摘要：研究生教育注重培养学生的科学研究和创新能力。文献阅读与讨论(literature reading and discussion,LRD)对研究生创新思维和批判性思维的培养发挥积极的作用。然而,在传统的分子生物学课堂上,如何有效地实施大规模的集体LRD是一个巨大的挑战。云班课是一款专门针对教学而设计的免费移动教学APP,具有强大的人机交互功能。在本研究中,基于云班课app的LRD被引入到研究生医学分子生物学课程中,并在云班课建立仅限于上课学生的私人在线讨论板(private online discussion board,PODB)。PODB建立了一种学生社区意识,是组织和促进大课堂讨论的有效方法。LRD中的小组学习有助于学生理解文献,并促进学生间的合作和讨论。总之,本研究表明,基于云班课的LRD有助于提高学生的学习效果。云班课中学生的学习风格与参与度、满意度和学习成绩之间的关系值仍需要进一步研究。

摘要：目的 建立测定左羟丙哌嗪血药浓度的气相色谱-串联质谱联用分析方法,并研究其在犬体内的药动学.方法 采用拉丁方设计,对6只犬均给予3种剂量的左羟丙哌嗪溶液,给药后采集一系列血样,用气相色谱-串联质谱法测定其血药浓度,用3P97药动学程序处理血药浓度数据并计算参数.结果 该法在0.005～4.0 mg·L^-1内线性关系良好（r=0.997 8）,最低检测浓度0.005 mg·L^-1,平均萃取回收率为84.4%～95.4%.日内、日间相对标准差（RSD）均低于5%.6只犬药-时曲线符合一室开放模型,左羟丙哌嗪在犬体内吸收和消除迅速,分布广泛.3种剂量的参数AUC0～∞,ρmax,tmax,t1/2Ka,t1/2Ke,MRT,CL,Vd在个体间、实验周期间均无显著差异（P＞0.05）.结论 建立了左羟丙哌嗪GC-MS血药浓度测定方法.该法专属性强,灵敏度高,适用于左羟丙哌嗪的药动学研究.

摘要：目的建立准确度高、灵敏性好的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定血浆中盐酸伐昔洛韦水解产物阿昔洛韦的浓度,以研究盐酸伐昔洛韦片在体内的药代动力学及相对生物利用度。方法采用两制剂双周期交叉试验设计,18名男性健康志愿者先后分别单剂量口服盐酸伐昔洛韦受试片剂或参比片剂300mg,采用RP-HPLC,以更昔洛韦为内标,测定血浆阿昔洛韦浓度。用3P97药代动力学程序处理血药浓度数据并计算参数,并作出生物等效性评价。结果口服盐酸伐昔洛韦受试片剂和参比片剂后的药代动力学参数AUC0-t分别为(9.87±2.48)和(9.94±2.67)(μg.h)/ml,AUC0-∞分别为(10.84±2.98)和(10.83±3.18)(μg.h)/ml;Cmax分别为(3.06±0.66)和(3.16±0.66)(μg.h)/ml;Tmax分别为(1.25±0.26)和(1.17±0.24)h。受试盐酸伐昔洛韦片剂以AUC0-t和AUC0-∞计算其相对生物利用度分别为(100.6±11.7)%和(101.7±13.3)%。结论建立的阿昔洛韦血药浓度监测方法灵敏、准确,测定结果可靠;统计分析结果表明受试制剂与参比制剂具有生物等效性。

摘要：目的:研制黄体酮缓释栓,研究其家兔药动学。方法:采用正交设计法,以体外释放度为指标,优化黄体酮缓释栓的处方。体外释放度采用中国药典2000年版二部转篮法,体内血药浓度用磁性分离酶联免疫法和3P97程序计算药动学参数。结果:体外释放行为符合零级动力学;体内过程为二室模型,药动学参数为t1/2Ke=12.7h,tpeak=0.5h,Cm ax=48.8μg.L-1,AUC0-24h=385.1μg.L-1.h。结论:该制剂具有缓释特征。

摘要：本研究建立了乙酰胆碱酯酶(AChE)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)抑制剂的药效团模型,设计、筛选了双靶点活性分子,并验证了其抑制活性,探讨了多靶点分子的设计策略。利用Catalyst计算机辅助药物设计软件系统,以叠合程度和构象能进行筛选,得到具有AChE、PARP-1抑制活性的双靶点结构。通过计算机预测目标分子的理化性质,得到5个优选的氨基噻唑类衍生物。将匹配的优选化合物合成后进行对AChE和PARP-1的抑制活性的实验验证。其中化合物3对AChE的抑制活性IC50为(0.337±0.052)μmol·L-1,而在1μmol·L-1浓度下对PARP-1的抑制率为24.6%。证明药效团模型在多靶点药物设计和筛选中能起到减少盲目性和加快设计开发的作用。

摘要：应用AdMax腺病毒载体系统构建携带siSPK1基因的重组腺病毒,进一步研究SPK1基因对N2a细胞凋亡的影响。设计可形成小发夹结构的SPK1-siRNA模板cDNA序列,克隆至质粒pDC316-siRNA,构建SPK1-siRNA穿梭质粒pDC316-SPK1,经鉴定正确后,将pDC316-SPK1与辅助包装质粒(pBHG loxΔE1,3 Cre)共转染至HEK293细胞,包装纯化并扩增重组腺病毒颗粒,终点稀释法测定病毒滴度;病毒感染N2a细胞,Western blot法检测SPK1蛋白的表达;Hoechst33258染色检测SPK1基因对N2a细胞凋亡的影响。酶切后PCR分析、测序鉴定表明,pDC316-SPK1构建成功,病毒纯化后滴度为2.50E+10 PFU/mL;重组病毒可在蛋白水平抑制SPK1的表达;SPK1基因抑制后,N2a细胞凋亡增加(P<0.001)。上述结果表明,含有SPK1-siRNA的重组腺病毒构建成功,且具有抑制SPK1蛋白表达的功能,该基因沉默后,N2a细胞凋亡增加。

摘要：目的 考察雷公藤内酯醇聚合物胶束（TP-PM）经尾静脉注射给药对SPF级BALB/c小鼠的急性毒性反应、根据致死率,计算其LD50,为该药抗癌药理学实验提供剂量设计依据.方法 SPF级BALB/c小鼠50只（雌雄各半）,按照2.415,2.777,3.194,3.673,4.224 mg·kg-1单次尾静脉注射给予TP-PM,共5个剂量组.观察小鼠单次给药的症状体征,统计死亡率、体质量等相应指标的变化.结果 在注射后4 h内各组小鼠未出现死亡.随着时间的延长,部分小鼠出现震颤、共济失调等症状,进而活动减少,甚至死亡,其死亡时间集中在给药后24～48 h,96 h后绝大部分存活动物恢复正常的运动、呼吸等,体质量上升.在该剂距范围内,死亡率分别为20.0%,60.0%,70.0%,80.0%,100.0%,呈现良好剂量效应关系.结论 TP-PM对于SPF级BALB/c小鼠经尾静脉注射途径,其LD50值为2.807 mg·kg-1,95%可置信区间是2.406～3.082 mg·kg-1,具备一定的缓释特征.

摘要：大鼠长期毒性试验是费时长、参加人员多、消耗财力和物质大、操作繁琐复杂而又经不起重复的一个高难度研究工作,对其进行质量控制显得尤为重要。主要包括试验开始前的试验设计质量控制、试验过程中的全程质量控制和试验结束后的资料整理和实验报告质量控制。

摘要：背景:宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展与环加氧酶2密切相关。目的:探讨人宫颈癌组织中是否存在环加氧酶2选择性剪接异构体的表达及其可能意义。设计:非随机对照实验。单位:重庆医科大学生物化学与分子药理学重点实验室,重庆医科大学附属第一医院妇产科。对象:选择13例重庆医科大学附属第一医院妇产科2002-03/2002-04宫颈癌住院患者的癌组织及正常组织。方法:设计一对全新引物,并采用反转录聚合酶链反应技术,从宫颈癌组织中分离环加氧酶2mRNA,然后对电泳条带进行克隆、测序和分析。主要观察指标:①观察癌组织与正常组织反转录聚合酶链反应琼脂糖电泳结果。②分析癌组织与正常组织电泳条带测序结果。结果:①正常宫颈组织未发现环加氧酶2目的条带(252bp),而宫颈癌组织则出现两条条带,除环加氧酶2目的条带外,还有一新的电泳带(534bp),经克隆和测序证实,该新条带除目的条带的环加氧酶2DNA的第7、8外显子序列外,还包含第7、8外显子间的内含子序列,即保留的内含子(282bp)。②根据阅读框推测,在保留的内含子第48～50碱基出现终止密码。结论:发现宫颈癌组织中存在环加氧酶2基因的选择性剪接异构体(Genbankaccessionnumber:BU493602),其所编码蛋白可能较已报道的环加氧酶2酶蛋白小。

摘要：目的研究镇痛实验中以痛阈值作为检测麻醉效应指标的可行性及复方亚甲蓝注射液的镇痛效应。方法100只小鼠随机分为5组:生理盐水组、利多卡因组、复方亚甲蓝注射液高、中、低剂量组。将小鼠固定于掌心,两电极分别刺于小鼠尾尖1/3处及左下肢足部,开通测量仪(量程0.5~1 mA,阶程6),观察记录发生第一嘶叫反应的电流值,作为动物给药前之基础痛阈值。选用4#针头随机区组设计注射于小鼠足跟偏内上部胫骨周围间隙内,再按照基础痛阈测定同样抓取小鼠并同部位刺激,观察记录给药后10 min、30 min1、h2、h、4 h、6 h8、h1、0 h、12 h2、4 h2、6 h之第一嘶叫反应的电流值,以电流的变化值及实际电流值为观察指标。结果利多卡因给药后10min痛阈值即显著升至最高点,其后逐步降低,其测定痛阈值与基础痛阈值及生理盐水组的同点测定痛阈值比较有极显著性差异的维持时间2~3 h左右,4 h后基本无镇痛效应;利多卡因给药后10 min、30 min1、h2、h痛阈相对基础痛阈的变化值与生理盐水组的同点测定痛阈相对基础痛阈的变化值比较有极显著性差异,维持时间2~3 h左右,4 h后变化值无统计学的意义;药后2 h^26 h各复方亚甲蓝组动物的痛阈值与利多卡因组比较有极显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论2%利多卡因(0.05 mL/只)镇痛作用持续时间小于4 h,而0.33%1、.1%和3.3%的复方亚甲蓝镇痛作用持续10~26 h。结果证明复方亚甲蓝具有及时而持久的局部镇痛效应。