摘要：目的检测变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因ffh是否存在突变。方法体外诱导变形链球菌耐氟菌株,碱裂解法提取细菌基因组,根据GenBank上公布的变形链球菌耐酸相关基因ffh的序列,设计一对引物进行PCR,利用PGEM-TEasy载体进行T-A克隆,构建重组质粒,酶切电泳,并测序鉴定。结果变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因ffh发生了突变。结论变形链球菌耐氟菌株中耐酸相关基因ffh发生了突变,并可能与其耐酸性增强有关。

摘要：背景:人牙髓组织较少,对酶解消化的耐受性较差,经胰蛋白酶和胶原酶分步消化处理后,细胞贴壁数量少,生长缓慢,难以成功传代,组织块酶解法获得的牙髓细胞种类少,活性差。目的:探索组织块培养法在人牙髓细胞体外培养中的应用。设计、时间及地点:细胞观察实验,于2005/2007年在吉林大学和平校区及口腔医学院进行。材料:健康人正畸或阻生拔除的牙齿。方法:选取第三磨牙,取出牙髓,在少量DMEM培养液浸润下,将牙髓组织剪碎至1.0mm×1.0mm×0.5mm组织块,将牙髓组织块移入含培养液的6孔板中,调整组织块密度至3～6块每孔,间距0.5cm均匀摆置。将6孔板倒置放入37℃、体积分数为5%CO2、饱和湿度条件的培养箱中,3h后翻转培养板,保持组织块贴壁生长,加培养液至2mL后继续培养。4～6d换液1次,细胞6～15d从组织块边缘游出,在组织块周围形成生长晕。细胞渐进汇合时,以用0.25%的胰蛋白酶、0.02%EDTA的混合液消化2.0～3.0min,按1∶(2～3)的比例传代培养至25mL培养瓶。原代培养细胞通过反复消化传代的方式逐渐获得纯化的成纤维样细胞。主要观察指标:采用免疫组织化学方法鉴定细胞形态,碱性磷酸酶值测定牙髓细胞分泌。MTT法绘制牙髓组织细胞生长曲线。结果:相差显微镜下,获得的牙髓细胞主要是典型成纤维细胞,形态多呈星形、长梭形,胞体丰满,胞浆均匀,核圆形或卵圆,核仁清晰。免疫组织化学检测显示,细胞表面波丝蛋白阳性、角蛋白阴性,碱性磷酸酶阳性。在接种于96孔平底培养板1d后,细胞数量有所下降,但在接种2d后数量又有所增加,此时细胞增加不很明显。4d开始进入对数生长期,细胞增加显著,8d进入平台期,9d开始减少,整个细胞曲线呈"S"形。结论:采用组织块培养法从成体人牙髓组织中可以分离培养出细胞,在体外能有效增殖并保持低分化状态。

摘要：背景:观察血管内皮祖细胞在牙周血管改建中的作用规律对于研究正畸牙周改建机制具有重要意义。目的:对牙移动大鼠外周血内皮祖细胞进行体外分离、培养及鉴定,探讨牙齿移动是否可动员骨髓内皮祖细胞进入外周血。设计、时间及地点:细胞体外分离培养及生物学指标检测,随机对照动物实验。于2007-09/2008-04在吉林省口腔生物医学工程重点实验室完成。材料:24只Wistar大鼠,随机分为实验组和对照组,每组12只。方法:实验组建立大鼠牙移动模型,对照组置牵拉装置但不加力。加力第2天取两组动物外周血制作细胞涂片,检测其中CD133阳性细胞数。同时以Percoll密度梯度分离提取其外周血单个核细胞,培养至第12天,取两组细胞爬片进行相关指标检测。主要观察指标:以免疫细胞化学染色和免疫荧光化学染色检测细胞表面标志物,荧光化学检测细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白及荆豆凝集素1情况,MTT法检测细胞增殖情况。结果:实验组细胞涂片中CD133阳性细胞率明显高于对照组(P<0.05)。所培养细胞可同时吸收Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白、FITC标记的荆豆凝集素1,呈CD133、Ⅷ因子、CD34阳性。实验组细胞增殖活性高于对照组(P<0.05)。结论:实验初步证实了实验性牙移动可动员大鼠骨髓内皮祖细胞进入外周血。

摘要：采用冠下法对2年间在我科就诊的下颌前磨牙慢性根尖周炎行根管治疗术的300颗患牙进行研究。根据终末工作直径分3组,各100例:A组为25#,B组为30#,C组为35#。结果 A、B、C 3组的约诊间疼痛发生率分别为32%、25%和19%(A vs C,P<0.05),认为终末工作直径达标准锉35#可明显降低根尖周炎患牙约诊间痛发生率。

摘要：目的 :检测干酪乳杆菌中是否存在耐酸相关基因ffh并对其克隆测序。方法 :厌氧培养干酪乳杆菌 ,碱裂解法提取细菌基因组 ,根据耐酸相关基因ffh的同源性 ,从最保守区设计一对引物进行PCR ,利用 pGEM -T载体进行T -A克隆 ,构建重组质粒 ,酶切电泳 ,并测序鉴定。结果 :PCR获得耐酸相关基因ffh部分片段 ,重组质粒含有其目的片段。结论 :干酪乳杆菌中存在耐酸相关基因ffh。

摘要：目的:研究流体树脂修复楔状缺损的临床疗效。方法:选择30例38对共76颗患牙,采用自身对照设计方法,分别应用流体树脂和玻璃离子进行充填修复,1年后比较二者的临床疗效。结果:1年成功率流体树脂组为89.5%,对照组为65.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:流体树脂在修复楔状缺损时优于玻璃离子,具有良好临床效果,是一种较理想的充填材料。