摘要：目的探讨胞嘧啶脱氨酶(CD)/5-氟胞嘧啶(5-FC)基因治疗联合放疗对裸鼠宫颈癌移植瘤的生长抑制作用,以及CD/5-FC基因治疗与放疗之间是否具有协同作用。方法将24只鼠龄6～8周成功接种了HeLa细胞的BALB/C雌性裸鼠,随机分为对照组、基因治疗组、放疗组以及联合治疗组,每组6只,观察各组治疗前后的肿瘤体积、肿瘤生长抑制率及肿瘤体积增加倍数。结果(1)治疗21d后,基因治疗组裸鼠的肿瘤体积是(728±201)mm3,联合治疗组是(357±113)mm3,放疗组是(739±419)mm3,对照组是(1168±380)mm3,基因治疗组、联合治疗组、放疗组肿瘤体积均小于对照组,3组分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);联合治疗组肿瘤体积小于基因治疗组及放疗组,前者分别与后两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)放疗组的肿瘤生长抑制率为36.74%,基因治疗组为37.66%,联合治疗组为69.45%,联合治疗组明显高于放疗组及基因治疗组,前者分别与后两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)联合治疗组平均肿瘤体积增加倍数为7.71倍,基因治疗组为19.16倍,放疗组为18.86倍,对照组为40.57倍。析因设计的方差分析结果,CD/5-FC基因治疗与放疗之间有交互作用(P=0.03),当与放疗联合使用时,CD/5-FC基因治疗的疗效大于其单独使用时所产生的疗效;当与CD/5-FC基因治疗联合应用时,放疗的疗效大于其单独使用时所产生的疗效。结论CD/5-FC基因治疗与放疗联合应用,对裸鼠宫颈癌移植瘤的生长具有抑制作用,并且两者之间具有协同作用。

摘要：背景与目的:研究表明宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)E6、E7癌基因密切相关,于是人们采用核酶或HPVE6、E7反义寡核苷酸抑制其表达来治疗宫颈癌,虽然取得了一定的效果,但仍面临基因抑制效率低、维持时间短、工作量大、耗费多等问题。本研究采用最新的RNA干扰技术干扰宫颈癌CaSki细胞中HPV16E6转录,以了解其能否特异性抑制HPV16E6基因及其时效性如何。方法:设计合成针对HPV16E6的荧光标记siRNA,借脂质体转染宫颈癌CaSki细胞,通过荧光照片计数荧光细胞占所有细胞的比例计算转染效率;测定转染后不同时间点的细胞凋亡率;RT-PCR测定HPV16E6mRNA变化,Westernblot和流式细胞仪检测转染前后蛋白表达情况。结果:相差显微镜荧光照片显示细胞转染的效率为81%。HPV16E6siRNA转染细胞后24h、48h、5天凋亡率分别为7.7%、11.8%和37.4%,转染9天时凋亡率下降至12.6%。RT-PCR扩增结果显示,细胞转染前HPV16E6mRNA的量与siRNA阴性对照比较没有显著性差异,但转染后24h、48h、5天和9天分别减少了77%、83%、59%和41%;而作为内对照的β-actinmRNA在转染前后无变化。流式细胞仪定量测定HPV16E6蛋白,结果显示转染后24h、48h和5天,蛋白表达抑制率分别为79.7%、80.4%和71.3%;9天时抑制率有下降,但仍可达57.

摘要：目的采用RNA干扰技术逆转人卵巢癌OVCAR8/TR细胞中多药耐药基因,探讨该技术能否有效地抑制多药耐药基因MDR1的表达,降低该基因编码的糖蛋白P-gp的水平。方法设计合成针对MDR1的小片段RNA(siRNA),将合成的siRNA用脂质体转染具有多药耐药基因MDR1高表达的人卵巢癌泰素耐药细胞株OVCAR8/TR,用荧光定量RT-PCR检测转染后不同时间点MDR1的mRNA的变化,流式细胞仪定量测定转染后不同时间点P-gp表达的情况。结果MDR1的siRNA转染细胞48 h基因的抑制达最高,转染的第5 d回到正常水平。阴性对照组mRNA的量与未转染组的mRNA的量差异无统计学意义。P-gp在转染后的72 h其抑制最强,至第5 d时恢复接近正常水平,阴性对照组蛋白表达与未转染组的蛋白表达差异无统计学意义。结论siRNA能够有效地抑制多药耐药基因MDR1的mRNA和P-gp的表达,为逆转卵巢癌的多药耐药带来了新的希望。

摘要：目的探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性。方法将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR。用荧光定量RT-PCR技术和流式细胞仪分别测定转染前后细胞MDR1mRNA及糖蛋白P-gp表达的变化;三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测转染前后细胞对顺铂、氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇药物敏感性(以ATP抑制率判断)的变化情况。结果转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞MDR1mRNA的抑制率分别为26·42%、84·00%、78·43%、45·85%和0;转染后48h MDR1mRNA的抑制率达到最高峰。转染后24、48、72、96和120h,OVCAR8/TR细胞P-gp的抑制率分别为16·71%、49·64%、85·23%、65·98%和9·44%;转染后72h P-gp的抑制率达到最高。转染MDR1siRNA后,能够明显提高OVCAR8/TR细胞对紫杉醇和阿霉素的敏感性,在紫杉醇的作用下,转染前后OVCAR8/TR细胞的ATP抑制率分别为(25·8±3·1)%和(78·0±9·8)%,转染前后比较,差异有统计学意义(P<0·05)。结论在OVCAR8/TR细胞中,针对MDR1合成的siRNA能够有效地抑制MDR1mRNA和P-gp的表达,并能恢复其对紫杉醇和阿霉素的敏感性。应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的多药耐药。

摘要：目的采用RNA干涉(RNAI)技术干扰宫颈癌HPV16E6基因转录,通过体外和体内实验了解其特异性抑制HPV16E6基因的效率。方法设计合成针对HPV16E6的小干扰RNA(SIRNA),借脂质体转染宫颈癌CASKI细胞,通过测定转染后不同时间点的细胞凋亡率、HPV16E6MRNA及蛋白表达变化了解基因抑制的效率。体内实验中建立子宫颈癌荷瘤裸鼠模型,将E6SIRNA直接注入瘤体,观察肿瘤体积的变化,肿瘤切片HPV16E6免疫组化染色,观察肿瘤坏死和细胞的凋亡。结果HPV16E6SIRNA转染细胞后24H、48H、5D和9D时凋亡率分别为7.7%、11.8%、37.4%和12.6%。RT-PCR显示转染后24H、48H、5D和9D HPV16E6MRNA量减少了77%、83%、59%和41%。WESTERN BLOT显示转染后的HPV16E6蛋白表达在24H、48H、5D明显减少,9D时有所恢复;流式细胞仪HPV16E6蛋白定量测定结果显示,转染后24H、48H、5D和9D蛋白表达抑制率分别为79.7%、80.4%、71.3%和57.4%。体内实验瘤内注射HPV16E6SIRNA明显抑制肿瘤的生长,HPV16E6蛋白表达明显受抑,肿瘤组织坏死和细胞凋亡增加,重复给药较单次给药效果更好。结论体内和体外实验均表明RNA干涉HPV16E6基因的效果具有特异性和高效性。

摘要：背景:结合雌激素(conjugated equine estrogen,CEE)是激素替代疗法常用药物之一,在围绝经期和绝经后妇女中应用由于安全性问题而受到限制。对于有激素替代疗法禁忌证和慎用证的患者,中药治疗成为另一选择。目的:比较中成药坤泰胶囊和CEE对绝经早期妇女认知功能及心理状态的影响并评估其安全性。设计、场所、对象和干预措施:收集四川大学华西妇女儿童医院绝经早期门诊患者57例,将其随机分为坤泰组28例和激素组29例,治疗并观察1年。坤泰组给予坤泰胶囊(每粒0.5 g),2 g/次,3次/d;激素组给予CEE 0.6 mg/d与0.3 mg/d交替使用(平均0.45 mg/d),有子宫者,加用醋酸甲羟孕酮,2 mg/d。主要结局指标:自给药日起每3个月评价一次认知功能及心理状态,记录不良反应,以意向性分析(intentionto treat,ITT)法和符合方案集(per-protoeol set,PPS)法分别分析。结果:两组治疗后各时点简易智能精神状态量表(Mini-Mental State Examination,MMSE)的认知功能、Kupperman指数及绝经后生存质量(quality of life,QOL)量表的心理状态评分与治疗前相比,差异有统计学意义(P0.05)。两组MMSE评分呈逐步上升趋势,Kupperman指数与QOL心理症状评分呈逐步下降趋势。治疗过程中两组均无严重不良事件发生,除阴道出血发生率激素组(39.3%)高于坤泰组(11.1%),且差异有统计学意义(x^2=5.750,P=0.029),其余不良反应比较,两组差异均无统计学意义。结论:坤泰胶囊与CEE在维持绝经早期妇女的正常认知功能和改善心理症状方面有一定作用。

摘要：目的构建自噬基因Beclin 1小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,探讨Beclin 1抑制后对宫颈癌HeLa细胞生长的作用。方法根据人Beclin 1 mRNA编码序列,设计RNA干扰靶点,构建Beclin 1 shRNA表达质粒,脂质体法转染人宫颈癌HeLa细胞,通过荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测其对HeLa细胞自噬基因Beclin 1 mRNA及蛋白表达的影响。MTT法分析其对细胞增殖、流式细胞仪检测其对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果构建的shRNA表达载体可以使HeLa细胞中自噬基因Beclin 1的mRNA及其蛋白含量降低,转染质粒的细胞生长增殖速度加快,凋亡率降低。结论成功构建了针对自噬基因Beclin 1的shRNA表达载体,通过转染HeLa细胞,可有效抑制细胞中Beclin 1的表达,并促进细胞生长,抑制凋亡。

摘要：目的通过临床药师实践过程,探索临床药师的工作方式及思维方法。方法临床药师全程参与产后绒癌的化疗过程,充分利用专业背景,在给药方案设计、调整、药物不良事件药学监护、患者出院宣教等环节,作为临床治疗团队一员,为患者提供全面的药学服务。结果临床药师参与的临床治疗团队能更好的为患者提供服务。结论临床药师应做好知识储备,积极主动参与临床治疗工作,做好药学监护。

摘要：目的循证评价世界范围内的灾后孕妇医疗保健措施及医疗救助模式,为进一步完善我国灾后孕妇管理措施提供决策依据。方法检索Cochrane图书馆(2008年第2期)、MEDLINE光盘数据库(1966～2008.6)、EMbase数据库(1984～2008.6)、维普中文科技期刊数据库(1989～2008年6月)、中国生物医学文献光盘数据库(1978～2008.6)、万方数据库(1997～2008.6)、中国学术期刊全文数据库(1994～2008.6),手工检索《中华妇产科杂志》等杂志,筛选截至2008年6月20日的关于灾后孕妇医疗保健的文献和指南,评定文献质量,并进行综合分析。结果初检出文献293篇,按照纳入与排除标准,最终纳入25篇,其中指南5篇,主要涉及灾后妊娠结局、胎儿生长发育和孕妇外伤急救三方面。综合数据库文献及官方网站信息发现,现有文献以回顾性分析和队列研究为主,与灾难相关的孕妇医疗保健研究较少,尚无灾后孕产妇急救流程的相关指南,这与灾难的突发性、罕见性和复杂性相关。结论灾后孕妇医疗保健及医疗救助是一个系统工程,需要国家综合考虑孕妇需求、疾病负担等因素,统筹规划、总体设计。

摘要：目的:调查四川省各级医务人员产后出血相关知识和技能掌握情况。方法:设计产后出血培训问卷,对1 000余名医务人员进行10次产后出血诊治培训,并抽取500名进行问卷调查。结果:402份有效问卷中产后出血病因判断类题目及产后出血处理流程类题目的正确率均在85%以上,但产后失血量估计类题目的正确率低于45%,第三产程规范化处理预防产后出血类题目的正确率仅为32%,答题错误者主要为低年资住院医生。402人中会进行B-Lynch缝合、子宫动脉结扎及知晓剖宫产子宫切除术技巧者均不足1/3。402人均对本次培训表示支持,并期望更多类似培训。结论:各级产科医生对产后出血量的估计、宫缩剂的正确应用及手术止血方法的掌握尚存在问题,应加强相关理论及手术操作技能的培训。