摘要：旨在建立一种快速、高效、经济、实用的双重实时荧光PCR方法,能同时快速、灵敏、特异地检测贝类中沙门氏菌、阪崎肠杆菌的双重实时荧光PCR体系。本研究以水产品中贝类为目标,根据特定基因序列,设计特异性扩增引物和TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和条件,每种引物探针体系均可以特异性检测目标致病菌类型。2套引物探针体系组合可同时检测沙门氏菌、阪崎肠杆菌。双重RT-PCR方法的最低检测限可低至0.002 ng或0.02 ng基因组/反应,变异系数均小于2%。利用建立的双重RT-PCR方法检测14份贝类产品样本,样品实测结果与国家标准方法的检测结果一致,符合率为100%。结果表明,本研究建立的双重RT-PCR方法具有特异性、敏感性高、重复性好等优点,为贝类产品中沙门氏菌、阪崎肠杆菌的快速检测提供了新的技术方法。

摘要：本研究利用SN/T 4793—2017国境口岸疟原虫实时荧光PCR检测方法中恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)特异基因引物探针和自行设计的卵形疟原虫(Plasmodium ovale)特异基因引物探针,对37个疟原虫样本进行鉴定,并建立恶性疟原虫和卵形疟原虫的双重实时荧光PCR检测方法。根据恶性疟原虫和卵形疟原虫的引物探针,优化检测方法,验证其特异性、重复性和灵敏性,建立双重实时荧光PCR方法,为口岸实验室检测机构提供节省人力及试剂成本的便捷准确方法。