摘要：当前全国高校近年来明显加大了综合设计性实验的比例,同济大学也对病原生物学实验进行教学改革探索。阐明了病原生物学实验课程建设的目的,论述了开展病原生物学实验课程建设的必要性和背景,讨论了病原生物学实验课程建设的内容与结构。通过综合性设计性实验教学实践,总结了病原生物学综合设计性实验教学的特色与效果。分析了病原生物学综合设计性实验教学开展过程中遇到的相关问题。

摘要：目的利用单链引导RNA(sg RNA)串联表达框架编辑恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)K13和NUP116基因。方法根据恶性疟原虫K13和NUP116基因序列设计引物,PCR扩增K13和NUP116基因的同源臂,并引入突变位点。PCR串联基因K13和NUP116的sg RNA,将同源臂和串联的sg RNA与载体p L6cs连接,构建用于电击转染实验的载体p L6-K13-NUP116,将其与表达Cas9蛋白的质粒一同通过电击转染法,转入恶性疟原虫体内,利用成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统对基因进行编辑修饰,通过筛选药物二氢叶酸还原酶抑制剂(WR)和杀稻瘟菌素(BSD)筛选转基因疟原虫,提取转基因疟原虫的基因组,对其进行PCR检测,最终通过测序鉴定K13和NUP116基因是否成功被突变修饰。结果 PCR扩增出K13和NUP116串联的同源臂(K13全长557 bp,NUP116全长569 bp)以及串联的sg RNA,与载体p L6cs连接后成功获得用于电击转染实验的表达载体p L6-K13-NUP116。电击转染后通过药物筛选转基因疟原虫,培养至第28天涂片镜检发现疟原虫。PCR检测结果显示,转基因疟原虫K13和NUP116基因突变修饰成功。测序表明,K13和NUP116基因的目标位点被成功突变。结论基于CRISPR/Cas9编辑技术的串联sg RNA表达载体可同时对恶性疟原虫K13和NUP116基因进行编辑。

摘要：目的：探讨以问题为基础的学习（problem-based learning， PBL）在医学病毒学实验教学中的应用。方法将2011级临床医学专业学生随机分为2组，实验组45人（含五年制20人、七年制25人）采用PBL教学，对照组63人（含五年制38人、七年制25人）采用传统教学。对比两组学生的实验成绩、医学病毒学理论成绩和期末理论成绩，并对实验组学生行问卷调查；考试成绩采用t检验，用SPSS统计软件包进行分析。结果实验组七年制学生的医学病毒学理论成绩明显高于对照组七年制学生（P＆lt;0.05），其他成绩2组差异无统计学意义。问卷显示，实验组学生对PBL可激发兴趣、锻炼病案分析与实验设计能力、促进知识理解和掌握方面满意度高；七年制学生对PBL可提高循证和归纳总结能力、五年制学生对PBL可提高自主学习能力和演绎素材能力满意度略低。结论联系公共卫生事件的医学病毒学实验课PBL教学能够激发学生学习兴趣，促进学生掌握知识，培养其良好的公共卫生意识。但需根据五年制和七年制学生学习能力对PBL教学流程作适当调整。