摘要：背景长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障，但其作用机制尚不明确。目的研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞（LECs）后对LECs中核转录因子κB（NF—κB）／NF—κB抑制蛋白κ（IκBκ）表达的影响及LECs凋亡的发生情况，了解皮质类固醇性白内障的发病机制。方法取人LECs系（HLE283）在含质量分数20％胎牛血清的DMEM中进行培养和传代。将不同浓度的地塞米松（0．01、0．1、1、10、100μmol／L）分别加入DMSO无血清DMEM培养液中作为不同浓度地塞米松组，不含地塞米松的DMSO无血清DMEM培养液培养的LECs作为空白对照组。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot、流式细胞术等方法，分别在基因水平、蛋白水平检测LECs中NF—κB／IκB α浓度的改变及LECs凋亡率的变化。结果扩增的基因片段与所设计片段大小一致。地塞米松作用后NF—α核蛋白在LECs中的表达量随着地塞米松浓度的增加而下降，差异有统计学意义（F=36．077，P=0．004）；IκBα蛋白的表达随着地塞米松浓度的增加而上升，差异有统计学意义（F=35．741，P=0．002）。在同浓度地塞米松组，NF—κB核蛋白在LECs中的表达量随作用时间的不同差异有统计学意义（F=16．606，P=0．01），与地塞米松作用24h时的表达量比较，36h和48h时的NF—κB核蛋白表达量明显下降，差异有统计学意义（P=0．002；P=0．01）。与地塞米松作用24h时的表达量比较，36h和48hIκBα蛋白在LECs中的表达量明显增加，差异均有统计学意义（P=0．014；P=0．002）。流式细胞仪检测显示LECs的凋亡率随着地塞米松浓度的增加明显上升，与空白对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论地塞米松通过上调IκBα的表达而过度抑制了NF—κB的活性，并导致LECs凋亡，其作用呈浓度依赖性，这可能是皮质类固醇性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一。

摘要：目的比较增生前期(PPDR)和增生期(PDR)糖尿病视网膜病变患者合并中、重度白内障在不同时期行全视网膜光凝术(PRP)的疗效。设计回顾性病例系列。研究对象62例(95眼)经荧光素眼底血管造影(FFA)诊断PPDR和PDR且伴有中、重度白内障的患者。方法所有患者均能模糊看到眼底,取得知情同意后根据病情将PPDR期和PDR期分配置A、B二组中。A组30例47眼,先行视网膜周边光凝2次,再行人工晶状体植入术,术后1个月再行2次视网膜光凝,补充术前未光凝部分;B组32例48眼,先行人工晶状体植入术,术后1个月分3次行全视网膜光凝(PRP)治疗,每次间隔1周。治疗前及治疗后1个月,所有患者行眼科常规检查及FFA和OCT检查。FFA检查结果为判定糖尿病视网膜病变的疗效标准。显效:原有新生血管完全萎缩和无灌注区消失;有效:原新生血管部分萎缩和无灌注区大部分消失;无效:新生血管无明显变化、发生玻璃体积血和新生血管青光眼。主要指标最佳矫正视力、视网膜新生血管及无灌注区消失状况、黄斑中心视网膜厚度。结果 A组和B组PPDR期患者激光术前、后视力提高和视力稳定率分别为90.5%(19/21眼)和86.4%(19/22眼),两组比较差异无统计学意义(P=0.12);在PDR期,两组分别为76.9%(20/26眼)和65.4%(17/26眼),两组比较差异有统计学意义(P=0.02)。PPDR期患者FFA检查无灌注区消失A组显效和有效占85.7%(18/21眼),B组显效和有效占81.8%(18/22眼),两组比较无明显差异(P=0.1);PDR期两组FFA检查新生血管和无灌注区消失状况:A组显效和有效占61.5%(16/26眼),B组显效和有效占42.3%(11/26眼),两组比较差异显著(P=0.03)。PPDR期患者A组黄斑中心凹厚度(213±11.8)μm,与B组(189±10.4)μm比较,差异无统计学意义(P=0.1);PDR期A组黄斑中心凹视网膜厚度(286±16.7)μm,明显低于B组(425±20.7)μm(P=0.01)。结论对于PDR合并白内障患者,在人工晶状体植入术前、后分期行全视网膜光凝对PDR的效果优于人工晶状体植入术后光凝治疗。

摘要：目的探讨急性黄斑区神经视网膜病变(acute macular neuroretinopathy,AMN)临床及OCT影像学特征。设计回顾性病例系列。研究对象2009-2015年哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科医院AMN患者5例5眼。方法回顾患者的病史、临床表现、眼底像、频域相干光断层扫描(SD-OCT)检查的结果。主要指标眼底表现,SD-OCT图像特征。结果 5例患者中4例为年轻女性,骤然出现视力下降或暗点。1例患者患病前1周有感冒发热史。3眼后极部圆形暗红色病变;1眼黄斑中心偏颞下方暗红色分叶状病变。SD-OCT显示4眼黄斑区局灶性椭圆体带和嵌合带缺失。2例外核层外侧一高反射病变。1例外核层变薄,内、外丛状层增厚。1例陈旧病变,外界膜缺失断端与色素上皮层相连,外核层变薄,内、外丛状层增厚。视野、ERG未见明显异常,FFA未见特异性改变。结论 AMN患者多为年轻女性,急性发病。眼底表现多为黄斑区暗红色病灶。SD-OCT表现多为黄斑区局灶性椭圆体带和嵌合带缺失,早期可伴有光感受器层高反射,晚期为椭圆体带和嵌合带的缺失、破坏。

摘要：目的调查同一供体来源HIV-1病毒包膜序列变异情况,为进一步进行表型特征、病毒感染能力以及抗病毒免疫研究奠定基础。方法从6例同一来源HIV-1感染者外周血单个核细胞中提取DNA,设计跨病毒包膜的保守引物,进行PCR扩增,将扩增产物克隆至质粒载体,筛选阳性克隆进行序列测定。采用生物信息学方法对其进行系统发育特征以及编码氨基酸的变异性进行了分析。结果共获得6个有完整开放读码框的包膜克隆。在6个克隆中,包膜糖蛋白gp120内变异程度大的区域分别为信号肽区、可变区V1/V2区、恒定区C2区内近V3区部分、V4区和V5区。变异包括点突变、氨基酸插入或缺失等。系统树分析发现所获得病毒克隆与中国分离株BCNB03聚集成一束。结论构建并鉴定了6个HIV-1包膜克隆。同一来源的HIV包膜糖蛋白在不同受者体内发生了较大变异。

摘要：目的观察可诱导共刺激因子(inducible co-stimulator factor,ICOS)短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对大鼠活化T细胞中ICOS基因的沉默效应,筛选有效干扰靶点。方法设计合成ICOS RNA寡核苷酸片段,经退火、连接等步骤克隆至线性化的pRNAT-U6.1/Neo真核表达载体上,测序鉴定。应用Lipofectamine2000将该质粒转染活化的大鼠T细胞,荧光定量RT-PCR检测ICOS mRNA表达情况,Western blot检测ICOS蛋白表达情况。结果成功构建了3个靶点的重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-ICOS-siRNA1、2、3,荧光定量RT-PCR和Western blot显示转染这3种重组质粒的T细胞ICOS mRNA和蛋白表达均较对照组有不同程度的下降,其中1号靶点的干扰效应最为明显。在转染后的T细胞中,其抑制率分别达到了51.3%、78.3%.结论重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-ICOS-siRNA能有效抑制大鼠活化T细胞中ICOS基因的表达,并筛选出了有效干扰靶位。RNA干扰技术有望成为研究ICOS在实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎中作用的有效手段。

摘要：目的:观察在体外共培养系统中RPE对Mller细胞的影响。方法:Transwell小室共培养RPE和Mller细胞,MTT法、细胞计数法,测定Mller增殖和迁移的情况。结果:Mller细胞增殖的实验:Mller细胞的增殖,除了3h与6h,24h与48h之外,在其他各时间点之间差别有统计学意义。Mller细胞与RPE共培养组和Mller细胞单独培养组两组之间差别有统计学意义。Mller细胞迁移的实验:Mller细胞迁移,除了3h和6h之外,在其他各时间点之间差别有统计学意义。Mller细胞与RPE共培养组和Mller细胞单独培养组两组之间差别有统计学意义。在析因设计实验中,与RPE共培养、缺氧条件,这两个因素都可以分别作为独立的因素促进Mller细胞的增殖和迁移,而两者不存在协同作用。结论:正常和缺氧条件下RPE促进Mller的增殖、迁移,随共培养时间的延长RPE促进Mller增殖、迁移的作用加强。缺氧条件下RPE与Mller细胞间的相互作用在视网膜增殖性疾病中起到了重要的作用。