摘要：本文旨在探讨低蛋白质饲粮中添加DL-蛋氨酸和赖氨酸对冬毛生长期蓝狐生长性能、氮平衡和毛皮质量的影响,并研究低蛋白质饲粮中蛋氨酸和赖氨酸的最适添加量。对照组饲粮蛋白质水平为27%(P27),低蛋白质饲粮蛋白质水平为19%(P19),选择健康的生长后期雄性蓝狐120只(17周龄左右),随机分成10组,每组12只。本试验采用3×3双因子交叉试验设计,有3个赖氨酸水平(0.3%、0.5%、0.7%)和3个含硫氨基酸水平(0.4%、0.6%、0.8%),试验组编号分别为P27、L1 M1、L1 M2、L1 M3、L2 M1、L2 M2、L2 M3、L3 M1、L3 M2和L3 M3,饲养试验试验期为61 d(2007-10-12～2007-12-12)。结果表明,如果考虑蓝狐平均日增重、日氮沉积、氮沉积率,0.6%的蛋氨酸水平最佳;如果考虑日氮沉积和毛皮质量,0.3%和0.5%的赖氨酸水平最佳;如果考虑氮的表观消化率、日粪氮排出量,0.3%的赖氨酸水平最佳;各处理蓝狐的毛皮质量与对照组差异不显著(P>0.05)。综合各项指标,L1 M2(0.3%Lys×0.6%Met)组蓝狐生产性能最佳;低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸和赖氨酸不影响冬毛期蓝狐的生产性能;应用低蛋白质饲粮降低了排泄物中氮的含量,减轻了环境污染,节约了蛋白质资源。

摘要：水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease parvovirus,AMDV)主要侵害宿主的单核-巨噬细胞,引起持续性感染。病毒感染后可产生免疫复合物疾病、高γ球蛋白血症和高水平的抗体,抗病毒抗体在体内不能有效地清除病毒,反而通过Fc受体介导的抗体依赖性感染增强作用(Antibody-dependent enhancement,ADE)使感染增强,并造成免疫系统功能紊乱。目前,ADE的可能感染致病机制为①抗体复合物与FcR受体、补体成分C3或C1q、C1qR结合,促进了病毒与细胞的吸附;②免疫复合物通过上调模式识别受体的负调控因子抑制了干扰素介导的抗病毒机制;③通过IL-10的早期活化,抑制机体的先天性免疫抗病毒机制。本文就AMDV ADE作用的几种可能机制以及ADE在致病过程中的作用进行了探讨,以期为ADE的分子机制研究、病毒的致病机理及疫苗设计提供参考。

摘要：本试验旨在研究半胱胺对育成期雄性水貂生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响。采用双因子试验设计,选取56只(86±5)日龄、体重相近的健康雄性水貂,随机分为7组,每组8个重复,每个重复1只。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂在基础饲粮风干基础上添加60、90和120 mg/kg半胱胺的试验饲粮,添加方式为连续添加,Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组试验饲粮分别同Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,添加方式为间隔添加(连续添加1周,间隔1周)。预试期7 d,正试期53 d。结果表明:1)间隔添加组的末重及平均日采食量、平均日增重显著或极显著高于连续添加组(P0.05)。2)间隔添加组干物质、粗脂肪消化率显著或极显著高于连续添加组(P0.05),但均以90 mg/kg组最高。半胱胺的添加方式和添加水平对水貂各营养物质消化率的影响无显著交互作用(P>0.05)。3)半胱胺添加方式和添加水平均显著影响水貂食入氮(P0.05)。此外,半胱胺添加方式和添加水平对水貂尿氮排出量存在显著交互作用(P<0.05)。综合各项指标,育成期雄性水貂饲粮中半胱胺的适宜添加量为90 mg/kg,添加方式为间隔添加(连续添加1周,间隔1周)。

摘要：旨在探明美洲水貂黑素皮质激素受体-1(Melanocortin-1receptor,MC1R)基因序列结构特征及其对皮毛颜色的调控机制。根据欧洲水貂MC1R基因(GenBank登录号:AB189820)核苷酸序列设计1对特异性引物,利用PCR及克隆技术测定美洲短毛黑水貂MC1R基因完整编码区序列(CDS),并对该序列进行了BLAST比对及生物信息学预测和分析。结果表明,获得的美洲水貂MC1R基因与欧洲水貂相似性为95%,为单一外显子基因,核苷酸序列长度为1 324bp,包括部分5′UTR(188bp)、CDS(954bp)和3′UTR(182bp),编码区碱基G+C含量高达66.04%,由CDS推导共编码317个氨基酸,预测的MC1R蛋白理论分子质量为34.49ku,等电点(PI)为8.97,不稳定系数是36.63,属于弱碱性稳定蛋白质。进一步分析发现,美洲水貂MC1R基因编码的蛋白存在1个低复杂度结构域和7个典型的跨膜区,N-端不存在信号肽,定位于细胞质膜,具有典型的细胞膜受体结构。分子进化分析显示,美洲水貂与欧洲水貂亲缘关系较近,与二者均属鼬科、鼬属动物的传统动物分类学一致。美洲水貂MC1R基因的获取及序列结构特征分析为揭示其皮毛颜色多样性的分子遗传学机制奠定了详细的生物信息学基础。

摘要：根据GenBank中公布的雪貂（登录号：EF405957）、大熊猫（登录号：XM_002930310）、家犬（登录号：CFU42219）及猫（登录号：AY959314）的酪氨酸酶（tyrosinase,TYR）基因DNA序列保守区域,设计1对特异性引物,利用PCR及克隆技术测定了短毛黑水貂、红眼白水貂和米黄色水貂的TYR基因外显子1部分序列,并对该序列进行了BLAST鉴定及变异位点分析,基于该基因编码氨基酸序列构建了16个物种的系统进化树。结果表明,测定的3种毛色水貂TYR基因序列长度均为796bp,包括795bp的外显子1和1bp 5′UTR,共检测到5个单一突变位点：g.A34G、g.T138A、g.T248C、g.A545G和g.C765A,包含4个错义突变：g.A34G（***12Gly）、g.T248C（***83Ala）、g.A545G（***182Cys）和g.C765A（***255Gln）,1个移码突变分别出现在短毛黑水貂和红眼白水貂个体间：g.T138A（***46＊）,获得TYR基因GenBank登录号分别为：短毛黑水貂（KJ198847）、红眼白水貂（KJ658343）和米黄色水貂（KJ152769）。水貂与雪貂、大熊猫、家犬、猫、家兔、猪、羊驼、山羊、绵羊、牛、人、猕猴、黑猩猩、原鸡和日本鹌鹑的TYR基因核苷酸序列同源性为72.8%～98.6%,相应氨基酸序列同源性为75.0%～98.1%。TYR基因分子进化树显示水貂与雪貂遗传关系最近,分化时间约为1000万年前,且与原鸡和日本鹌鹑亲缘关系最远。该结果为进一步开展TYR基因多态性与水貂毛色表型的相关性研究奠定了生物信息学基础。

摘要：为研究抗雄性激素药物和醋酸美伦孕酮对6岁龄梅花鹿二茬茸生长发育的影响,选择体质量和头茬茸产量相近的6岁龄健康梅花鹿20只,采用单因子试验设计,随机均分成5组。基础粮饲相同,对照组不做特殊处理,其余4组分别注射抗雄性激素氟他胺（flutamide）、康士得（bicalutamide）、醋酸环丙孕酮（progesterone acetate）和醋酸美伦孕酮（melengestrol acetate）。试验期60 d,共采集血液4次,测定梅花鹿血浆中雄性激素睾酮的含量,对比不同组变化规律;观察二茬茸生长发育状态;实验结束,梅花鹿二茬茸锯茸称重,计算二茬茸比重。结果发现,试验组二茬茸质量显著高于对照组,氟他胺、康士得、醋酸环丙孕酮、醋酸美伦孕酮与对照组相比分别增重100.50%,64.46%,87.16%,117.46%。试验早期（35 d）各组梅花鹿血液睾酮含量差异不显著;试验末期各组梅花鹿睾酮含量均极显著高于前一阶段（P〈0.01）;其中注射氟他胺组极显著低于其他组（P〈0.01）,康士得组和醋酸美伦孕酮组极显著高于其他组（P〈0.01）。结果表明对梅花鹿注射抗雄性激素和孕酮均促进了二茬茸的发育,增加了二茬茸的质量,其中以醋酸美伦孕酮组最为显著。从鹿茸的形态观察发现,抗雄性激素和孕酮处理延缓鹿茸骨化,从而延长了二茬茸的生长期,但是均没有影响血浆睾酮水平。

摘要：本试验旨在研究肝脏香、奶香、甜味剂和大肠香等4种饲料调味剂对育成期雄性蓝狐采食量、营养物质消化率、氮代谢和生长性能的影响。试验采用单因子试验设计,选取体况健康的育成期雄性蓝狐50只,随机分成5组,每组10个重复,每个重复1只。各组动物个体间体重差异不显著(P>0.05)。对照组(Ⅰ组)饲喂基础饲粮,试验组(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)分别饲喂在基础饲粮中添加肝脏香、奶香、甜味剂和大肠香饲料调味剂的试验饲粮,添加量分别为500、500、120、500 mg/kg。试验期为52 d。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ和Ⅳ组干物质采食量极显著提高(P0.05);Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组蛋白质消化率极显著提高(P0.05);Ⅳ组粪氮显著降低(P0.05);平均日增重各组之间差异不显著(P>0.05),但以Ⅰ组最低,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别较Ⅰ组提高了7.99%、3.27%、6.19%、7.37%;料重比从低到高顺序依次为Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅰ组,但各组之间差异不显著(P>0.05)。在本试验条件下,饲粮中添加肝脏香、奶香、甜味剂3种调味剂均提高了蓝狐的干物质采食量和营养物质消化率,提高了饲料的利用率,其中以甜味剂效果最好。

摘要：本试验旨在通过研究饲粮中半胱胺对育成期水貂生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响,确定饲粮中半胱胺的适宜添加水平和添加方式。试验采用双因子试验设计,选取56只(86±5)日龄、体重相近的健康雌性短毛黑水貂,随机分为7个组,每组8个重复,每个重复1只。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础饲粮中添加60、90、120 mg/kg半胱胺,添加方式为连续添加;Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组分别在基础饲粮中添加60、90、120 mg/kg半胱胺,添加方式为间隔添加(连续添加1周,间隔1周)。预试期7 d,正试期53 d。结果表明:1)饲粮中添加半胱胺极显著影响水貂的平均日采食量和料重比(P0.05)。Ⅴ组料重比极显著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组(P<0.01);平均日增重以Ⅴ组最高,间隔添加组高于连续添加组。2)饲粮中添加半胱胺显著影响水貂的粗蛋白质消化率和粗脂肪消化率(P<0.05),极显著影响干物质消化率(P<0.01),且均以Ⅴ组最高。半胱胺添加方式极显著影响水貂的干物质消化率(P<0.01),间隔添加组极显著高于连续添加组(P<0.01)。3)饲粮中添加半胱胺显著或极显著影响水貂的氮代谢指标(P<0.05或P<0.01)。Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组氮沉积显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值均极显著高于Ⅰ组(P<0.01),且以Ⅴ组最高。半胱胺添加方式极显著影响水貂的食入氮含量、尿氮排出量、净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值(P<0.01)。间隔添加组水貂的食入氮含量和尿氮排出量极显著低于连续添加组(P<0.01);间隔添加组的氮沉积显著低于连续添加组(P<0.05);间隔添加组的净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值极显著高于连续添加组(P<0.01)。半胱胺添加水平显著影响水貂的粪氮排出量(P<0.05),90 mg/kg组水貂的粪氮排出量显著低于60 mg/kg组(P<0.05)。综合各项指标,育成期水貂饲粮中半胱胺的适宜添加水平为60 mg/kg,适宜添加方式为间隔添加。

摘要：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJ株在细胞克隆纯化后得到非结构蛋白2(Nsp2)缺失的致弱毒株TJM株,根据GenBank数据库中公布的PRRSV TJ株F3代全基因序列设计合成引物,采用RTPCR方法扩增了PRRSV TJM株缺失片段dNsp2,利用原核表达载体pGEX-6p-1构建重组质粒GSTdNsp2,将重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,获得了可溶性表达的融合蛋白(GST-dNsp2)。经亲和柱层析纯化后,得到纯化的GST-dNsp2蛋白,含量1.6mg/mL。用PreScissionTM蛋白酶对融合蛋白GST-dNsp2进行解离,获得浓度为0.41mg/mL的目的蛋白dNsp2。对GST-dNsp2及dNsp2进行Western blot鉴定,证明表达的蛋白具有良好的反应性。本研究获得的GST-dNsp2及dNsp2为ELISA方法鉴别检测PRRSV TJ株与TJM株提供了基础资料。

摘要：构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,为进一步研究galectin-1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。