摘要：成簇的规律间隔性短回文序列(CRISPR)基因编辑系统,因其设计简单操作方便和无种属限制,已成为一种广泛应用的基因组定点编辑工具,在复杂的基因组编辑,例如基因的人源化改造以及条件等位基因的构建中有所应用。在自然界中,CRISPR系统拥有多种类别。其中,CRISPR/Cas9系统是研究最深入、应用最成熟的一种。本文针对CRISPR/Cas9系统,分别从基因敲入/敲除片段的大小、同源臂长短、构型即递送方式等技术环节进行综述,阐述不同设计及操作条件下由CRISPR/Cas9系统介导的基因敲入/敲除的效率差异。

摘要：目的基于退稿原因分析近年来医学研究生在学术论文写作中存在的问题。方法对《哈尔滨医科大学学报》2018年1月~2021年12月共152篇在读硕士研究生投稿的论文进行分析,从退稿周期、学术不端、实验设计、数据处理、书写及规范等方面进行分析,总结退稿原因。结果在152篇退稿稿件中,初审阶段退稿为102篇(67.11%);外审退稿50篇(32.89%),无稿件在终审后退稿。退稿原因中因存在论文学术不端现象退稿稿件41篇,占比26.97%;选题设计存在问题的稿件40篇,占比26.32%,统计学方法运用不当稿件为32篇,占比21.05%;论文书写及格式欠规范的论文39篇,占比25.66%。结论医学研究生应当在实践中规避论文写作中存在的一些问题,提高科研和写作能力。

摘要：CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。

摘要：缓冲溶液的基本概念和缓冲机理是缓冲溶液一章的教学重点和难点,本文强调了概念教学的重要性,并阐述了学生应如何结合实验,联系实际理解基本概念,如何有层次。

摘要：目的改进抗肿瘤多肽30肽纯化方法并测定其活性。方法设计并合成His标签序30肽序列,与PTYB21重组后转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3)pLysSS菌株,再经IPTG诱导、镍离子柱纯化后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况,DTT裂解后G25葡聚糖凝胶层析分离30肽,测定浓度、纯度后,计算产量,MTT检测30肽抗肿瘤活性。结果重组的PTYB21-His-30肽大量地表达融合蛋白,经镍离子柱层析的纯化的30肽与传统提取方法几丁质层析方法总产量基本一致,并且具有较好的抗肿瘤活性。结论重组的抗肿瘤多肽表达载体经镍离子层析后能够纯化出理想的30肽,该纯化方法操作流程简单、节约成本,有利于抗肿瘤多肽的大规模提取。