摘要：为了探讨Cyr61的生物学功能,该研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Cyr61敲低的HEK293T稳定细胞株,并在体外研究Cyr61对HEK293T细胞增殖和凋亡的影响。根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,应用http://***/在线设计3条Cyr61的导向RNA(guide RNA,gRNA),用LentiCRISPRv2作为载体构建LentiCRISPRv2-gRNA重组质粒并转化至感受态的Stbl3菌体中,经筛选后包装成Cyr61 CRISPR/Cas9 KO质粒,利用Cyr61 CRISPR/Cas9 KO质粒和HDR质粒转染HEK293T细胞,加入嘌呤霉素(8μg/mL)进行筛选,通过实时荧光定量PCR技术及蛋白质免疫印迹(Western blot)鉴定出HEK293T敲低Cyr61细胞株;常规培养细胞,利用细胞计数检测试剂盒(CCK8)检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况。该研究成功构建出Cyr61敲低HEK293T细胞株,与对照组相比,Cyr61敲低细胞株的增殖明显升高(P<0.05),凋亡率明显减少(P<0.05)。通过CRISPR/Cas9基因编辑系统成功构建Cyr61敲低HEK293T稳定细胞株,为研究Cyr61基因提供了有效的工具。

摘要：研究在不同的实验条件下,芒果核仁中芒果多酚的微波提取率,确定最佳提取提取工艺。采用单因素试验、正交试验方法,以微波提取法提取红象牙核仁的芒果多酚,确定红象牙核仁芒果多酚的最佳提取工艺条件。影响芒果多酚提取工艺因素次序为:提取温度>料液比>乙醇浓度>提取时间。最佳工艺为:70%乙醇,料液比(g∶m L)1:15,微波提取温度60℃,提取时间60 s。优化出的微波提取工艺条件稳定、可行。

摘要：医用化学混合式教学以线上教学资源为基础,教师根据实际情况设计教学目标、教学内容、教学方法、教学评价,按课前、课中、课后三个教学环节实施教学,以学生为中心,以医用为原则,引导学生归纳总结,提高综合创新能力,在学习过程中将知识、能力、素质融合,注重培养学生解决复杂实际问题的综合能力和高级医学思维。

摘要：研究牛角瓜中多酚类化合物的提取工艺优化。以牛角瓜中多酚的提取率为指标,在单因素试验的基础上,选取提取温度、提取时间、料液比、乙醇浓度4个因素进行正交试验设计,优化提取条件。各因素对提取率的影响大小依次是:提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比。最佳提取条件:提取温度、提取时间、料液比、乙醇浓度分别为60℃、6min、1∶35(g·mL-1)、60%。该方法简单、快速、高效,为牛角瓜中多酚的提取研究提供一定的参考依据。

摘要：目的优化鸡骨草中生物碱的提取工艺,建立相思子碱、下箴刺桐碱的超高效液相色谱（UHPLC）测定方法。方法 以相思子碱、下箴刺桐碱的提取量为指标,采用正交试验设计考察乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数对提取工艺的影响;色谱条件：Shim-pack XR-ODSⅡ色谱柱（2.0 mm×75 mm,2.2μm）;流动相：甲醇-乙腈-水-乙酸-三乙胺（6∶2∶92∶0.2∶0.3）;检测波长280 nm;流速0.4 mL/min;进样量2μL;柱温30℃。结果 最佳提取条件为加10倍量45%乙醇,提取时间40 min,超声提取2次;相思子碱和下箴刺桐碱分别在1.49-148.80μg/mL（r=0.9998）,0.84-84.20μg/mL（r=0.9998）范围内有良好的线性关系,加样回收率为98.9%、98.2%,RSD均〈2%。结论 本提取方法简单、快速、效率高;测定方法准确、高效;不同产地鸡骨草中相思子碱、下箴刺桐碱含量差异明显,以根部含量最多,其次为茎部,最少的部位是叶子。为鸡骨草药材的有效开发利用和质量控制提供了参考依据。