摘要：光热治疗(photothermal therapy,PTT)是一种高效的抗肿瘤手段,但在激光照射消融肿瘤的同时,通常会引发一系列炎性反应,促进肿瘤的进一步发展,影响肿瘤治疗效果。因此,在肿瘤光热治疗的同时,实现对抗炎药物的肿瘤精准靶向递送,抑制光热治疗引发的炎性反应,是提高抗肿瘤效果的有效手段。为此,本课题以还原敏感连接物3,3'-二硫代二丙酸(DA)键合疏水段抗炎药物18β-甘草次酸(18β-GA)和亲水段甲氧基-聚乙二醇-氨基(mPEG-NH_(2))得到还原敏感的两亲性聚合物PEG-DA-GA,并包载光热剂IR-780,制备得到还原敏感胶束型纳米粒PDG/IR-780 NPs。PDG/IR-780 NPs的粒径均一,为80.2±5.3 nm,多分散指数(PDI)为0.215±0.079。所有动物实验遵循四川大学伦理委员会制定的伦理学要求。结果表明,与非还原敏感的对照纳米粒PSG/IR-780 NPs相比,PDG/IR-780 NPs可响应肿瘤细胞内高表达的谷胱甘肽,促进纳米粒解体,有效释放出18β-GA,对4T1细胞的杀伤效率显著提升。肿瘤组织的冰冻切片实验结果表明,与游离药物组相比,所设计的PDG NPs可提高药物在肿瘤的分布。最后,PDG/IR-780 NPs在小鼠4T1三阴性原位乳腺癌模型中表现出显著的抗肿瘤疗效,为肿瘤光热治疗提供了新的思路。

摘要：针对重组蛋白高表达形成的包涵体,基于中空纤维膜的错流超滤复性具有较大的应用潜力。为研究不同条件对基于中空纤维膜的错流超滤复性的影响,以核糖核酸酶A(RNase A)为例,以复性过程的活性收率和质量收率作为考察指标,设计了RNase A复性初始浓度(A)、跨膜压力(B)、循环流速(C)的3因素3水平正交实验。结果表明,错流超滤复性过程中,以上复性条件对RNase A的质量收率基本没有影响,对RNase A的活性收率具有显著影响,其较优组合为A1B1C2,即RNase A复性初始浓度为0.3 mg/mL、跨膜压力34.0 kPa、循环流速935 cm/min。在以上复性条件下,RNase A的活性收率可达92.31%,质量收率为77.56%。

摘要：目的探讨佛手散防治帕金森病(PD)的作用及相关机制。方法体内实验采用利血平模型,观察小鼠肛温和运动不能指标,考察当归挥发油和川芎挥发油及其联合应用的影响;体外实验采用荧光分光光度法,以犬尿胺为底物,检测人单胺氧化酶(hMAO)活性和抑制模式,在此基础上,采用2×4析因设计,探讨当归挥发油与川芎挥发油之间的相互作用。结果利血平实验发现联合应用当归挥发油和川芎挥发油可显著改善模型小鼠肛温下降和运动不能;酶活性实验发现当归挥发油和川芎挥发油对h MAO-A和h MAO-B均为竞争性抑制作用,两者配伍使用时对h MAO-A和h MAO-B的活性均有显著的协同增效作用。结论佛手散中的当归、川芎在防治PD中具有显著的协同增效效应,其机制可能与抑制h MAO活性有关。

摘要：采用富阳离子多肽诱导重组蛋白自组装为纳米粒策略有望保持蛋白药物的活性、生物相容性,同时延长其半衰期、提高靶向性,有广泛的应用前景。维持蛋白质药物(尤其是具有多个半胱氨酸残基的蛋白质)在自组装纳米粒中的活性结构对于该类药物的研究至关重要。该研究设计了具有多个游离半胱氨酸残基的重组蛋白CRGDC-T22-TAT-Beclin1-GFP-RGDKG-His tag及其对照蛋白序列,构建表达载体、获得大肠杆菌Trans B(DE3)工程菌。该研究分析了非变性条件和变性条件下进行Ni-NTA亲和层析纯化的差异。在变性条件下纯化获得重组蛋白,经复性后得到自组装蛋白质纳米粒,采用动态光散射法测定蛋白纳米粒粒径,使用酶标仪分析重组蛋白的荧光特性,用CCK-8法测定蛋白质纳米粒抑制MCF-7细胞生长的活性。结果显示,重组蛋白CRGDC-T22-TATBeclin1-GFP-RGDKG-His tag形成的纳米粒粒径为(45.13±5.78)nm;其荧光最大发射波长为510 nm,与野生型GFP相同;浓度为10μmol/L的重组蛋白与人乳腺癌细胞MCF-7共同孵育48 h,可将细胞活力降低至31.00%±1.13%。以上结果表明,相比于非变性纯化法,采用变性-复性法可以纯化具有多个半胱氨酸残基的重组蛋白,获得具活性的自组装蛋白质纳米粒。

摘要：目的设计并合成3个结构新颖的非对称七甲川菁染料,初步研究其光学性质。方法采用“两步法”合成非对称七甲川菁染料;将2,3,3-三甲基-3H-吲哚与溴取代物反应生成季铵盐,季铵盐与过量缩合剂反应生成半菁中间体,纯化后的半菁中间体与另一种季铵盐缩合,得到目标产物,并测定目标产物在甲醇、二甲基亚砜和10%二甲基亚砜水溶液中的最大吸收和发射波长。结果与结论得到了3个非对称七甲川菁染料,其结构经^(1)HNMR、^(13)CNMR和HR-MS确证,在不同溶剂中的最大吸收和发射波长均在近红外区。该结果为后续小鼠活体成像和体内组织器官的近红外显像研究奠定了基础。

摘要：目的设计、合成新型水溶性对乙酰氨基酚前药,并初步考察其在血浆中分解释放原药的速度。方法以对乙酰氨基酚及氯乙酰氯为原料,在吡啶作用下成酯,再与Boc-氨基酸进行亲核取代,最后脱保护基或直接成盐得到目标化合物。测定其水溶性,并采用HPLC法初察其在血浆中的分解情况。结果合成了目标化合物ACM-N1、ACM-N4、ACM-N5,并通过NMR、ESI-MS确证了结构。对乙酰氨基酚、ACM-N1、ACM-N4、ACM-N5室温条件下在水中的溶解度分别为5.2、22.7、18.5、15.7 mg·mL^(-1)。将ACM-N1水溶液加入血浆中孵育,30 s后完全分解为对乙酰氨基酚。结论ACM-N1的水溶性显著优于对乙酰氨基酚,并可在血浆中迅速分解出对乙酰氨基酚,具有制备成水溶性对乙酰氨基酚前药的潜力。

摘要：目的评估柔红霉素(DNR)与高三尖杉酯碱(HHT)联合用药对HL60细胞增殖的抑制作用;制备叶酸修饰的共递送DNR+HHT的复合脂质体。方法采用MTT法检测细胞增殖,CompuSyn软件计算DNR与HHT的联合用药指数。以薄膜水化法制备脂质体,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法优化共递送脂质体的处方;通过正交试验设计优化制备工艺。结果DNR+HHT的联合用药指数为0.69,两者具有协同作用。优选处方为:磷脂10.7μmol·mL^(-1),磷脂-胆固醇的摩尔比为4:1,磷脂-DNR的用量比为15:1。优选制备工艺为:水合时间2 h,水合温度40℃,油水比例为2:1。结论Box-Behnken响应面法结合正交试验设计可有效优化共递送脂质体的处方与制备工艺,所得脂质体的包封率高、粒度均匀。