摘要：针对目前几何建模的人机交互能力不足、设计自动化水平不高等问题,提出中文自然语言驱动的自动几何建模方法。首先给出中文自然语言驱动的自动几何建模方法框架,对几何建模意图的自然语言描述与理解方法进行论述,建立了几何建模意图的自然语言描述规则和几何建模意图表达范式,提出了基于几何要素模式匹配的自然语言规范处理算法;然后阐述了几何要素的数据表达和映射方法,论述了几何要素表达范式的自动推理与建模数据模式识别,并对几何要素的STEP自动映射进行分析,给出几何要素冗余信息的处理过程,从而实现中文自然语言驱动的自动几何建模。通过开发相关的原型系统进行实验研究,验证了所提方法的合理性和可行性。

摘要：本研究旨在克隆和表达水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)特异性抗原N蛋白,进而纯化并分析其免疫原性。根据GenBank中已发表的VSV基因组N基因序列,分别合成VSV两种不同血清型的N基因,经序列对比分析后,设计合成1对特异性引物,PCR扩增获得约1 300bp的N基因片段,将目的片段亚克隆至pColdⅠ原核表达载体中,经IPTG诱导表达后,采用Ni-NTA树脂亲和层析法纯化重组N蛋白。SDS-PAGE分析表明,N基因在大肠杆菌中得到表达,蛋白大小约为50ku;Western blotting检测结果表明,该重组蛋白与VSV多克隆抗体发生特异性反应。本试验成功构建了VSV-IND和VSV-NJ的原核表达载体,实现了N蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,纯化后的重组蛋白具有良好的免疫原性。

摘要：自动缫丝机目前在我国已得到普及,设备性能达到国际先进水平,特别是无导轨自动缫丝机具备强大的索绪及添绪能力,基本实现了优质高产。生丝定等项目也发生了较大变化,由偏差、匀Ⅱ降级为主转变为洁净、清洁降级为主。相应的生丝检验标准也于2002年开始实施,而在自动缫工艺设计方面,大部分地区参考依据仍沿用老的办法,这样的结果不利于原料茧性能的充分挖掘。设计指标往往与实际完成指标存在较大差异,使工厂的目标期望值不能很完整地实现。为此,文章针对自动缫工艺设计方面的几个问题进行了探讨,以期达到工艺设计能更好地指导生产的目的。

摘要：为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)NASBA的检测方法,本研究利用BioEdit和BlastN,根据GenBank中猪TGEV的S基因保守序列设计引物,建立了扩增TGEV的NASBA检测技术。利用该方法建立的反应体系在41℃反应2h即可得到有效扩增。实验结果表明:该方法对TGEV进行扩增获得约200bp特异性目的条带,而对CSFV、PRRSV、PCV-2、PPV、PEDV和ST细胞扩增结果均为阴性。NASBA的灵敏度高于普通RT-PCR,与病毒分离方法相当,可检测到5pg的核酸。该方法为TGEV的早期诊断提供了新途径。

摘要：为建立快速、定量的鲑传染性贫血病毒(ISAV)检测方法,基于ISAV片段7 ORF1编码的结构蛋白(NS)保守基因序列,设计特异性引物和TaqMan探针,通过反应条件优化,建立ISAV的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法,对其特异性、灵敏度及重复性进行评估,将其应用于口岸进境大西洋鲑报检样本ISAV检测中,并与OIE推荐的检测方法的检测结果进行比较。结果显示,本方法特异性强,灵敏度高,最低检测灵敏度达1.31×10~2copies/L。重复性试验结果显示,本方法的批内变异系数小于1%。299份2014—2016年间进口大西洋鲑报检样本的检测结果显示,ISAV的总检出率为6.35%(19/199),该结果与OIE推荐的检测方法的结果完全一致,且利用本方法测定的19份阳性样本的Ct值普遍低于OIE推荐检测方法测得的Ct值。结果表明,本研究中所建立的方法高效、敏感、特异、重复性好,在口岸检疫中具有广阔的应用前景,对于ISAV的鉴别诊断具有一定的参考意义。

摘要：根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)的保守序列glyG基因,设计了3套LAMP引物,以ESE-Quant tube scanner为检测平台,通过简单易行的LAMP扩增检测SVCV,LAMP扩增温度为63℃。结果显示,在引入环引物后,恒温操作下30min内可得出结果,第1套LAMP引物显示出优良的扩增效率和扩增特异性;并且建立的LAMP法有极佳的灵敏度,其检测限可达到每反应2.4pg。与传统LAMP和荧光定量仪两种方式作为LAMP检测平台相比,ESE-Quant tube scanner平台具有简单、便携,试验过程数据化和自动化的特点,适合SVCV的现场检测和大规模监控。

摘要：建立针对牛腺病毒5型六邻体(Hexon)基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法。根据牛腺病毒5型Hexon基因高度保守区设计引物和TaqMan探针,绘制标准曲线,对其灵敏度、特异性、重复性进行验证,建立牛腺病毒5型实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法。结果显示,构建的重组质粒pUC57-BAV5,标准曲线在10~2~10~7拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.975 2,建立检测方法的最低检测限为32拷贝/μL;应用建立的方法检测牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒、牛呼吸道合胞体病毒无交叉反应;重复性试验表明,同一浓度的20个平行样品的变异系数为1.4%。牛腺病毒5型TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以用于牛腺病毒5型的快速、准确的检测。

摘要：猕猴桃溃疡病是猕猴桃生产上的主要病害,为建立该病的快速诊断技术,本实验通过RAPD分析获得一条1 300 bp左右的致病菌的特异片段,对该片段进行克隆测序,在测序的基础上设计并合成一对特异引物F7/R7,优化特异引物扩增条件,并验证引物的特异性和灵敏性。利用该特异引物对包括猕猴桃溃疡病菌在内的14个菌株基因组DNA进行PCR扩增表明,只有猕猴桃溃疡病菌能扩增出1条约为950 bp的特异条带,其他菌株及对照均未扩增出特异条带。对采自果园的染病枝干组织和接种致病菌的枝干组织的检测表明,该特异引物能特异性地检测到猕猴桃溃疡病菌的存在,其在组织中的检测灵敏度为100 fg/μL。因此,利用设计合成的特异引物F7/R7,参考优化的体系和程序,结合简单的试剂盒法提取猕猴桃溃疡病菌或植物组织DNA,可以在短时间内完成对该病原菌的分子检测。

摘要：为建立一种检测并鉴别蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒和水泡性口炎病毒感染的方法,针对蓝舌病病毒NS3基因、口蹄疫病毒3D基因、小反刍兽疫病毒N基因和水泡性口炎病毒N基因序列设计引物,优化反应体系和扩增条件,建立了一种同时检测4种病毒的多重PCR方法。对建立的多重PCR检测方法的特异性及敏感性进行检验,结果表明建立的多重PCR检测方法敏感性强、特异性良好,对4种病毒的最低检出限分别为PPRV 103 copies/μL、BTV 103 copies/μL、VSV 103 copies/μL和FMDV 102 copies/μL。本方法的建立对临床感染蓝舌病等4种病毒的病畜进行快速检测具有十分重要的意义。

摘要：应用环介导等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)技术,研究建立一种快速、敏感、特异的检测亚利桑那菌(Salmonella arizonae)方法,为食品安全检测工作中亚利桑那菌检测提供一种快速准确工具。针对亚利桑那菌spv A基因中39个保守且特异的碱基序列,设计LAMP特异性引物,利用实时浊度仪对引物及反应条件进行优化,并对检测方法的灵敏度和特异性进行验证。该方法在63℃恒温下作用40 min,亚利桑那菌DNA获得高效率的特异性扩增;其检出限量为培养菌液浓度10~6CFU/m L,敏感性高;通过对25份沙门氏菌阳性食品的LAMP检测,检出2例亚利桑那菌。该文所建立的亚利桑那菌环介导等温扩增LAMP检测方法具有特异、灵敏、简便快捷等特点,适用于食品安全检测中亚利桑那菌的快速筛检。