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均匀设计优化兴安落叶松ISSR-PCR反应体系: 收藏
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引用; 《林业科技》2013年第1期38卷 1-4页; 作者：王洪梅周志军李艳霞王福德翁海龙康迎昆周显昌李春明刘洋黑龙江省林业科学研究所哈尔滨150081 哈尔滨剑桥三中黑龙江哈尔滨150000; 采用均匀设计方法,对影响兴安落叶松ISSR-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶和模板5个组分的浓度进行了U16(45)和U12(35)两轮优化,建立了适合于兴安落叶松的ISSR-PCR反应体系。该优化的20μL反应体系包含MgCl23.0 mmol/L、dNTP...; 采用均匀设计方法,对影响兴安落叶松ISSR-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶和模板5个组分的浓度进行了U16(45)和U12(35)两轮优化,建立了适合于兴安落叶松的ISSR-PCR反应体系。该优化的20μL反应体系包含MgCl23.0 mmol/L、dNTPs 0.15 mmol/L、引物0.5μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0U、模板20ng/20μL。并进一步进行梯度退火试验,找到了最适的兴安落叶松ISSR退火温度为56.5℃。利用所确立的体系对部分兴安落叶松种质进行扩增的结果清晰可靠,多态性好。; 来源：详细信息评论

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