摘要：本试验采用随机设计,将40只21日龄已免疫的健康艾维茵肉用仔鸡随机分成4组,每组2个重复,每个重复5只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组为试验组,分别饲喂添加0.1%复合酶Ⅰ、0.1%复合酶Ⅱ、0.2%复合酶Ⅱ的基础日粮。试验饲喂期28d,从中研究复合酶对肉用仔鸡生长性能的影响,并筛选出复合酶效果最好的添加剂量。试验结果表明:这3种不同剂量的复合酶均能不同程度的提高肉用仔鸡的平均体重,降低肉鸡的料肉比(P<0.01),其中以添加0.2%复合酶Ⅱ的效果最佳。

摘要：从临床＂高热综合征＂病例分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syn-drome,PRRSV）,经分离培养、血清学鉴定和分子病毒学鉴定,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒,并命名为DZ0908。设计了针对病毒Nsp2基因和GP5基因的引物,扩增出目的基因。通过序列比对进行遗传变异分析,该分离株Nsp2基因序列中第483位和第535~563位氨基酸存在缺失,GP5相对保守,该毒株属于PRRSV变异株,为该病毒的进一步研究奠定了基础。

摘要：为了研究奶牛乳腺炎相关基因IRAK2第7外显子SNP基因多态性,试验根据GenBank中IRAK2基因序列设计引物,PCR扩增得到281 bp和279 bp的IRAK2基因片段,将所得的片段经PCR-SSCP方法和RsaⅠ内切酶酶切检测后均出现3种基因型。结果表明:获得的基因型与NCBI中报道的一致。说明用PCR-SSCP联合酶切方法建立IRAK2基因快速诊断方法是可行的。

摘要：为了筛选适宜中药渣发酵的酶制剂用以提高中药渣的营养价值,试验首先采用单因素完全随机设计共设置3个酶制剂处理组,分别为纤维素酶组、木聚糖酶组和纤维素酶+木聚糖酶复合组,分别按照质量分数添加0.50%纤维素酶、0.50%木聚糖酶和0.50%纤维素酶+0.50%木聚糖酶;另设对照组,不添加酶制剂。单一酶制剂筛选试验采用单因素试验效果最佳的酶制剂设置五个添加组,分别为对照组(不添加酶制剂)及0.25%组(添加0.25%)、0.50%组(添加0.50%)、0.75%组(添加0.75%)和1.25%组(添加1.25%)。另采用4×4的双因素试验,A因素为纤维素酶,B因素为木聚糖酶,分别设4个添加水平(0.25%、0.50%、0.75%和1.25%),共16个组合。每个试验均于30℃培养箱中连续发酵3 d,每个样品3个重复,发酵完取出发酵药渣混匀后采取四分法取样,测定pH值和各营养成分[包括干物质(DM)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)和粗灰分(Ash)]。结果表明:与对照组相比,纤维素酶组和纤维素酶+木聚糖酶复合组CP含量均显著提高(P<0.05),pH值、NDF含量和ADF含量均显著降低(P<0.05),纤维素酶组和纤维素酶+木聚糖酶复合组呈现相似发酵效果。因此,选择纤维素酶进行单一酶制剂不同比例的筛选试验。与对照组相比,0.25%、0.50%、0.75%和1.25%组pH值、DM含量及NDF含量均显著降低(P<0.05),CP含量均显著提高(P<0.05),且0.50%组最高。纤维素酶和木聚糖酶不同添加水平对pH值及DM、EE、CP、CF、NDF、ADF和Ash含量均有显著交互作用(P<0.05)。通过比对纤维素酶0.50%添加水平和纤维素酶与木聚糖酶复合1∶1添加水平下中药渣内营养成分含量发现,两种添加水平之间呈现了相似的发酵效果。说明在发酵过程中,复合酶组并未表现出绝对优势,考虑经济因素,中药渣按照质量分数添加0.50%纤维素酶即可达到较好的发酵效果。

摘要：目的建立针对云南地区流行的基因Ⅲ型乙型脑炎病毒株Real-time PCR检测方法。方法根据云南地区分离株乙型脑炎病毒株(Yunnan0901)基因组核苷酸序列设计特异性引物,构建pMD18-T-JEV-E质粒,以此为模板进行SYBR GreenⅠReal-time PCR扩增并制作标准曲线,摸索最佳反应体系条件,建立乙型脑炎病毒荧光定量PCR检测方法,并与普通RT-PCR方法相比较。结果建立的SYBR GreenⅠReal-time PCR标准曲线呈现良好的重复性和特异性,与模板浓度呈现良好的线性关系。与RT-PCR方法相比,SYBR GreenⅠReal-time PCR的灵敏度高10倍,而且不与猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、基孔肯雅病毒、辛德毕斯病毒核酸发生非特异性扩增,具有良好的特异性。用该方法检测云南部分地区的蚊虫样品,其中库蚊、按蚊乙型脑炎病毒阳性率分别为17.4%和30.7%,且主要为基因型Ⅲ型。结论本实验建立的检测基因Ⅲ型乙型脑炎病毒的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等特点,可应用于乙型脑炎疫情的监测。

摘要：为了同时检测临床上牛常见的三种呼吸道重要病原体,本研究针对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛支原体(MB)保守基因进行引物设计,并成功构建标准阳性质粒。使用纳米金颗粒将普通PCR方法优化,建立了三重Nano-PCR检测方法。结果显示,三重Nano-PCR检测方法可同时检测出BVDV、IBRV和MB的阳性质粒(1μL)最低检测分别为1 fg、100 ag、10 fg,灵敏度分别为常规PCR的10、10、100倍。临床结果显示,30份采集于临床呼吸道病牛样品中,BVDV、IBRV和MB的Nano-PCR的检测阳性率分别为33.33%、36.67%、33.33%,而普通PCR的检测阳性率分别为26.67%、30%、20%,提示BVDV和IBRV混合感染最多,阳性率可达26.67%。三重Nano-PCR方法特异性良好,检测其他牛呼吸道相关病原体BCV、BPIV3和BRV时结果均呈阴性。本研究建立的快速灵敏且特异良好的三重Nano-PCR检测方法可广泛应用于临床诊断和流行病学筛查。

摘要：为建立一种灵敏且快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的分子检测方法,本研究采用纳米颗粒与普通PCR技术相结合,通过使用Oligo 7设计FPV的特异性引物,建立FPV Nano-PCR分子检测方法,并与普通PCR方法进行对比分析。结果显示,所建立的Nano-PCR的敏感度是普通PCR的10倍(10 fg/μL);特异性试验表明,Nano-PCR只检测猫泛白细胞减少症病毒时呈阳性反应,而检测猫杯状病毒(FCV)、猫疱疹病毒(FHV)以及F81细胞cDNA/DNA时呈阴性反应。利用两种方法对采集的26份临床病料进行平行检测,发现Nano-PCR与普通PCR阳性率分别为53.84%和42.31%。上述结果表明,所建方法具有敏感性好、特异强、简捷快速等优点,可应用于临床样品的快速检测和鉴定,为猫泛白细胞减少症的早期诊断和防控提供了一定技术保障。

摘要：为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)一步法微滴数字PCR(RT-ddPCR)方法,本研究在一步法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法的基础上,设计BVDV的特异性引物和探针,对RT-ddPCR试验中的反转录酶、退火温度、引物和探针浓度以及检测方法的反应条件进行优化。同时对其特异性、敏感性、重复性进行评估。结果显示,建立的RT-ddPCR方法最佳反转录体系为商品化一步法数字PCR试剂盒配套试剂、引物和探针终浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为57℃;用本方法检测常见疫病病毒时结果呈阴性;本方法最低检测限为3.2 copies/μL,重复性好,且变异系数小于5%。采用RT-ddPCR和RT-qPCR对24份牛源拭子样品进行检测,检测结果显示所建方法优于RT-qPCR方法。本研究建立的RT-ddPCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,适用于临床样品的核酸检测,为牛病毒性腹泻病毒感染的早期检测和定量诊断提供了技术支持。

摘要：竹鼠养殖地要有充足的饲料来源,地势干燥,排水良好,背风向阳,以南或东南山麓避开寒流侵袭和强风吹袭的平原、坡地及丘陵为理想。地势平坦,略向南或东南倾斜,地面坡度以3~5°为宜,最大坡度不超过20°,要高出当地历史最高洪水水位,地下水位在2m以下。冬暖夏凉,受外界干扰少,电力供应要有充分保障,同时,便于运输和防疫管理。若在村屯利用猪舍、牛舍等旧房改建,要求阴暗、干燥、僻静,还要有防止狗、猫侵袭的设施。