摘要：目的研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),通过转染不同组分上调或下调内源性miR-18a在结肠癌细胞株HCT116中的表达。采用实时荧光定量(qRT)-PCR、Western blot、MTT法、克隆形成实验、Transwell等方法,检测过表达miR-18a调控ATM基因的表达对体外结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果软件预测发现miR-18a的其中一个靶基因是ATM。通过瞬时转染,过表达内源性miR-18a,可降低HCT116细胞内靶基因ATM蛋白的表达水平。转染miR-18amimics后能够下调HCT116细胞的增殖活力,同时显著降低HCT116细胞的克隆形成能力、横向迁移能力及纵向侵袭能力,以上各项改变均与miR-18a过表达有关。结论证实了miR-18a通过负向调控ATM的表达,抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移能力。

摘要：背景:3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺是苯丙胺类兴奋剂的一种,具有兴奋和致幻作用,对人体的损害也极其严重和复杂。在国外对其研究已成为成瘾行为领域中的热点。目的:观察3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺神经毒性长期效应对认知功能的影响。设计:随机对照动物实验。单位:四川大学华西医院心理卫生中心精神药理实验室。材料:实验于2003-07/2004-02在四川大学华西医院心理卫生中心精神药理实验室完成。随机将四川大学动物中心提供的16只成年雄性Wistar大鼠分为试验组10只,对照组6只。方法:试验组给予3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺10mg/kg,1次/h,共4次,即总量为40mg/kg,对照组给予等体积生理盐水。分别于末次给药后2,8,26,32周进行水迷宫试验观察空间学习记忆功能。主要观察指标:两组大鼠末次给药后第2,8,26,32周时逃避潜伏期和穿原平台所在位置的次数。结果:试验过程中12h内试验组大鼠死亡4只。6周时试验组大鼠又死1只,17周时对照组大鼠死亡1只,最后实验组、对照组各剩5只直至32周。末次给药后第2,8,26,32周时Morris水迷宫试验,两组逃避潜伏期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组4个时间点的穿环次数比较,差异也无统计学意义[(7.67±2.16),(7.50±2.95)次;(6.60±1.14),(7.0±1.67)次;(7.40±1.52),(6.60±2.61)次;(6.80±4.55),(5.80±1.79)次,P>0.05]。结论:3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺神经毒性长期效应对空间学习记忆功能影响不明显。

摘要：组织学实验课带有知识学习和技能锻炼的双重色彩。我们与国内多数医学院校一样，过去在面向国内医学本科生的实验教学中，已经积累了比较多的经验，教学设计和考核已经形成了稳定的模式。然而，近年留学生生源逐渐增多，在教学中，认识到留学生在本课程的学习中具有一些特点。

摘要：目的　为有效地切割端粒酶逆转录酶mRNA以降低端粒酶活性 ,从而使肿瘤细胞生长变慢 ,凋亡增加 .方法　设计并合成了 2个针对端粒酶逆转录酶mRNA的锤头状核酶基因htertRZ及htert 5’RZ ,构建了核酶基因的体外转录和真核表达质粒 ;并将核酶转染致肿瘤细胞中 ,检测其对肿瘤细胞端粒酶活性和生物学性状的影响 .结果　 2种核酶在细胞内均能明显地抑制端粒酶活性 ;核酶htertRZ稳定转染细胞后 ,使细胞生长变慢 ,倍增时间延长 ,但无明显促细胞凋亡作用 .结论　 2种核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂 ,在抑制肿瘤生长中发挥作用 .

摘要：目的探讨头孢曲松/他唑巴坦复方(CRO/TAZ)对产β-内酰胺酶大肠埃希菌的体外抗菌活性(MIC)、抗生素后效应(PAE)、β-内酰胺酶抑制剂后效应(PLIE)和抗生素亚抑菌浓度后效应(PASME)。方法采用琼脂二倍稀释法测定CRO/TAZ和CRO对产4种酶型β-内酰胺酶***菌株的MIC;以微量接种菌落计数法测定菌落形成单位(CFU),绘制细菌生长曲线,并计算PAE、PLIE和PASME。结果CRO/TAZ复方对产β-内酰胺酶菌株的MIC较CRO单方降低都在8倍以上;无论CRO单方还是CRO/TAZ复方均无长的PAE(-0.59～0.85 h);PLIE和PASME随着菌株β-内酰胺酶酶型的不同而不同,相同酶型的菌株PLIE和PASME很接近;PLIE(0.62～3.22 h)和大多数PASME(0.12～5.61 h)都较其PAE长,而且对CRO单方MIC较小的菌株,其PAE、PLIE和PASME较长。结论PLIE和PASME的长短可能与β-内酰胺酶酶型有关。对于有较长PLIE和PASME的菌株,在制定临床给药方案时可适当延长给药间隔;PAE、PLIE和PASME理论为研究抗菌药物药效学和设计合理给药方案、优化给药模式提供重要参考和新思路。

摘要：目的观察周期性双轴力学应变对人腺样囊性癌高转移细胞株ACC-M、低转移细胞株ACC-2中E-cad和α、β、-γcat的表达以及ACC细胞与细胞外基质(ECM)粘附的影响。方法采用成组设计,分别选取频率为每分钟3次的1 000、4 000μ应变对ACC-2、ACC-M细胞分别加载,每天定点加载1次,每组加载时间分别为每次1 h、3 h和6 h,共加载2次。第3天上午8点收获细胞;将未受力学刺激的细胞作为对照组,受力学刺激的细胞作为实验组。细胞在力学刺激后行E-cad和α、β、-γcat及细胞核双重免疫荧光染色,用激光共聚焦显微镜和图像分析软件进行定量和定位观察。用MTT法测定ACC细胞和ECM的粘附率。结果对照组除ACC-2细胞E-cad低于ACC-M细胞外,ACC-2细胞α、β、-γcat表达均高于ACC-M细胞;在力学刺激下,E-cad和α、β、-γcat的表达随时间而变化。对照组ACC-2细胞和ECM的粘附率高于ACC-M细胞,但在力学刺激后,与对照组比较,ACC细胞和ECM的粘附率随时间而变化。结论在力学刺激后,ACC-2、ACC-M细胞出现E-cad/cat复合体表达的改变,同时其和ECM的粘附率也发生了改变,显示力学刺激后细胞粘附发生变化在肿瘤转移中发挥重要作用。

摘要：前期研究的结果表明,磨损颗粒可通过假体-界面膜进入假体周围间隙与成骨细胞(OBs)直接相互作用,影响OBs功能、促进OBs分泌活性因子。为进一步探讨磨损颗粒与OBs作用后是否会影响破骨细胞(OCs)的骨吸收功能,本研究通过结合形态学特征(TRAP染色、OCs扫描电镜观察、F-actin荧光标记、骨吸收陷窝染色和扫描电镜观察、钙离子荧光追踪)和生化学评价(ABC-ELISA法测定I型胶原交联羧基末端肽浓度),综合分析了3种直径(6.9、2.7和0.9μm)钛颗粒与OBs共孵育后的的条件培养基(CM)对OCs形态和功能的影响。结果表明,较小的0.9μm组CM可促进OCs分化、发育、成熟,部分活化OCs,影响OCs的存活;2.7μm和6.9μm组的CM,尤其是6.9μm组可明显促进OCs分化、发育、成熟、活化,维持OCs的存活;这与OCs细胞内钙离子浓度升高有关。以上结果提示OCs的活化、存活以及分化在假体松动中起着重要的作用;本研究为假体无菌性松动的防治、人工关节设计的材料优化选择提供了新的实验依据。

摘要：目的建立甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法,研究原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态。方法针对P 16基因启动子区富含CpG的序列,设计3条引物,进行半巢式降落PCR扩增,检测原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态;并将P 16基因启动子区340 bp片段克隆到pM D 18-T载体,*** JM 109扩增此质粒后经CpG甲基化酶M.S ssⅠ处理,再用Hp aⅡ酶切验证获得P 16基因启动子区甲基化阳性的质粒P 16Pm+并进行特异性和灵敏度实验。以此甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法检测40例人原发性肝癌和3例正常人肝组织DNA样品的P 16基因启动子区甲基化状态。结果所采用的Hp aⅡ酶切后半巢式PCR方法的特异性强,灵敏度达100 fg;对40例人原发性肝癌组织DNA样品P 16基因的启动子区甲基化状态检测显示甲基化阳性率为30%(12/40),3例正常人肝组织均为阴性(0/3)。结论P 16抑癌基因启动子区甲基化可能与肝癌发生发展有关。本实验方法简便、成本低廉,并有高度的特异性与灵敏度,在大规模检查中有实际应用价值。

摘要：目的　研究萃取丹参素的最佳工艺条件。方法　通过正交设计 ,用超临界CO2 流体萃取 ,优化出合理工艺条件 ,并与传统溶剂提取工艺相对照。结果　超临界CO2 流体萃取率为传统工艺萃取率的 1.1倍。结论　超临界CO2 流体萃取丹参素具有开发价值。

摘要：　　 目的-克隆阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶 (AK) 基因, 并测定其序列, 进行序列分析。方法-根据AK基因已知序列设计合成一对引物, 应用PCR技术从阴道毛滴虫基因组DNA中扩增出AK基因, 并将其克隆入pMD18 T simple载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR鉴定后, 用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用BLAST软件辅助分析所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列的同源性。结果-PCR扩增得到特异的阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因序列。酶切及PCR鉴定获得了正确的PT AK重组质粒。测序表明, 所克隆的AK基因大小为690 bp, 编码229个氨基酸。序列分析表明, 所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列具有高度同源性 (99 9%)。结论-克隆了阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因, 序列测定及同源性分析表明, 所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列具有高度同源性。