摘要：背景非伤寒沙门菌(NTS)发生侵袭性血流感染可引起败血症,诊治不及时会引起严重并发症甚至死亡。目的 总结分析儿童NTS败血症的临床特征及治疗经验。设计病例系列报告。方法 纳入2017年11月至2022年10月在四川大学华西第二医院经血培养明确诊断为NTS败血症的患儿。通过医院电子病历系统收集患儿的一般资料、临床表现、辅助检查、治疗及转归。主要结局指标好转出院或死亡。结果 13例NTS败血症患儿纳入本文分析,发病中位年龄为1(0.9,6)岁,<5岁10例,男5例,7例存在基础疾病。除1例有不洁饮食史外,余无明确感染来源。发病时间7~9月份占76.9%。均有高热,10例(76.9%)以发热为首发症状,腹泻、咳嗽各6例,其余症状还包括气促、精神萎靡、抽搐、呕吐、血便、皮疹、骨关节痛、喘息、发绀和黄疸。合并胃肠炎6例,肺炎5例,脑膜炎和骨髓炎各1例。WBC和PLT升高各3例,CRP显著升高8例,PCT显著升高、Hb降低、ALT/AST升高各6例。血培养肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌各3例,德比沙门菌、都柏林沙门菌和纽兰沙门菌各1例,未分型4例;血培养转阴时间为5(4.5,13.5)d。12例菌株存在不同程度耐药,7例为多重耐药。对阿米卡星(92.3%)、妥布霉素(92.3%)、庆大霉素(92.3%)耐药率较高,其次为氨苄西林(69.2%)、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶(30.8%),无碳青霉烯类耐药,多数对第三、四代头孢菌素和氨曲南敏感。抗生素中位疗程为17(14,21.5)d。13例均好转出院。结论 NTS败血症多发生于5岁以下儿童,以高热为主要临床表现,伴或不伴胃肠道症状,明确诊断依据病原学检测。经验性用药推荐第三代头孢菌素,多数患儿可获得较好的临床效果,对于一线治疗效果不佳、严重感染者建议使用碳青霉烯类药物。

摘要：背景消化道出血后的禁食时间一直是个有争议的问题,消化道出血儿童的禁食时间及饮食管理,国内外鲜见报道。目的探讨消化道大出血儿童是否需要早期严格禁食及开放饮食时进食种类的合理选择。设计回顾性队列研究。方法收集2011年10月至2021年10月在四川大学华西第二医院住院的消化道大出血患儿的临床资料,按禁食时间分为72 h组,按开放饮食时食物种类分为碳水化合物饮食组、蛋白质饮食组和混合饮食组。分别比较禁食时间组及不同进食种类组在人口学特征、临床特征、实验室检查和临床结局方面的差异,对组间差异有统计学意义的变量行多因素回归分析。主要结局指标消化道再出血、住院时间。结果266例消化道大出血患儿纳入本研究,男175例(65.8%),女91例,年龄6.0(2.4,10.9)岁。以禁食时间0.05)。多重线性回归分析结果显示,禁食时间>72 h的患儿ln转换后住院时间(lnLOS)增加0.192(95%CI:0.047~0.337,P=0.010)d,即禁食时间>72 h的患儿住院时间延长。以碳水化合物饮食组为参照,多因素Logistic回归分析结果显示,进食种类与再出血、进食后不良反应发生风险差异无统计学意义(P>0.05),多重线性回归分析结果显示,碳水化合物饮食组及蛋白质饮食组的患儿lnLOS差异无统计学意义(P>0.05),而混合饮食组的患儿lnLOS缩短0.176(95%CI:-0.318~-0.034,P=0.015)d,即进食碳水化合物+蛋白质混合食物的患儿住院时间缩短。结论消化道大出血患儿禁食<24 h不会增加再出血、院内感染等不良结局的风险,且24 h内早期进食住院时间更短;消化道大出血后开放饮食,碳水化合物+蛋白质混合的食物更有利于缩短住院时间,且不增加再出血率及进食后不良反应发生率,可作为初始食物选择。

摘要：【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)Quaking基因敲除细胞株,并检测Quaking基因对NIH3T3细胞增殖能力的影响。【方法】首先,利用在线网站设计两条靶向作用于Quaking外显子的sgRNA,成功构建了两个分别靶向Quaking基因第1、第2外显子的CRISPR/Cas9重组慢病毒质粒。将构建的Quaking基因CRISPR/Cas9重组慢病毒载体和pcDNA3.1-Quaking过表达质粒共转染至HEK293T细胞中,通过Western blot实验检测Quaking蛋白的敲除效率。其次,将筛选得到的敲除效率高的重组慢病毒质粒(LentiCRISPRv2-sgRNA1)与辅助包装质粒共转染入HEK293T细胞进行慢病毒包装,慢病毒转导NIH3T3细胞后,利用嘌呤霉素筛选阳性单克隆细胞株。最后,通过Western blot及免疫荧光染色鉴定敲除效果。【结果】发现Quaking蛋白在该细胞株中不表达,并测序证实了发生片段敲除。CCK8检测发现,Quaking基因敲除显著抑制了NIH3T3细胞的增殖能力。【结论】本研究首次通过CRISPR/Cas9技术成功构建了小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)Quaking基因敲除细胞株,为后续研究Quaking基因在小鼠生理功能调节中的作用机制提供了体外模型基础。

摘要：目的:初步探究芫根对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导脓毒症小鼠认知功能障碍的保护作用及机制。方法:选取21只KM小鼠根据体重随机分为对照组(n=4)、模型组(n=8)以及治疗组(n=9),治疗组预防性给予芫根提取液灌胃7 d、14 d后腹腔注射LPS10 mg•kg^(-1)构建脓毒症小鼠模型。LPS注射7 d后采用旷场实验评价小鼠焦虑情绪,通过HE染色评价海马神经元损伤情况,以Western Blot检测全脑RACK1、HIF-1α蛋白表达水平。结果:模型组小鼠角落区域停留时间及总静止时间增加,而中央及四周停留时间缩短,HE结果显示海马神经元明显出现核固缩,同时,脑RACK1蛋白水平明显降低(P<0.05)而HIF-1α表达有所升高;芫根提取液灌胃后,相对于模型组,小鼠四周及中央区域的停留时间明显增加(P<0.05),角落停留时间及总静止时间明显降低(P<0.05),海马神经元核固缩明显减少,同时脑RACK1蛋白水平升高,HIF-1α表达降低。结论:芫根对脓毒症小鼠认知功能障碍具有一定的改善作用,其机制可能与调控RACK1/HIF-1α、保护海马神经元有关。