摘要：目的探究N 6-甲基腺苷(m 6A)去甲基化酶ALKBH5对紫外线诱导的晶状体上皮细胞(LEC)氧化损伤模型中DNA损伤修复的影响。方法运用qRT-PCR和免疫印迹实验检测年龄相关性白内障(ARC)患者和对照组晶状体前囊膜上皮细胞中ALKBH5的mRNA和蛋白的表达。通过紫外线B(UVB)构建晶状体上皮细胞株SRA01/04细胞氧化损伤模型和靶向ALKBH5设计小干扰RNA(siRNA)转染构建敲降模型,运用qRT-PCR和免疫印迹实验检测氧化损伤模型和敲降模型中ALKBH5的mRNA和蛋白表达。运用CCK-8法检测Control组、UVB组、UVB+siNC组和UVB+siALKBH5#3组中SRA01/04细胞活力变化。免疫荧光染色检测UVB+siNC组和UVB+siALKBH5#3组中15A3的荧光强度变化。运用qRT-PCR检测转染对照siNC组和转染siALKBH5#3组中11个DNA氧化损伤修复基因(ODRGs)的mRNA表达变化。结果在ARC患者的晶状体前囊膜上皮细胞中,ALKBH5的mRNA和蛋白表达水平均显著升高。在UVB以时间梯度诱导SRA01/04的细胞氧化损伤模型中,ALKBH5的mRNA和蛋白表达水平均呈上升后下降趋势,其中UVB照射10 min后ALKBH5 mRNA和蛋白表达升高最为显著。ALKBH5敲降效率结果显示,与转染对照siNC组相比,转染靶向ALKBH5的siRNA后,ALKBH5的mRNA和蛋白表达均显著下降。CCK-8法检测结果显示,与UVB+siNC组相比,UVB+siALKBH5#3组SRA01/04细胞活力明显降低。免疫荧光染色检测结果显示,与UVB+siNC组相比,UVB+siALKBH5#3组SRA01/04细胞内DNA氧化损伤指标15A3染色显著增加。同时,与转染对照siNC组相比,转染ALKBH5#3组SRA01/04细胞的ODRGs中,TREX1、FANCD2、LIG1、MSH2、MSH3、RPA2、SMUG1、XRCC6 mRNA的表达均显著上升,DCLRE1A mRNA的表达显著下降,MGMT和MRE11A mRNA的表达则未见明显差异。结论m 6A去甲基化酶ALKBH5在UVB诱导的LEC氧化损伤模型中诱导性表达上升,敲降ALKBH5可促进LEC内大部分ODRGs表达升高,参与调控LEC内损伤DNA的修复,阻止ARC的发生。

摘要：目的探讨碱基切除修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)对紫外线(UVB)诱导晶状体上皮细胞损伤(LEC)的保护作用。方法通过UVB照射人LEC(SRA01/04细胞株)诱导细胞氧化损伤模型,利用siRNA敲降技术针对靶基因OGG1设计3个siRNA(分别为siOGG1#1、siOGG1#2和siOGG1#3)。同时,为了验证出敲降效率最高的siOGG1,依据转染情况将细胞分为siOGG1#1组、siOGG1#2组、siOGG1#3组、siNC组和空白对照组(不转染)。后续为了验证OGG1的表达下调对氧化损伤环境下细胞的作用,将细胞分为空白对照组、UVB组、UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组,观察各组细胞凋亡相关蛋白的表达变化。采用实时荧光定量-PCR检测各组细胞目的基因mRNA的表达,免疫印迹实验检测各组细胞相关蛋白的表达。免疫荧光法检测UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组中受损DNA的标记物15A3的荧光强度变化。采用免疫荧光法检测细胞DNA氧化损伤情况,CCK8实验检测细胞活力。结果实时荧光定量-PCR检测结果显示UVB照射时间为10 min时,OGG1的相对表达量最高;免疫印迹实验检测结果显示随着UVB照射时间的延长,细胞内OGG1蛋白相对表达量呈时间依赖性下降。因此,细胞氧化损伤模型采用UVB照射10 min处理细胞。实时荧光定量-PCR检测结果显示与siNC组相比,靶向设计的转染siOGG1组的三个亚组中细胞OGG1 mRNA相对表达量均显著降低(均为P<0.001),siOGG1#2组降低最为明显。免疫荧光染色结果显示与UVB+siNC组相比,UVB+siOGG1#2组15A3(染色反应底物是8-oxoG,它是OGG1的修复作用靶点)染色阳性细胞明显增多。CCK8实验结果显示与UVB+siNC组和空白对照组相比,UVB+siOGG1#2组细胞活力均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。免疫印迹实验检测结果显示与UVB+siNC组相比,转染后UVB+siOGG1#2组细胞促进凋亡的蛋白BAX表达明显增加,而抑制凋亡的蛋白BCL-2表达则明显下降(均为P<0.001)。结论OGG1基因在UVB诱导的LEC氧化损伤模型中通过BER通路参与受损DNA的修复过程,调控LEC内受损DNA的修复和细胞凋亡过程。

摘要：目的探讨糖尿病患者患糖尿病视网膜病变(DR)的危险因素及胰岛素的使用在糖化血红蛋白(HbA1c)与DR关系中的中介效应。方法横断面研究。采取随机数字表法进行随机整群抽样,抽取江苏省阜宁县疾病预防控制中心登记的50岁及以上的2型糖尿病患者群共计84个抽样点(其中2个为预试验点),进行问卷调查和生化检查,了解受检者的一般情况、全身疾病史、胰岛素使用情况以及糖化血红蛋白浓度等,眼部检查包括眼前节和眼底检查。根据眼底是否有出血点、硬性渗出、棉絮斑、新生血管、视网膜前或玻璃体积血等采用成组病例对照研究设计将受检者分为有DR和无DR两组,通过单因素和多因素Logistic回归分析,筛选出DR的影响因素,采用比值比(OR)及其95%置信区间(CI)描述关联强度。利用Karlson-Holm-Breen分析方法进行中介效应分析。结果共检录了2067例糖尿病患者,实际接受调查1965例,最终纳入统计分析1802例,应答率为87.2%,其中DR患者660例,检出率为36.63%。多因素分析结果显示,糖尿病病程(OR=1.166,95%CI:1.138~1.196)、糖尿病家族史(OR=1.325,95%CI:1.001~1.755)、使用胰岛素治疗(OR=1.995,95%CI:1.434~2.777)、HbA1c水平(OR=1.513,95%CI:1.189~1.925)和饮酒(OR=0.712,95%CI:0.514~0.985)是DR的独立影响因素。使用胰岛素的中介作用占HbA1c水平对DR总效应的13.67%(P<0.001)。结论糖尿病患者发生DR的危险因素是胰岛素治疗史、糖尿病病程长、糖尿病家族史、饮酒和HbA1c水平高,其中使用胰岛素会使得HbA1c水平对DR的影响增加,对DR具有部分中介效应。

摘要：分子流行病学是疾病研究中将流行病学和分子生物学相结合的一个流行病学新分支，它主要是在基因、蛋白质水平上寻找生物学标志与疾病发生发展的关系，从而评估疾病的发生倾向、判定疾病的分布与暴露。眼病分子流行病学研究可以在传统流行病学调查的人群中，选择描述性眼病调查、病例对照研究、巢式病例对照研究、队列研究等设计，应用单核苷酸多态性、基因拷贝数多态性、生物芯片（微阵列）、microRNA、表观遗传学、DNA测序等分子生物学技术，测定体液及眼组织内的核酸、蛋白质、脂质及其代谢产物，从而探讨年龄相关性白内障、年龄相关性黄斑变性、青光眼和糖尿病视网膜病变等复合性眼病的病因、发病机制、易感性及防治措施，为眼病的诊断和治疗带来新的突破。

摘要：目的分析角膜后表面散光(PA)在年龄相关性白内障合并高度角膜散光人群中的分布规律,评估模拟角膜曲率计散光(KA)和总角膜散光(TCA)对散光型人工晶状体(Toric IOL)计算的影响。方法采用系列病例观察研究设计,纳入2016年8月至2017年4月在南通大学附属医院眼科就诊的KA>0.75D的年龄相关性白内障患者181例200眼。所有患者术前均行Petacam检查,记录KA、PA、TCA和角膜前表面散光(AA),统计PA散光度数和轴位的分布。根据AA轴向分为顺规散光组、逆规散光组和斜轴散光组,采用Pearson线性相关分析检测各组PA与AA间各矢量分解值以及KA与TCA间各矢量分解值的相关性,采用配对t检验法分析KA与TCA间各矢量分解值差异性。分析KA、TCA分别计算所得Toric IOL型号和轴向的差异。结果所有散光患者PA矢量平均值为-0.32D×93.1°,其中PA>0.5D者22眼,占11%,PA为逆规散光者163眼,占81.5%。所有散光患者中PA与AA间矢量分解值KP(0)和KP(45)均呈弱相关(r=0.480,PTCA者53眼,占69.7%;逆规散光组KA和TCA的矢量平均值分别为1.30D×153.4°和1.71D×154.4°,KA<TCA者82眼,占87.3%;斜轴散光组KA和TCA的矢量平均值分别为1.13D×122.0°和1.24D×124.2°,KA<TCA者20眼,占66.7%。各不同散光类型组患者KA与TCA的KP(0)比较,差异均有统计学意义(均P≤0.001)。分别用KA和TCA计算Toric IOL的型号及放置的轴位,其中两种方式计算Toric IOL型号不一致者占42.5%,计算轴位不一致者占88.2%。结论在高度角膜散光患者中,PA多为逆规散光,忽略PA将会使部分患者Toric IOL型号的选择和轴位放置产生偏差,对于无法测量PA或TCA的患者,应适当调整ToricIOL型号。

摘要：目的探讨无防腐剂的1％利多卡因对年龄相关性白内障（ARC）患者晶状体上皮细胞（LEC）的作用及其作用机制。方法自身配对设计。收集75例（82只眼）ARC患者的晶状体前囊膜，其中男性40例（44只眼），女性35例（38只眼）；年龄41～85岁，平均67．97岁；皮质性自内障34只眼，核性22只眼，后囊膜下性26只眼。对超声乳化白内障吸除术中撕下的82只前囊膜标本分别用1％利多卡因溶液浸泡1min（利多卡因组）或用平衡液（BSS）浸泡1min（BSSⅠ、Ⅱ组）或不加入任何药物处理（对照组），然后行锥虫蓝-茜素红活性染色，显微镜照相，计数LEC及坏死细胞；并通过HE染色及电镜观察LEC的病理及超微结构改变。采用配对设计t检验和单因素方差分析对数据进行统计学分析。结果LEC坏死率对照组和BSSI组分别为（56．19±2．71）％和（57．23±1．98）％，两组间差异无统计学意义（t=2．0693，P=0．0505），利多卡因组和BSSⅡ组分别为（99．86±8．22）％和（57．64±7．00）％，二者比较差异有统计学意义（t=27．6781，P=0．0000），但利多卡因组内不同年龄组、不同性别、不同类型白内障患者LEC坏死率差异均无统计学意义（F值分别为0．03、2．37、0．71，P〉0．05）。HE染色显示利多卡因组LEC空泡变性明显，细胞与囊膜间出现空隙，胞核浓缩、碎裂、溶解。对照组和BSS组LEC结构基本正常，仍贴附于囊膜上。电镜下利多卡因组LEC形态不规则，细胞与细胞及细胞与囊膜间的连接崩解断裂，细胞膜内陷，细胞器严重变性，结构破坏，染色质凝聚、边集、裂解，不少细胞皱缩、脱落、消失。结论无防腐剂的1％利多卡因能松解ARC患者LEC间及细胞与囊膜间的连接，并可破坏细胞结构，导致细胞变性、坏死。

摘要：目的探讨原发性闭角型青光眼（PACG）的危险因素。方法采用1：1配对病例对照研究设计。收集2004年2月至2005年6月在南通大学附属医院眼科诊治的192例原发性闭角型青光眼患者，以年龄、性别作为匹配条件，选择有其他眼部疾患的192例患者作为对照组，通过Х^2检验比较PACG病例组与对照组在人群特征、生活行为习惯、既往病史、青光眼家族史及眼底、屈光、眼压、A超等方面的差异。结果单因素分析提示，居住农村（OR=2．40，P=0．000）、高文化程度（OR=0．21，P=0．000）、高经济收入（OR=0．34，P=0．000）、高血压（OR=3．05，P=0．000）、青光眼阳性家族史（OR=5．59，P=0．001）、浅前房（OR=11．25，P=0．000）、大杯盘比（OR=8．81，P=0．000）、近视眼（OR=0．31，P=0．000）、近距离看电视（OR=0．47，P=0．001）是PACG的独立相关因素。多因素条件Logistic回归分析显示，高血压（OR=2．004，P=0．009）、青光眼家族史（OR=6．726，P=0．003）、远视眼（OR=3．192，P=0．031）、浅前房（OR=12．804，P=0．000）、大杯盘比（OR=9．401，P=0．007）等因素与PACG存在关联性。未发现吸烟、饮酒、近视眼、糖尿病、血型等因素与PACG存在统计学关联。结论高血压可能与PACG存在关联性，眼科医师应定期随访具有青光眼家族史、浅前房及大杯盘比等特征的青光眼高危人群。

摘要：对南通大学附属医院眼科门诊新开展的3种滴眼液的药物临床试验方案设计及其实施情况、受试者选择、知情同意过程、药物和资料管理等质量控制环节进行回顾。2种药物临床试验得以完成,1种因故暂停。通过试验,摸索出眼科门诊进行药物临床试验工作的新流程和质量控制环节,涵盖试验方案设计、标准操作程序制定及执行、受试者甄选与检查、药物与数据的管理以及申办方监查等方面。良好的方案设计、完善的标准操作规程、专人负责和严格按照临床试验质量管理规范进行是保证眼科门诊进行滴眼液药物临床试验质量的关键。

摘要：目的探讨便携式电脑验光仪的准确性及用其筛查屈光不正的可行性。设计诊断试验。研究对象2008年6月至9月南通大学附属医院眼科就诊的屈光不正患者65例(130眼)。方法对所有病例分别行SHIN-NIPPON SRH-2000便携式电脑验光仪验光及视网膜检影。主要指标屈光值(球镜度数、柱镜度数及轴向)的差异性检验、相关分析及受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果以视网膜检影为金标准,电脑验光的球镜度数轻度偏正,其中睫状肌麻痹后电脑验光与检影的差值为(+0.33±0.56)D,呈高度正相关(r=0.98,P0.95(睫状肌麻痹后为0.984,睫状肌麻痹前为0.979)。结论便携式电脑验光仪筛查屈光不正的准确性与视网膜检影一致,可用在群体眼病流行病学调查中筛查屈光不正。

摘要：目的探讨远视儿童的高阶像差分布、影响因素及对视功能的影响。设计临床病例系列。研究对象44例(81眼)3￣13岁等效球镜+0.50￣+6.63D远视儿童。方法使用Allegretto波阵面像差仪对上述远视儿童进行波阵面像差测量分析。主要指标高阶像差及其分布,高阶主导像差、高阶像差与瞳孔大小、性别和屈光状态的关系,高阶像差与戴镜矫正视力的关系。结果在6.5mm和4.0mm瞳孔直径时,总高阶像差、3阶和4阶像差均方根值(RMSh、RMS3、RMS4)分别为(0.20±0.05)、(0.15±0.06)、(0.10±0.02)μm和(0.09±0.03)、(0.07±0.03)、(0.05±0.02)μm,差异均有统计学意义(P0.05)。RMSh值与戴镜矫正视力无相关性(P>0.05)。性别、球镜、柱镜对RMSh无显著影响(P>0.05)。结论远视儿童高阶像差分布范围宽,部分患儿RMSh值较高;高阶像差各阶及RMSh值随瞳孔增大而增加;远视患儿中高阶主导像差以垂直彗差居多;瞳孔增大时球差、彗差比率增加。(眼科,2006,15:187-190)