摘要：目的建立敏感、特异、快速的检测登革Ⅱ型病毒(DENV-2)SYBR GreenⅠqRT-PCR方法。方法根据GenBank上发表的DENV-2株核苷酸序列,应用Primer Express 3.0软件在保守区设计特异性引物,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,利用Sanger测序验证该方法的特异性和敏感性。结果该方法与其他血清型登革病毒、流感病毒等均无交叉反应,最低检出20个病毒拷贝/μl RNA。检测14份已知阳性和阴性血清,结果与预期一致。结论本研究建立的DENV-2 SYBR GreenⅠqRT-PCR特异性强、敏感性高,可用于输入性DENV-2早期感染诊断。

摘要：为了对吉林某土鸡养殖场发生大规模的肿瘤性疾病进行诊断,经过流行病学调查、临床症状检查、病理剖检及组织学观察,初步诊断为禽白血病和鸡马立克病;进行实验室鉴别诊断,设计特异性引物,利用PCR方法,经过BLAST序列比对,实验结果确定该病为鸡的马立克病,而且同时表现出4种混合型的临床症状。

摘要：目的构建牛瑟氏泰勒虫表面蛋白p33基因的真核表达载体。方法根据已发表的牛瑟氏泰勒虫(Thei-leria sergenti)表面蛋白p33基因的核苷酸序列设计引物,应用PCR技术从牛瑟氏泰勒虫基因组DNA中扩增p33基因片段并克隆入pMD18-Tsimple载体。进一步将该基因插入到真核表达载体pVAXⅠ,转染Hela细胞后进行RT-PCR检测和IFA检测。结果牛瑟氏泰勒虫表面蛋白p3基因成连接到pVAXⅠ载体中,并在真核细胞中有效表达。结论本研究试验为今后该基因的进一步动物试验奠定了基础。