以P4转染处理胶质瘤细胞后与脂质体对照组比较，PLKI基因mRNA水平和蛋白水平明显下调．差异有统计学意义（P均=0．000）。MTT结果显示，与脂质体对照组比较P4siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制．且呈浓度依赖性（r=0．868，P=0．000）。Western blot结果显示，与脂质体对照组比较P4siRNA转染组PCNA蛋白水平明显下降，差异有统计学意义（F=181．36，P=0．000）。***结果显示，与脂质体对照组比较P4siRNA转染组胶质瘤细胞端粒酶活性明显受到抑制，且呈浓度和时间依赖性（p=0．000）。结论PLKI基因对胶质瘤细胞增殖具有重要的调控作用：以PLKI siRNA转染处理胶质瘤细胞，可明显抑制胶质瘤细胞的恶性增殖，其机制可能与抑制端粒酶活性有关。

摘要：目的研制快速筛查诊断HIV病毒的Oligo芯片。方法以HIV-1B亚型U26942全基因组序列为靶序列,利用DNA Club、Oligo 6.0、BLAST、Alignment等生物信息学软件,设计高度特异、长度均一、具近似熔解温度(Tm)的Oligo 探针,并制备成Oligo芯片。B(U26942)、C(U46016)、F(AF075703)、G(AF061640)四种亚型质粒分别经RD-梯度PCR与随机特异性引物PCR,经荧光标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果与结论获得22条60 mer 探针,Oligo芯片特异性、敏感性及稳定性好,为进一步应用提供了条件。

摘要：目的　优化长寡核苷酸芯片方阵的构建。方法　采用4种不同玻片表面,4种点样液溶解经设计高度特异性探针,制备长寡核苷酸芯片。样品经RD -梯度PCR扩增标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果　点样液3×SSC与丙烯酰胺聚合物表面(国产玻片)联合使用杂交效果最佳。结论　该研究优化了长寡核苷酸芯片微阵列的构建,为芯片的下游技术发展提供支持。

摘要：1文献来源,Benbow JH,Rivera DR,Lund JL,et *** inclusiveness of patient-centric clinical evidence generation in oncology:real-world data and clinical trials[J].Am Soc Clin Oncol Educ Book,2022,42:1-11.2背景,随着肿瘤基础研究探索、相关诊断技术及治疗方案的快速涌现,越发凸显了临床试验设计的必要性。当前,药物开发过程成本过于高昂,超过80%的试验未能达到招募目标。试验设计的方法越来越繁琐,并且在意向性治疗患者群体中缺乏真实世界研究的实际应用。

摘要：目的构建pSUPERIOR-A20可调控性载体,检测其在肝转移亚系中表达的可调控性。方法通过基因芯片筛选出鼻咽癌肝转移相关基因,结合文献调研获得头颈部癌转移标签基因,并通过荧光定量PCR检测发现A20可能在鼻咽癌肝转移过程中发挥了重要作用。在线设计A20特异性干扰片段,选择相应酶切位点后将其插入pSUPERIOR质粒中,应用酶切鉴定和序列分析方法验证所构建载体的正确性。将pSUPERIOR质粒和Tet-on质粒共转染肝转移亚系5-8F-H3,PCR检测A20的表达。结果Real-time PCR检测A20在肝转移亚系5-8F-H3中的表达显著上调,结果具有统计学意义(P=0.005)。且成功构建了pSUPERIOR-A20载体,与Tet-on质粒共转染5-8F-H3后经嘌呤霉素筛选克隆,经荧光定量PCR检测阳性克隆A20基因的表达显著下调。结论成功构建pSUPERIOR-A20载体,并可有效干扰鼻咽癌肝转移亚系5-8F-H3中A20基因的表达,为进一步研究A20在鼻咽癌肝转移中的作用奠定了良好的基础。