摘要：【目的】获得大豆根际土壤中溶磷能力较强的菌株,明确在菌株溶磷过程中葡萄糖脱氢酶(GDH)的作用特点及其基因的表达水平。【方法】利用溶磷圈方法分离与纯化溶磷菌株,采用Vitek 2系统和16S r RNA序列分析菌株的分类地位;测定2菌株的溶磷量、GDH活性,并根据GDH基因的保守区序列设计引物,克隆GDH基因,利用实时荧光定量PCR测定不同条件下基因的相对表达量。【结果】筛选出2株具有较强溶磷能力的溶磷菌,分别鉴定为Pseudomonas sp.和Enterobacter sp.,2菌株最高溶磷量分别为558μg/m L和478μg/m L;成功地克隆了2株溶磷菌的GDH基因,片段大小分别为2007 bp和2066 bp;2菌株在不同磷源、不同p H值培养基中GDH活性及基因表达量不同,菌株wj1在高磷条件下基因表达量最高,磷胁迫条件下基因表达量较低,而wj3在不同磷源条件下GDH基因表达量都较低。且GDH基因表达量及酶活的变化与wj3菌株溶磷量没有直接的关系。【结论】从大豆根际土壤中分离获得溶磷能力较强的菌株Pseudomonas ***1和Enterobacter ***3,GDH活性及基因表达在2株菌溶磷过程中具有不同的作用特点,2菌株溶磷机制不完全相同。

摘要：[目的]为了明确黑土种植的大豆根际溶磷菌的种类及不同溶磷菌溶无机磷的特性,并有效利用溶磷菌,增加黑土的可持续利用能力。[方法]以NBRIP为分离培养基从大豆根际土壤中分离到1株溶磷菌(命名为wj6),采用Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法对其进行鉴定;以NBRIP分离培养基为基础,利用L25(53)正交设计试验,从碳源、氮源及pH值3个方面对菌株wj6溶磷培养基进行优化;利用优化后的NBRIP培养基测定wj6溶解Ca3(PO4)2、FePO4和AlPO4的特点以及溶磷过程中磷酸酶活性和葡萄糖脱氢酶活性。[结果]经Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法鉴定菌株wj6为Klebsiella sp.。菌株wj6以葡萄糖和蛋白胨为碳源和氮源,pH值为8时溶磷量最高;对Ca3(PO4)2、FePO4、AlPO4均有较强的溶解能力,最高溶磷量分别为409.28、60.59和32.90μg·m L-1。菌株wj6在溶解FePO4和AlPO4时受环境pH值的影响较大,当接种到pH值为8的溶磷培养基中,能溶解FePO4和AlPO4,而在培养基原液(pH3)中不具有溶磷能力;以Ca3(PO4)2为唯一磷源,在溶磷过程中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和葡萄糖脱氢酶活性先增加后减小,36 h内葡萄糖脱氢酶活性较大,与其他时间内酶活差异显著。[结论]从大豆根际分离到的溶磷菌Klebsiella ***6在不同难溶性磷酸盐中溶磷能力差异较大,且溶磷受环境pH值的影响。磷酸酶和葡萄糖脱氢酶在溶磷过程中起重要作用。

摘要：为了研究噬菌体裂解宿主菌的机制，开发噬菌体裂解相关蛋白的应用价值，试验参照GenBank 中登录的 holin基因序列设计特异性引物，以分枝杆菌噬菌体CJAUS5基因组为模板，经PCR 扩增出411 bp的条带。构建重组质粒pMD19－T－holin，经双酶切鉴定呈阳性后进行测序分析。结果显示，克隆出的holin基因与已知分枝杆菌肌尾噬菌体holin序列同源性高达99．03％～99．51％；编码的氨基酸同源性高达99％～100％。对holin基因编码的蛋白进行分析表明，Holin蛋白具有亲水性C端和两个跨膜区域。研究成功克隆了分枝杆菌噬菌体CJAUS5的holin基因并进行了氨基酸序列分析，为进一步研究 Holin蛋白的生物学特性及功能奠定了基础。

摘要：采用NCⅡ设计,对选自国外玉米杂交种的5个不同株系(同一二环系)在不同密度环境条件下的杂种优势和配合力进行了研究.结果表明:在4.5、6.0和7.5万株.hm-2密度下玉米单株产量的杂种优势均较高,为116.4%、77.2%和48.7%,其杂种优势随密度增加而减小;这5个自选系与塘四平头、旅大红骨系统杂交,单株产量具有较强的杂种优势,在4.5、6.0和7.5万株.hm-2密度下选出的高杂种优势组合中,其所配组合分别占4/6、7/8和6/8;自选系和骨干系的一般配合力在不同密度下表现不同,同一自选系的特殊配合力在不同密度下表现亦不同;单株产量的一般配合力在6.0和7.5万株.hm-2时变化趋势相近,呈显著正相关.

摘要：为探索禽分枝杆菌副结核亚种(MAP)的热休克蛋白65(hsp65)对鹅副黏病毒(GPMV)血凝素神经氨酸酶(HN)的分子佐剂作用及构建GPMV DNA疫苗,针对GPMV的HN基因和MAP的hsp65基因设计引物,PCR克隆扩增两个基因,分别将二者先后与真核表达载体pVAX1连接,构建了pVAX1-HN、pVAX1-hsp65-HN,并通过PCR、酶切和序列鉴定所获重组质粒;应用脂质体法将其转染至Marc-145细胞,RT-PCR和间接免疫荧光试验证实hsp65和HN在Marc-145细胞中获得了表达。本研究为制备新型GPMV DNA疫苗及探索hsp65在DNA疫苗中的应用奠定了基础。

摘要：本实验选用苦参、黄柏、龙胆草及百部4味中药,运用正交实验筛选中药组方,为后续研究提供理论依据。1材料与方法白色念珠菌由霉菌性阴道炎患者白带标本中临床分离。培养基为沙氏葡萄糖琼脂及液体培养基。药物为苦参、黄柏、龙胆草及百部。选用三水平四因素L9(34)正交表进行正交设计。四因素三水平分别为苦参A、黄柏B(3、6、10)、百部C(5、10、15)、龙胆草D(3、4.5、6)。采用琼脂稀释法进行抑菌实验:二倍连续稀释法进行药液稀释,取0.1mL菌液(含菌***-1)滴于各浓度含药平皿中并涂匀,35℃培养48h,记录该药的最低抑菌浓度(MIC)。实验重复3次。2结果1～9实验组的MIC:1.