摘要：目的筛选出能高效抑制骨肉瘤细胞株MG63中人EAG1（hEAG1）基因表达的短发卡RNA（shRNA）。方法根据人EAG1信使RNA（mRNA）的序列，设计合成4对不同的且能干扰hEAG1基因表达的shRNA。利用同源重组技术构建pGeneSil—hEAG1干扰载体，经酶切及测序鉴定后体外转染MG63细胞。采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白印迹法（Westernblot）分别检测hEAG1mRNA和蛋白的表达。结果成功合成4对shRNA。细胞转染结果显示48h后实验组和对照组均有强荧光表达，转染率为70％。pGeneSil—hEAG1—2组的干扰效果最为明显，hEAG1mRNA和蛋白表达较对照组明显下调，与其他组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功筛选出的shRNA可高效阻断hEAG!的表达，可能成为骨肉瘤靶向性治疗的新策略。