摘要：为了提高壳聚糖涂膜的力学性能和降低其透水率,实验先以十二烷基磺酸钠(SDS)活化纳米SiOx,随后将其加到壳聚糖乙酸溶液中,并用流延法制得分散比较均匀的壳聚糖纳米复合膜。此外采用二次回归旋转正交组合试验设计方法,优化了壳聚糖/纳米SiOx(CTS/SiOx)复合涂膜的制备工艺条件,并通过红外(IR)、X射线衍射(XRD)和电镜透射(TEM)手段对CTS/SiOx复合涂膜的性能和结构进行表征。优化结果表明,当壳聚糖(CTS)、活化纳米SiOx和单甘酯(Glyc)添加量分别为1.547g、0.028g和0.015g时,CTS/SiOx复合涂膜的性能达到最优,其拉伸强度和撕裂强度分别为54.85MPa和51.77kN·m-1,分别比未修饰壳聚糖单膜提高了63%和12%,而透水率却下降了73%。将制备的CTS/SiOx复合涂膜用于果蔬室温保鲜,保鲜质量和保鲜时间比对照组均有明显提高。

摘要：针对高温(40℃)和高盐(18%NaCl)逆境设计了最低营养需求全合成培养基,分析了鲁氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)在长期逆境下生长的营养需求差异,重点解析了酵母细胞从生长适应期到对数生长初期阶段有机酸、氨基酸和糖类物质的代谢及基因表达差异。研究结果显示,遭遇高盐压力的鲁氏接合酵母细胞更需要外源氨基酸,而补充维生素和氨基酸有助于缓解酵母细胞的高温压力。鲁氏接合酵母针对高盐和高温逆境采用了差异明显的有机酸、氨基酸和糖代谢策略。MSN4(逆境转录子基因)和HOG1(高渗调控蛋白基因)响应高盐,而HSF1(热激调控蛋白基因)和SOD1(超氧化物歧化酶基因)对高温响应。本研究加深了对耐盐鲁氏接合酵母耐温机制的理解,有助于双抗新能力酿造酵母菌株的研制。

摘要：为克隆表达一株未知芽孢杆菌的角蛋白酶基因,本文对芽孢杆菌属来源的13个角蛋白酶基因进行了分类比对,并设计简并引物,成功筛选出一株未知芽孢杆菌的角蛋白酶基因,在大肠杆菌中克隆表达,最后通过SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)分析和酶活测定验证表达成功,同时还确立重组大肠杆菌BL21(pET-28a-Ker)的最佳诱导温度为20℃,经过0.5 mmol/L IPTG(isopropylthio-galactoside)诱导16 h后,粗酶液中的角蛋白酶酶活达到389.7 U/mL。本文证明了通过多序列比对而设计的角蛋白酶简并引物的有效性,且该方法能够简化角蛋白酶的研究和开发。

摘要：以胶体甲壳素作为产酶诱导物,利用蜡状芽胞杆菌和红球菌共同发酵提高甲壳素脱乙酰酶(chitin deacetylase,CDA)的产量。通过监测2菌株混合发酵时甲壳素酶和CDA酶活力随时间的变化,验证了双菌株协同发酵产脱乙酰酶的作用。在此基础上,采用单因素实验考察两菌株配比、发酵周期、温度、接种量、装液量和摇瓶转速等因素对脱乙酰酶活力的影响,并进一步设计Plackett-Burman(PB)实验、最陡爬坡实验、中心组合设计实验和响应面优化实验,确定适宜2菌株协同发酵的工艺条件。结果显示,2菌株接种量最佳配比为2∶8,最佳产酶培养基组分(g/L):蛋白胨0.25、K_(2)HPO_(4)0.6、MgSO 41.5、酵母浸粉3.0、NaCl 8.5、KH_(2)PO_(4)0.8、胶体甲壳素8.0。优化后菌株产CDA的活力约为优化前的1.96倍,研究结果可为工业化产CDA提供参考。

摘要：以实验室保存的19株酿酒酵母为出发菌株,通过亚硒酸钠抗性筛选、耐硒驯化、硫酸二乙酯诱变、乙硫氨酸抗性筛选,成功得到一株能合成硒代谷胱甘肽的酿酒酵母菌株CMY-15-1,其有机硒含量达到2 663.3μg/g。单因素试验确定CMY-15-1最佳发酵条件,在该条件下筛选出碳源、有机氮源和无机氮源、无机盐等成分,并优化亚硒酸钠添加量。通过Plackett-Burman设计试验筛选出对CMY-15-1产硒代谷胱甘肽显著性影响成分。通过最陡爬坡试验,确定培养基中组分的添加量,由中心复合设计试验得到最佳发酵培养基组成,蛋白胨5.46 g/L、亚硒酸钠205.9 mg/L、氯化铵9.56 g/L、葡萄糖35 g/L、酵母粉8 g/L、磷酸氢二钾0.5 g/L、氯化镁0.5 g/L、氯化钙0.5 g/L,测得硒代谷胱甘肽含量为33.71μg/L,优化后的硒代谷胱甘肽产量是优化前的3.94倍左右。

摘要：试验采用响应面法对囊酵母(Zygoascus sp.)XHV25液体发酵产果胶酶的培养基组分进行优化。在前期运用单因素试验优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出培养基组分中影响果胶酶活力的2个显著性因素:橙子皮粉和K_2HPO_4·3H_2O。运用单因素试验研究PB试验设计筛选出的不显著因素的最低添加量来降低生产成本;运用最陡爬坡试验研究PB试验设计筛选出的显著因素以找到中心复合试验的中心点。利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。最终得到的预测最佳培养基组分为:橙子皮粉31.2 g/L、蛋白胨1 g/L、牛肉膏3 g/L、K_2HPO_4·3H_2O 0.094 g/L、KH_2PO_4 0.5 g/L、CaCl_2 0.5 g/L,在此预测最佳培养基组分下得到的果胶酶活力为28.97 U/mL。在预测最优培养基组合下进行发酵验证性试验,得到果胶酶活力的平均值为29.02 U/mL。实测值与预测值吻合良好,由此可见该模型可较好地预测发酵后的果胶酶活力。

摘要：研究采用响应面法对路氏肠杆菌(Enterobacter ludwigii MY271)液体发酵产β-甘露聚糖酶的培养基进行优化。在前期单因素试验对培养条件及培养基优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产酶的3个显著性因素:魔芋粉、Na2HPO4和Mg SO4。在此基础上,运用最陡爬坡试验找到中心复合试验的中心点,然后研究不显著因素的最低添加量来降低生产成本,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明,魔芋粉14 g/l、蛋白胨18 g/l、Na2HPO4 0.7 g/l、KH2PO4 0.5 g/l、Zn SO4 0.15 g/l、Mg SO4 0.01 g/l,β-甘露聚糖酶酶活可达到62.76 U/ml,与模型预测值相近,且与单因素优化后的酶活(30.02 U/ml)相比,提高了109.06%。通过响应面法优化培养基组分,酶活得到了显著提高,为该酶制剂的大规模生产奠定了基础。

摘要：研究采用响应面法对假单胞菌HFE733产脂肪酶的发酵培养基进行了优化。在前期运用单因素试验优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出培养基组分中影响脂肪酶活力的2个显著性因素:酵母膏和橄榄油。运用单因素试验研究非显著因素的最低添加量来降低生产成本,然后运用最陡爬坡试验找到中心复合试验的中心点,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明:最佳培养基组分为酵母膏34g/L、橄榄油5.92 mL/L、蔗糖12.5g/L、CuSO_4·5H_2O 0.4g/L、MnSO_4·H_2O 0.2g/L,在此条件下脂肪酶酶活可达到9.27U/mL,与模型预测值相近,且与单因素优化后的酶活(4.53U/mL)相比,提高了104.64%。

摘要：黄曲霉毒素主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌在生长繁殖过程中产生的有毒次级代谢产物。其具有极强的毒性、致癌性和致突变性并且广泛存在于食品、饲料、农副产品中,对人类和动物产生了极大的危害。试验在前期研究的基础上通过Plackett-Burman试验设计和中心复合设计对HSD8(Sinomonas sp.)菌株的发酵培养基进行优化,最终确定其发酵培养基为:糖蜜3 g/L,柠檬酸氢二铵10 g/L,磷酸二氢钾2 g/L,三水合磷酸氢二钾0.4 g/L,氯化钠4.5 g/L,一水合硫酸镁0.6 g/L,氯化钙0.6 g/L,硫酸镁2.16 g/L,香豆素0.17 g/L。通过对模型验证试验,黄曲霉毒素B_1降解酶酶活达736 U/mL,比优化前提高了25.54%。试验对菌株HSD8在生物降解黄曲霉毒素B_1方面具有指导意义,值得进一步研究开发。

摘要：本研究采用响应面法对异硫链霉菌LMZM产木聚糖酶的发酵培养基进行优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产酶的4个显著性因素:玉米芯粉、大豆粉、酵母粉和MgSO——4。在此基础上,研究不显著因素的最低添加量来降低生产成本,然后运用最陡爬坡法逼近最大响应值区域,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明,玉米芯粉27.85 g/L、大豆粉16.25 g/L、酵母粉3.46 g/L、MgSO_41.18 g/L、K_2HPO_40.60 g/L、Na_2HPO_40.40 g/L,木聚糖酶最大理论酶活可达117.80 U/m L,经3次平行实验验证,实际酶活平均值为116.63 U/m L与预测酶活相近,且比优化之前的酶活提高了1.28倍。