摘要：目的 建立一种巢式PCR方法,探讨HPV DNA在非生殖器部位Bowen病中的检出率.方法 巢式PCR方法,用5对不同引物包括CN1FR、CN2FR、CN3FR、CN4FR以及CN5FR进行扩增.结果 通过ClustalX软件,将所设计的每对引物与已知HPV亚型的碱基序列逐一相比较,得知改良设计的引物可以使69种HPV亚型得到扩增,包括黏膜型HPV、皮肤型HPV以及疣状表皮发育不良相关性HPV;PCR反应体系的敏感度在10-2～10-3拷贝之间.41例非生殖器部位Bowen病的组织标本中,5例HPV DNA阳性,其中高危黏膜型3例（2例HPV16,1例HPV33）,皮肤型2例（HPV27和HPV76各1例）.结论 改良的巢式PCR方法具有较高的敏感性、特异性,部分非生殖器部位Bowen病发病与黏膜高危型HPV感染相关.

摘要：目的探索使用他扎罗汀倍他米松乳膏治疗斑块状银屑病4周后有效但未达基愈患者的后续用药方案。方法本研究采用多中心、随机、开放、平行、对照设计。232例完成0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏4周治疗,银屑病面积与严重性指数(PASI评分)改善在50%~90%但未达基愈的斑块状银屑病受试者,在第5周时1∶1随机化进入试验组和对照组,试验组每日1次外用0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏,对照组每日1次序贯使用0.05%他扎罗汀凝胶、0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏(工作日使用他扎罗汀凝胶、周末使用他扎罗汀倍他米松乳膏),进行第5~8周的治疗,第6周和第8周时评价两组的疗效和安全性。两组间计量资料的比较采用协方差分析或t检验,计数资料的比较采用卡方检验。结果232例进入第5~8周治疗的患者中,200例完成研究,试验组和对照组的全分析集(FAS)分别为110例、112例,安全性分析集(SAS)均为113例。连续治疗6周和8周后,试验组PASI评分的下降率分别为73.05%±16.69%和78.46%±15.40%,对照组分别下降66.73%±21.77%和67.02%±34.19%,两组比较,均P<0.05。治疗6周后,试验组达到PASI90的受试者比例(14例,12.7%)高于对照组(5例,4.5%,χ^(2)=4.842,P=0.028);治疗8周后,试验组达到PASI75、PASI90的受试者比例(61.8%、23.6%)均高于对照组(48.2%、12.5%,均P<0.05)。连续用药8周后,试验组和对照组的不良反应发生率(15.0%、23.9%)差异无统计学意义(χ^(2)=2.822,P=0.093)。结论使用0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏治疗银屑病4周后有效但未达基愈的患者,继续进行为期4周的0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏治疗是一种比序贯使用0.05%他扎罗汀凝胶、0.05%/0.05%他扎罗汀倍他米松乳膏更优的治疗方案。

摘要：目的检测皮肤组织基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白和基因在小鼠慢性变应性接触性皮炎(ACD)中的表达,并判断其表达与皮肤炎性反应表现的关联性及意义。方法 2016年1—9月在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室进行实验,随机将140只小鼠分为空白对照组、模型组、CL-82198干预1组和干预2组,各35只,并按照实验设计分别予以相应处理,建立小鼠慢性ACD模型,干预1组和干预2组分别应用抑制剂CL-82198浓度0.5 mmol/L和1.25 mmol/L进行干预,观察小鼠皮肤炎性反应表现,并应用免疫组化方法和实时荧光定量PCR检测各组小鼠右耳组织中MMP-13蛋白和mRNA表达水平情况。结果模型组组织中MMP-13蛋白表达及mRNA表达水平显著高于空白对照组(χ~2=18.65,t=3.30,P均<0.01)。干预1组和干预2组应用MMP-13特异性抑制剂CL-82198干预后,小鼠皮肤炎性反应表现及组织病理学变化较模型组均明显减轻,其MMP-13蛋白和mRNA表达水平较模型组均显著减少(χ~2=4.77、16.57,t=2.16、2.95,P<0.01)。干预1组中MMP-13蛋白和mRNA表达水平较干预2组明显增高(χ~2=4.06,t=6.79,P<0.01),提示CL-82198的干预明显降低MMP-13蛋白和mRNA表达。结论(1)组织MMP-13在小鼠慢性ACD中呈高表达趋势,提示MMP-13可能参与了小鼠慢性ACD的发病。(2)MMP-13特异性抑制剂CL-82198能有效降低MMP-13的表达,并且在抑制慢性ACD的发生及发展中起重要作用。

摘要：目的探讨SRD5A1基因的单核苷酸多态性与汉族人群寻常型痤疮的遗传易感性之间的相关性。方法从378例寻常痤疮患者和200名健康受试者的外周血分离基因组DNA。设计特异性引物,对SRD5A1基因的5个外显子进行PCR扩增并行DNA测序。结果在SRD5A1基因的5个外显子共发现4个单核苷酸基因多态性位点,分别为rs248793,rs3822430,rs8192186和rs3736316。rs8192186和rs3736316在重型痤疮组和对照组及轻型痤疮组中等位基因频率和基因型频率有显著差异,在重型痤疮组呈现频率更高的等位基因G和GG基因型。此外,rs3822430在重型痤疮组不存在GG基因型,rs8192186和rs3736316不存在AA基因型。结论 rs8192186和rs3736316两个同义的单核苷酸多态性可能在SRD5A1的表达和对重型痤疮的易感性上具有潜在的作用。rs3822430具有GG基因型或rs8192186及rs3736316具有AA基因型的患者可能具有患重型痤疮更低的风险。

摘要：目的:比较男性和女性黄褐斑患者发病相关因素的异同。方法:根据黄褐斑的发病特点设计问卷调查表并据此调查5个城市的黄褐斑患者,同时用放射免疫方法检测部分患者血清中性激素水平。结果:共调查黄褐斑患者348例,其中男54例,女294例。男性和女性患者在好发年龄、临床分型、精神因素和季节因素影响方面比较,差异显著(P<0.05);痛经有血块为女性患者的主要诱因,女性患者血中雌激素E3水平显著高于健康对照者(P<0.05)。结论:男性和女性黄褐斑患者的发病相关因素有差别,遗传因素是男性患者主要相关因素,而雌激素E3水平的变化是女性患者的主要相关因素。

摘要：目的研究辅肌动蛋白4(α-actinin-4,ACTN4)基因杂合突变184T>A与儿童原发性局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)的关系及其发生率。方法收集2014年3月-2016年7月于黑龙江省医院肾内科及儿科经肾穿刺活检确诊为原发性FSGS的儿童患者50例,选取同时期于本院进行疫苗接种的健康儿童40例作为对照组,同时蛋白酶-盐析法提取外周血白细胞基因组DNA,设计ACTN4基因第2外显子区引物,聚合酶链式反应扩增后进行测序,若发现突变,氯酚法提取父母头发DNA检测ACTN4基因。结果 50例原发性FSGS患者中检测到1例患者存在ACTN4基因第2外显子区杂合突变184T>A,导致编码蛋白质ACTN4的第62位氨基酸由丝氨酸突变为苏氨酸,患者父母、健康。对照组均未检测到相同突变,其余FSGS患者未检测到新的致病突变。此外,共发现5个单核苷酸多态:rs761625093、rs771782889、rs111387742、rs759055242,rs550398621,其中rs759055242和rs550398621导致编码氨基酸改变。结论 ACTN4基因第2外显子区184T>A(Ser62Thr)突变在儿童原发性FSGS患者中的发生率较低,因此不是引起本中心儿童原发性FSGS的常见突变。

摘要：目的研究辅肌动蛋白4(ACTN4)基因杂合突变184T>A与原发性局灶节段性肾小球硬化(FSGS)的关系及其发生率。方法收集2012年1月—2016年6月于黑龙江省医院肾内科和哈尔滨医科大学附属第一医院肾内二科经肾穿刺活检确诊为原发性FSGS患者78例,同时期在两所医院体检中心选取健康人68例作为对照组,蛋白酶-盐析法提取外周血白细胞基因组DNA,设计ACTN4基因第2外显子区引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增后进行测序发现突变,氯酚法提取父母头发DNA检测ACTN4基因。结果 78例原发性FSGS患者中检测到1例患者存在ACTN4基因第2外显子区杂合突变184T>A,导致编码蛋白质ACTN4的第62位氨基酸由丝氨酸突变为苏氨酸。患者父母,健康对照组均未检测到相同突变,其余FSGS患者未检测到新的致病突变。此外,共发现4个单核苷酸多态:rs2112649、rs761625093、rs146499679和rs781451819,其中rs146499679导致编码氨基酸改变。结论 ACTN4基因第2外显子区184T>A(Ser62Thr)突变在原发性FSGS患者中的发生率较低,因此不是引起本次研究原发性FSGS的突变的主要原因。