摘要：抗菌肽有望替代抗生素成为一种安全、绿色、高效的理想抗菌剂,牛乳铁蛋白肽(bovine lactoferricin,LFcinB)是由牛乳铁蛋白经消化酶水解产生的一类具有广谱抑菌活性的短肽。文章以牛乳铁蛋白肽为基础,根据抗菌肽结构与功能的关系,对LFcinB的结构进行优化设计得到衍生肽LFcinB-W。将设计得到的LFcinB-W基因片段与pPIC9K质粒构建重组表达载体,转化毕赤酵母细胞GS115诱导表达。对发酵上清液进行分离纯化和活性测试,结果证明该衍生肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有更强的抑菌活性;利用病原体Erwinia carotovora carotovora 15(Ecc15)感染模式生物果蝇肠道,进一步探究LFcinB-W对感染模型的保护作用,结果显示LFcinB-W可有效缓解病原体感染对果蝇造成的损伤,在体内表现出比LFcinB更好的抗感染作用,为进一步研究该肽的生物活性及生产应用提供参考。

摘要：以甘油、米糠油精炼油脚(90%油酸、10%亚油酸)为原料,通过丙酮作为基团保护剂来合成单甘酯。以油酸单甘酯得率为指标,在单因素试验的基础上,利用响应面法来优化合成工艺。结果表明:最佳合成条件为底物摩尔比n(甘油)∶n(丙酮)∶n(油脚)=1∶2∶0.8、催化剂用量为甘油质量的2.5%、缩合温度79℃、缩合反应时间3 h、酯化温度142℃、酯化反应时间3 h。在此条件下,单油酸甘油酯得率可达79.5%。此外通过傅里叶红外光谱仪对产物进行表征,发现该产物为目标产物油酸单甘酯。

摘要：猕猴桃作为雌雄异株植物,其早期性别鉴定对于育种和增加其经济价值有着重要意义。文章通过开发毛花猕猴桃性别相关的简单重复序列(simple sequence repeat, SSR)分子标记,以期能在早期鉴定出毛花猕猴桃雌雄植株,提高毛花猕猴桃资源利用率。利用MISA工具从毛花猕猴桃雌雄基因组的29条染色体筛选获得381 250个SSR位点,并对SSR位点的数量与分布特征进行统计分析。设计合成150对引物,利用毛花猕猴桃基因组DNA作为模板,采用普通聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增的方法以及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离检测方法筛选出具有性别差异扩增片段的SSR引物。其中序号为Primer000181的引物表现为雄性特异。在毛花猕猴桃5个雄株、2个雌株样本中进行验证,其表现均与前文一致。结果表明利用毛花猕猴桃基因组开发性别鉴定相关SSR分子标记具有可行性,并筛选出1对可以鉴定毛花猕猴桃雌雄植株的引物,能够在毛花猕猴桃生长早期可靠、快速地鉴定其性别。

摘要：脱氧核酶是通过体外筛选技术得到的具有催化功能的单链寡核苷酸分子.随着体外筛选技术的发展,越来越多的脱氧核酶被筛选出来.其中,靶向细菌的具有RNA切割作用的脱氧核酶(RNA-cleaving DNAzyme,RCD)同时拥有分子识别和催化RNA裂解的功能,且具有设计灵活、易于制备和修饰、成本低廉等优势,在致病菌检测领域获得了广泛的关注和应用,为致病菌的早期发现和预防提供了全新的分子工具.本文系统总结了RCD在致病菌检测中的研究和应用,并对其面临的问题和未来发展前景进行了展望.

摘要：利用荧光共振能量转移(FRET)纳米探针结合催化发夹组装(CHA)无酶扩增信号放大途径建立了一种可用于转基因成分的荧光检测方法。首先为CaMV35S目标序列(tDNA)设计了可诱导的CHA循环的两个发夹结构序列HP1和HP2。当单链DNA标记碳点(sDNA-CDs)和DNA模板化银纳米团簇(Ts-AgNCs)杂交后,AgNCs和碳量子点(CDs)靠近,形成FRET效应,得到sDNA-CDs/Ts-AgNCs荧光猝灭的比率荧光探针。当tDNA存在时,通过杂交反应打开HP1发夹,形成HP1-tDNA双链结构;该结构可将HP2的发夹结构打开,从而形成HP1-HP2双链结构,同时释放出tDNA进入下一轮杂交,触发CHA循环。由于HP1-HP2中HP1的部分序列与Ts部分序列间的亲和性较sDNA强,因此,加入sDNA-CDs/Ts-AgNCs后,sDNA-CDs从探针中释放,使CDs(λem=464 nm)的荧光得以增强。而AgNCs仍在双链结构中,其荧光强度(λem=560 nm)基本保持不变。以IF464/IF560为检测信号,在最优条件下,该比率荧光传感器对CaMV35S检测的线性范围为0.1~50 nmol/L,检出限(LOD,S/N=3)为0.02 nmol/L。制备的传感器具有良好的选择性,将该传感器用于转基因番茄叶中CaMV35S成分的检测,结果可靠。

摘要：为探究酰胺酶降解阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)的微观机理,采用分子对接分别模拟了阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)或聚丙烯酸酯(PAA)结构模型与Rhodococcus sp.N-771酰胺酶(Rh Amidase)的结合,根据-CDOCKERˍEnergy score值最高的原则,对获得最佳结合构象进行分析.基于亲和力虚拟突变进行丙氨酸(ALA)扫描.亲和力分析表明,Rh Amidase对HPAM-2的亲和力最高、最稳定,而Rh Amidase于PAA-2相互作用最小、结合最好.同时,该酶更倾向于降解短链的聚合物.相互作用分析表明,疏水相互作用是Rh Amidase-HPAM-2比Rh Amidase-PAA-2更稳定的主要原因.通过ALA扫描进一步得知,PHE146、ILE450、LYS96和GLY193是Rh Amidase降解HPAM-2的关键氨基酸残基.其中GLY193与HPAM-2形成的1个氢键对Rh Amidase-HPAM-2的亲和力影响最大.突变体ASP191ALA可以提高Rh Amidase对HPAM-2的酶活性,这些数据可为设计更高活性的Rh Amidase突变体提供理论指导.

摘要：上转换发光纳米材料由于其特有的光学性质而一直备受关注,但常见的上转换发光纳米材料多为单色发光,为了实现上转换多色正交发光,同时避免多种掺杂剂离子的合成复杂性以及相互间的干扰性,利用Er3+的2H11/2,4S3/2→4I15/2能级跃迁产生的绿色发光和4F9/2→4I15/2能级跃迁产生的红色发光,设计出由Er3+单个激活剂离子掺杂的双激发上转换纳米颗粒。通过热分解法一步步合成出NaErF4:Yb(19.5%)/Tm(0.5%)@NaYF4:Yb(10%)@NaNdF4:Yb(10%)三层结构的上转换纳米颗粒。此方法合成出来的颗粒大小均一、结构稳定、分散性好。该双激发纳米颗粒能够在980 nm和808 nm的激发光下实现红色和绿色的正交发射光,且其单独发光不受影响。在980 nm激发下,红色光中650 nm处的发射峰强度大约能达到540 nm处发射峰的9.46倍;在808 nm激发下,绿色光中540 nm处发射峰强度大约能达到650 nm处发射峰强度的5.39倍。

摘要：以油茶饼为原料,异丙醇-环己烷为混合萃取溶剂,采用超声辅助提取油茶饼中残油。以残油率为考察指标,分别研究了超声时间、超声温度、料液比和溶剂体积比对残油率的影响。通过单因素试验及响应面设计优化油茶饼残油的提取条件。结果表明:最优提取条件为超声时间52 min、超声温度61℃、料液比1∶6.4(g/mL)、溶剂体积比3.2∶1,在此条件下,残油率为0.278%。

摘要：为了研究肉苁蓉添加量、酵母添加量、二氧化硫添加量和发酵时间对肉苁蓉葡萄酒品质的影响,文章采用正交试验设计方法,利用CRITIC权重和柔顺指数法确定各品质指标相关性和权重系数,并结合正交试验结果优化发酵工艺参数,获取最佳保健功能肉苁蓉葡萄酒工艺。结果表明,肉苁蓉葡萄酒品质综合评分最高的工艺如下:肉苁蓉添加量为5 g/kg,酵母添加量为50 mg/kg,二氧化硫添加量为70 mg/L,发酵时间为8 d,与以柔顺指数为指标的正交试验结果一致。在该条件下,所酿制的肉苁蓉葡萄酒酒精度为15.8%,还原糖质量浓度为2.7 g/L,总酸质量浓度为6.2 g/L,维生素C质量浓度为0.021 g/L,花色苷质量浓度为414.0 mg/L,单宁质量浓度为179.5 mg/L;得到的肉苁蓉葡萄酒浸提了肉苁蓉中的功能性成分,其酒香味和果香味协调纯正,酒体清澈,呈现深宝石红色,风格独特;总二氧化硫质量浓度为0.010 g/L,菌落总数范围及致病菌检测要求符合国家标准要求,且没有对感官风味产生不利影响。

摘要：“生物分离工程”是一门理论性、应用性和逻辑性都很强的专业基础课。根据大健康背景下营养与保健品制造业的人才需求及工科院校的学生工学基础较强的特点,对“生化分离工程”的课程教学与实验教学进行了设计与探索,以期在有限的教学学时内使学生掌握“生化分离工程”的理论知识与实验技能,培养学生的创新思维,提高学生的创新能力。