摘要：目的:在获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)抗独特型纳米抗体的前期基础上,将纳米抗体作为酶标抗原的替代物,应用于荧光定量免疫聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系,实现DON的高灵敏、绿色免疫分析。方法:将特异性结合DON抗体的噬菌体展示纳米抗体(P-28)作为竞争抗原,以编码P-28纳米抗体的DNA为靶标,设计特异性PCR扩增引物,优化荧光定量免疫PCR退火温度、抗DON抗体浓度、P-28投入量等参数,建立基于间接竞争模式的荧光定量免疫PCR检测DON的方法。结果:本研究建立的荧光定量免疫PCR方法线性检测范围为0.1～1 000 ng/mL,IC50值为(3.96±2.21)ng/mL,最低检出限为0.048 ng/mL,并与其他真菌毒素无交叉反应。结论:该方法直接使用噬菌体展示纳米抗体作为竞争抗原的替代物,应用于免疫PCR体系,避免了使用传统的化学合成酶标抗原所带来的环境污染、操作毒性等缺陷,并具有良好的特异性及灵敏度。

摘要：利用SAS软件中的二水平设计和响应面分析法,对发酵生产-γ氨基丁酸(GABA)的培养基进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基,采用Plackett-Burman(PB)设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价并筛选出了有显著效应的葡萄糖、碳氮比及MnSO4.H2O浓度,其他因素对GABA产量的影响不显著。然后用Box-Behnken设计及响应面分析确定了主要影响因素的最佳条件,在优化的培养基中,GABA的产量达到6.02g/L,比优化前的4.35g/L提高了38%。

摘要：前列腺增生(BPH)是一种多发病,常见病.目前普遍认为它具有雄性激素依赖性,所以目前主要采取的造模方法是注射睾酮法.但文献报道雄性激素的剂量及用药时间相差甚大[1～3],给动物造模和研制新药带来一些不确定因素.

摘要：以棉籽蛋白为原料,采用枯草芽孢杆菌NCT314发酵制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽。首先从温度、时间、pH和接种量4个方面研究了制备棉籽蛋白ACE抑制肽的单因素条件;然后在单因素试验的基础上,运用Box-Behnken的中心组合试验设计原理,采用响应面分析,对发酵条件进行了优化。优化后的发酵条件为温度32.08℃、时间22.6 h、pH为7.2,在该条件下,发酵液的ACE抑制率最高可达78.06%,IC50值达6.67 mg/mL.

摘要：在Plackett-Burman试验设计结果基础上,采用Box-Behnken设计实验、响应曲面法(Responsesurfacemethodology,RSM)分析,对影响黄曲霉AS3.4408最适产黄曲霉毒素的关键培养条件温度、装液量和培养时间进行了探讨。结果表明,在培养温度为27～29℃、装液量为55～65mL、培养时间为7～10d条件下,每毫升发酵液可获得>500ng黄曲霉毒素;通过对毒素曲面方程和二次多项回归方程解逆矩阵得知在培养温度、装液量和时间分别为27℃、64.5mL和9d时,黄曲霉AS3.4408产黄曲霉毒素的最大预测值为606ng/mL发酵液,验证试验证实了该方程的预测值与实际值之间具有较好的拟合度。

摘要：为使茶花粉孢子内营养物质能够得到充分释放,采用行星球磨机对茶花粉进行了超微化破壁试验研究。采用Box-Benken试验设计法考察了球料质量比、球磨转速、球磨时间三个工艺参数在不同水平上与破壁率之间的关系,通过响应曲面分析法优化计算得到茶花粉超微化破壁的最佳工艺参数范围为:转速520～590r/min,粉碎时间36～38min,球料比6.8～7(m/m),此时花粉破壁率达100%,为花粉的实际有效利用提供实验数据。

摘要：本文采用单因素实验和正交实验设计，对藜蒿总黄酮的乙醇提取工艺和水提工艺分别进行了系统考察。结果发现，以总黄酮得率作为考察指标，藜蒿总黄酮的乙醇最佳提取工艺条件为：70℃用20倍量45％乙醇提取2次，每次1．75h。藜蒿总黄酮的最佳水提工艺条件为：95℃用25倍量的水提取2次，每次1．5h。醇提法0．412％的得率比水提法得率0．372％略高。

摘要：黄酮类化合物是一种具有广泛生物活性的多酚物质,其显著的抗氧化活性常被应用于食品保健和医疗等方面。为从化学反应活性层面研究黄酮类化合物的构效关系。以柚皮素、柚皮苷、橙皮素及橙皮苷4种黄酮类分子作为研究对象,使用量子化学密度泛函DFT方法 B3LYP和6-31g(d,p)基组计算得出4种分子的原子电荷分布情况、分子前线轨道分布(HOMO&LUMO)、能级差△E,以及各羟基位O-H键解离焓△BDE等理论参数,同时实测4种化合物对DPPH自由基的清除活性。结果表明,前线分子轨道能级差能有效的表征4种黄酮类清除自由能力的活性顺序,各羟基位O-H键解离焓BDE则能有效表征同一分子中各羟基位O-H的活性顺序,柚皮苷及其糖苷(柚皮素)与橙皮苷及其糖苷(橙皮素)抗氧化活性最大的位点分别为4’-OH、5’-OH基团。通过计算所得理论数据预测的黄酮类化合物清除自由基活性与实验测定结果一致,提示今后可利用理论计算方法对高活性的黄酮类化合物进行高通量筛选和分子结构设计。

摘要：真菌毒素是一类由丝状真菌产生的强毒性次级代谢产物,可广泛污染各种农作物及食品。由于痕量真菌毒素即可严重危害人体健康,且食品样品基质复杂,致使食品中真菌毒素的净化富集及检测流程繁琐、耗时费力且成本较高。因此,建立灵敏、简便、稳定的食品基质中真菌毒素的检测方法尤为重要。分子印迹聚合物具有构效可设计性、专一识别性和高稳定性等特点,将其应用于食品样品前处理及食品中痕量有害物质的检测可有效简化操作流程、降低成本并提高检测灵敏度。该文综述了近年来分子印迹聚合物在含真菌毒素食品样品前处理、真菌毒素色谱分析、真菌毒素仿生传感器等领域的应用及制备方法进展,并对其发展前景进行了展望。

摘要：根据已报道的真菌乳清苷-5′-磷酸脱羧酶(pyrG)氨基酸序列,采用CODEHOP策略设计简并引物,从橙色红曲菌(Monascus aurantiacus)的基因组DNA中克隆得到pyrG基因片段。然后运用PCR法筛选橙色红曲菌Fosmid文库,获得了pyrG基因全长(GenBank登录号:GU723506)。经过blastx比较发现,橙色红曲菌pyrG基因与AspergillusflavusNRRL3357的氨基酸序列同源性最高,达到81%。该基因能够作为筛选标记应用于橙色红曲菌同源转化系统。