摘要：背景:在细胞获取、培养、移植等体外环境体系下,骨髓基质干细胞能否有效的应用于局部基因治疗尚不清楚。目的:课题创新性提出构建外源性hBMP-7基因真核表达载体,并期望可提高被转染的兔骨髓基质干细胞诱导成骨能力。设计、时间及地点:细胞-基因学体外观察,于2006-07/2007-07在哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心完成。材料:人健康新鲜胎盘组织由哈尔滨医科大学附属二院妇产科提供,产妇知情同意。健康雄性新西兰大耳白兔1只,由哈尔滨医科大学动物中心提供。方法:从人胎盘组织中克隆出hBMP-7基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体。从兔骨髓中分离培养骨髓基质干细胞,分为3组:pcDNA3.1-hBMP-7转染组、空载体pcDNA3.1转染组、未转染组。转染前1d取第2代骨髓基质干细胞5×106个,接种到60mm3含无抗生素培养基的培养皿中进行转染。主要观察指标:使用RT-PCR、免疫组织化学等方法检测hBMP-7在骨髓基质干细胞中的表达,检测各组细胞碱性磷酸酶、胶原、骨钙蛋白的合成情况。结果:转染72h后,pcDNA3.1-hBMP-7转染组于1.3kb处出现特异性条带,细胞胞浆有棕色的颗粒出现,另2组均呈阴性。pcDNA3.1-hBMP-7转染组骨髓基质干细胞碱性磷酸酶活性于转染后第2天显著增高,第8天达峰值,各时间点pcDNA3.1-hBMP-7转染组骨髓基质干细胞碱性磷酸酶活性、羟脯氨酸合成量、骨钙蛋白含量均明显高于其他2组(P<0.05或0.01)。结论:实验成功构建了pcDNA3.1-hBMP-7真核表达载体。结局证明了外源性hBMP-7基因可在兔骨髓基质干细胞中充分、高效表达,并且这种外源性hBMP-7基因具备促进兔骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力。

摘要：背景:羟基磷灰石是一种理想的骨和牙齿的外科医用材料,但其强度低且具有一定的脆性;羟基磷灰石和二氧化锆(3%mol氧化钇稳定的立方相二氧化锆)作为骨替代材料,二者复合后制备生物陶瓷材料对伤口愈合的影响值得研究。目的:观察纳米羟基磷灰石-二氧化锆生物陶瓷刀片材料切割伤口后对其愈合的影响。设计:单一样本观察。单位:哈尔滨医科大学附属第二医院骨二科,哈尔滨工业大学。材料:实验于2006-03/05在哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物研究室完成,选用54只4月龄SD大鼠,雌雄不限,体质量120～180g。实验所使用的纳米羟基磷灰石粉体为自行制备,Ca(NO3)2·4H2O(天津市博迪化工有限公司),(NH4)2HPO4(天津市石英钟厂霸州化工分厂),氨水(绥化市化学试剂厂),无水乙醇(天津化学试剂厂)。方法:将纳米羟基磷灰石和二氧化锆粉体经充分研磨后得到纳米羟基磷灰石/二氧化锆复合粉体,以质量比按40%羟基磷灰石+60%二氧化锆比例配制,采用热压烧结技术磨削制成具有一定刃形形状的外形,进行伤口切割实验,即用高压灭菌后的生物陶瓷刃部纵行切开大鼠背部皮肤与皮下组织,切口长为2cm,再用1#丝线缝合切口。分别在术后第3,7,14天将动物断颈处死,每次取18只,切取切口处皮肤与皮下、肌肉组织进行大体观察,同时进行切片、苏木精-伊红染色,光学显微镜观察伤口愈合情况。主要观察指标:大鼠背部伤口大体及组织学观察结果。结果:纳入大鼠54只,均进入结果分析,无脱失值。术后3d,大鼠背部伤口边缘可见到表皮撕裂的微细碎屑,切口未愈合,切口边缘有明显的炎性细胞浸润。术后7d,切口边缘仍可见到表皮撕裂的微细碎屑,但已经开始出现修复反应,碎屑减少,切口变平整,开始愈合,切口皮下组织内有明显的炎性细胞浸润。在高倍光学显微镜下观察,创缘开始愈合,可见到新生的胶原纤维充填于切口间,但胶原纤维较疏松,皮下组织内有大量的浸润的白细胞,为组织修复反应相。术后14d,伤口创缘间被致密的胶原纤维充填,皮下组织内的白细胞浸润明显减轻,新生的毛细血管内可见到正常的血细胞,切口间新形成的胶原纤维致密坚强,为正常创伤修复与和组织。结论:纳米羟基磷灰石-二氧化锆生物陶瓷材料具有无毒、无过敏等特点,具有良好的生物活性。

摘要：由植入物界面处的相互作用可能引起无菌性松动和假体周围感染。而无菌性松动和假体周围感染仍然是一个难以治疗的问题,并且最终可能导致假体植入失败,引起严重后果。理想的植入物应能促进骨整合,防止细菌粘附,减少细菌感染。骨科植入技术主要基于生物材料的开发和使用,随着材料科学和细胞生物学的发展,已可以用新的植入物表面涂层的进展来解决这些问题。本文回顾总结了时下骨科常见的假体涂层设计和相关问题,以期为进一步研究提供借鉴。

摘要：背景:中老年人的颈椎骨关节炎发病率较高,国外对引起颈椎骨关节炎的危险因素已进行了一些研究,但大多数因素尚在讨论之中。目的:调查国内不同地区间中老年人群颈椎骨关节炎的患病危险因素,为颈椎骨关节炎的社区预防干预提供依据。设计:横断面调查。单位:卫生部北京医院联合西安交通大学第二医院、河北医科大学中西医结合研究所、上海华东医院、南方医院、哈尔滨医科大学第二附属医院、四川大学华西医院共同完成。对象:调查于2005-07/08完成。采用分层多阶段整群抽样方法,选择西安、石家庄、上海、广州、哈尔滨市及成都6城市40岁及以上具有正式户口的常住居民6218人,均自愿参加调查。其中男2916人,女3302人,年龄男性40～94岁,女性40～86岁。方法:对调查人群进行颈椎骨关节炎的流行病学问卷调查,对有临床症状者行X射线摄片。本次调查的基本抽样单位是居委会(城市)和村委会(农村)。抽样方法以各城市为总体,分为城市和农村两层,第一阶段抽取区(县),第二阶段抽取街道(乡),第三阶段抽取居委会(村委会)。颈椎骨关节炎诊断标准为颈椎骨关节炎临床症状阳性加X射线Kell-gren&Lawrence分级2级及以上。问卷调查内容包括6个方面:包括一般情况、现病史、既往史、体格检查、X射线片检查情况及疾病诊断情况,共计94个问题141个变量指标。分析颈椎骨关节炎患病率的影响因素应用多因素非条件Logistic回归法,表示疾病与暴露因素之间联系强度的指标用比值比(OR),若OR>1,说明疾病发生与暴露因素呈正关联;若OR<1,说明疾病发生与暴露因素呈负关联。主要观察指标:各城市颈椎骨关节炎的患病率和OR。结果:纳入调查对象6218人,全部进入结果分析,无脱落。①国内6城市40岁及以上人群颈椎骨关节炎总患病率为23.6%,各城市患病率相比差异有显著性意义(P<0.01)。②Logistic回归分析结果:年龄(OR=1.010～1.058)、使用蹲坑排便(OR=1.024～1.997)和高血压病史(OR=1.815～3.078)为大部分地区共同危险因素;北方地区的共同危险因素有日常爬楼梯或爬坡(OR=1.018～1.020);而喝色酒(OR=3.451,西安)、父亲骨关节炎史(OR=2.491,西安)、糖尿病史(OR=5.013,石家庄)、母亲骨关节炎史(OR=2.045,上海)、吸烟(OR=6.857,广州)、开始饮酒年龄(OR=3.044,广州)及专职体育运动(OR=9.020,哈尔滨)等危险因素分别在不同地区出现。结论:国内6地区颈椎骨关节炎发病具有共同的危险因素,不同地区主要危险因素又有一定差异,可为今后颈椎骨关节炎的防治提供参考数据,减少医疗资源浪费。