摘要：目的:构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人TRAIL(shTRAIL)基因表达载体pcD-NA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察其对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响。方法:利用化学合成HRE上下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,利用流式细胞术和TUNEL检测细胞凋亡变化;利用蛋白质印迹法检测Caspase-3蛋白表达。结果:质粒大小为6282bp,BamHⅠ和SmaⅠ酶切,所得片段大小分别为1284和4998、2292和3990bp;以载体为模板,Egr1和shTRAIL引物进行PCR扩增,可得到469bp和820bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧与辐射能够增加细胞凋亡的百分比(P<0.05或P<0.01),两者联合,作用更明显,P<0.01;而且乏氧与辐射也能诱导Caspase-3表达的增强(P<0.05或P<0.01),两者联合作用,表达增加更明显,P<0.01。结论:乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因在乏氧和辐射条件下能够增加肺腺癌A549细胞的凋亡,诱导Caspase-3蛋白表达的增加,两者联合作用效果更明显。

摘要：目的大部分的胸部肿瘤进行调强放射治疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT)时,在计划中加入适当的正向射野都可以有效降低肺脏的低剂量照射体积。本研究旨在探索颈及胸上段食管癌的调强计划中加入正向射野对最终结果的影响。方法选取2015-12-01-2016-02-29吉林省肿瘤医院放疗科接受治疗的颈及胸上段食管癌患者10例,每例患者分别设计一个添加了正向射野的调强计划,即混合调强(H-IMRT)。该计划设计方法如下:利用前后对穿的正向适形野照射胸段靶区,并控制脊髓剂量<40Gy,之后添加7个射野方向均分的调强野,选取调强野中对肺脏保护不利的射野方向,使其仅照射锁骨上段靶区,最后优化调强野直至剂量分布达到临床应用要求。对H-IMRT和传统IMRT做比较研究。分析H-IMRT的剂量学优势及治疗特性。结果 H-IMRT靶区的适形度指数(Z=-2.096,P=0.042)和均匀性指数(Z=-2.075,P=0.046)都明显优于IMRT计划。H-IMRT肺脏的V5、V10、V15分别比IMRT计划低约15.5%(Z=-2.865,P=0.012)、22.3%(Z=-2.873,P=0.005)、30.3%(Z=-2.932,P=0.003);V20、V25、V30分别比IMRT计划低约31.7%(Z=-2.916,P=0.002)、24.8%(Z=-2.743,P=0.008)和15.5%(Z=-1.776,P=0.026);且H-IMRT肺的平均剂量也要比IMRT计划低约16.4%(Z=-2.653,P=0.005)。但H-IMRT的MUs数比IMRT计划多约18.9%,差异有统计学意义,Z=-2.847,P=0.005。结论利用IMRT技术治疗颈及胸上段食管癌时,在计划中加入合适的正向射野,可以让计划表现出更加优秀的剂量调制能力,在靶区覆盖和肺脏保护两方面都展现出明显的剂量学优势。