摘要：目的观察碘过量对大鼠脑神经元特异性烯醇化酶（NSE）基因表达的影响。方法选用150只断乳1月龄的健康Wistar大鼠，按5×2析因设计分为10组，每组15只。按摄碘量分为正常碘（NI）、5倍碘（5HI）、10倍碘（10HI）、50倍碘（50HI）、100倍碘（100HI）5个水平，饲喂时间为3、6个月。实验期满后，取全部大鼠血样，用放射免疫分析方法测定血清总甲状腺素（TT4）、总三碘甲状腺原氨酸（TT3）、游离甲状腺素（FT4）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、反三碘甲状腺原氨酸（TT3）水平；取大鼠脑组织，采用RT—PCR方法检测脑组织NSE mRNA的表达。结果各碘水平组TT4、TT3变化明显（F值分别为18．867、27．287，P〈0．01），时间和碘水平对TT4存在交互作用（F=2．486，P〈0．05）；100HI组TT4、TT3均低于同时间NI、5HI、10HI、50HI组（P均〈0．01）。血清FT4、FT3、TT3水平，在3、6个月时变化明显（F值分别为4．968、27．046、59．776，P〈0．05或〈0．01），各碘水平组间变化明显（F值分别为33．058、28．420、17．482，P均〈0．01），时间和碘水平对FT3、rT3存在交互作用（F值分别为6．894、5．233，P均〈0．01）；100HI组FT4、FT3、rT3低于同时间其他组（P〈0．01或〈0．05）。各碘水平间NSE mRNA变化明显（F=29．006，P均〈0．05）；3、6个月100HI组大鼠脑中NSE mRNA水平（0．61±0．19、0．61±0.22），与NI（0．73±0．13、0．72±0．26）、5HI（0．72±0．15、0．72±0．16）、10HI（0．73±0．32、0．70±0．13）、50HI（0．71±0．18、0．69±0．31）组比较降低（P均〈0．05）。3、6个月时血清FT3、FT4与NSE mRNA水平均存在相关关系（r值分别为0．987、0．969及0．890、0．910，P均〈0．05）。结论NSE基因的表达对过量碘摄入呈现出耐受性且有一定的阈值；当过量碘摄入为正常100倍时，在转录水平影响NSE基因的表达，表现为抑制NSE mRNA水平；在过量碘引发NSE转录减低的调控中，FT4和FT3可能均起着重要作用。

摘要：目的应用基因芯片技术进行北方汉族人群HLAⅠ、Ⅱ类抗原中分辨度分型研究，建立稳定的HLA检测芯片。方法采用寡核苷酸芯片分型方法，选择了中国人群基因频率较高的等位基因，同时考虑遗传的连锁不平衡，根据HLA-A、HLA-B、HLA-DR、HLA-DQB、HLA-DQA不同基因亚型的独特序列，完成了探针的设计与筛选，共设计了213条探针（HLA-A56条，HLA-B66条，HLA-DQA22条，HLA-DQB38条，HLA-DR31条）制成基因分型芯片。采用带荧光标记的引物，用合适的PCR方法扩增HLAⅠ、Ⅱ类抗原上的多态性区域，产物与芯片上探针杂交。杂交结果经荧光扫描并用特定软件分析判断，以此确定样品基因型。结果所有样本的HLAⅠ、Ⅱ类抗原基因分型均获成功。此中分辨度探针可分出598个Ⅰ类抗原等位基因，511个Ⅰ类抗原等位基因，可捡出Ⅰ类抗原特异性57个，Ⅱ类抗原特异性30个。结论基因芯片用于HLAⅠ、Ⅱ类抗原分型可行。其分辨率高、特异性强，可用于HLA基因分型、骨髓移植、器官移植的HLA配型、与HLA有密切关系的遗传性疾病的人群筛查。

摘要：构建pGEX-3X/大肠杆菌偏嗜性人促甲状腺激素(hTSH)βDNA编码序列原核表达载体,并在***5α中进行表达,用于GD(Graves diease)的实验研究。方法:用大肠杆菌偏嗜性密码子替换已知hTSHβ亚基基因编码序列中相应的密码子,按重新设计后的编码序列进行DNA化学合成,然后克隆入表达载体pGEX-3X并进行酶切电泳、测序鉴定,进而在*** DH5α中进行诱导表达。对所表达的GST融合蛋白进行SDS-PAGE、Western blotting及hTSH电化学发光免疫测定。结果:经鉴定,重组质粒pGEX-3X/hTSHβ含有与预期结果一致的435bp编码hTSHβ链的DNA序列。表达产物为hTSHβ与GST融合蛋白,分子质量约42ku,于SDS-PAGE中的相应部位可见深染的特异性蛋白条带,可被GST抗体识别并可被抗hTSH抗体检测。结论:实验成功建立了hTSHβ肽链的体外表达系统,为进一步制备hTSHAb及进行GD的研究奠定了基础。

摘要：背景:在糖尿病合并有溃疡创面的动物实验中,各种生长因子单药或联合治疗都有报道。但是以纳米微球作为表皮生长因子载体进行糖尿病溃疡愈合的研究作者未检索到。目的:比较重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)纳米微球和rhEGF原液2种不同剂型修复糖尿病大鼠溃疡效果的差异。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-02在卫生部及天津市激素与发育重点实验室完成。材料:rhEGF原液由深圳华生元基因工程有限公司提供[rhEGF含量为1μg(500U)],rhEGF纳米微球[rhEGF含量为1μg(500U)]、空纳米微球由天津医科大学代谢病医院与天津大学材料学院纳米生物技术研究所联合制备,并完成鉴定。方法:88只SD大鼠尾静脉注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,用打孔器制备糖尿病大鼠溃疡模型。随机分为4组:rhEGF纳米微球组24只给予rhEGF纳米微球,rhEGF原液组24只给予rhEGF原液,空微球组24只给予空微球(与rhEGF纳米微球质量相同),PBS溶媒对照组16只给予PBS。各组均于造模后第1天开始用注射器将溶解好的药物均匀的喷洒在创面,待作用5min后用无菌纱布包扎。第1天给液量为0.12mL,以后根据创面愈合情况逐渐减少给液量。主要观察指标:于3,7,14,21d计算创面愈合率。同时取创面肉芽组织,免疫组织化学染色测增殖核细胞抗原阳性表达情况,透射电镜观察成纤维细胞超微结构改变。结果:从第14天开始,rhEGF纳米微球组创面愈合率、增殖核细胞抗原阳性细胞率高于rhEGF原液组(P<0.05,P<0.01)。透射电镜下可见rhEGF纳米微球组成纤维细胞胞质内有大量的内质网,扩张成池状,腔内充满了合成的胶原蛋白。结论:与rhEGF原液比较,rhEGF纳米微球促进溃疡愈合更快。