摘要：基于费氏弧菌CS234的Microtox微毒测试体系优化与方法学考察,为该方法更加可靠地应用于中药注射剂综合急性毒性的测试打下基础。采用Plackett-Burman法优化设计影响费氏弧菌发光的因素,建立以七水硫酸锌为标准毒物和质量控制样品的反应体系,得到最优发光条件为:费氏弧菌冻干粉平衡15 min后加入复苏液1 m L,混匀10 min,取100μL菌液测试初始发光度,随后立即加入1 m L复苏液或待测样品,反应10 min后再次测试相应发光强度,上述操作均在(15±1)℃条件下完成;复苏稀释液、渗透压调节液及七水硫酸锌储备液不干扰费氏弧菌发光强度的测定,该方法特异性良好;质量控制样品、定量下限样品批内精密度<5%,批间精密度<10%,准确度在85.8%~103.2%。七水硫酸锌溶液在3.86~77.27 mg·L^(-1),标准曲线方程为y=21.78lnx^(-1)5.14,R_2=0.998。该方法下ZnSO_4·7H_2O对费氏弧菌的IC_(50)为19.90 mg·L^(-1);对七水硫酸锌储备液及其质量控制样品分别连续考察120,8 h,其RSD<2%,提示其在室温及4℃保存条件下稳定性良好;pH 4.5~8.0时,费氏弧菌发光的波动控制在±10%,该p H可满足绝大多数中药注射剂的测试需要。针对费氏弧菌CS234建立的微毒测试体系进行优化后,具有良好的特异性、稳定性、灵敏度、准确度及适应性,提示可应用于中药注射剂综合急性毒性的测试。

摘要：目的:探讨泻心汤配伍合理性及其可能机制。方法:运用正交设计探讨泻心汤各组分对小鼠的急性毒性作用及相互关系。结果:体内研究发现黄连、大黄对小鼠ig均有一定的急性毒性作用,测得其小鼠ig大黄的半数致死量(LD50)按生药计为48.92 g/kg;小鼠ig黄连的LD50按生药计为2 047.9 mg/kg;黄芩对小鼠无明显急性毒性作用,未测出其小鼠口服LD50。利用正交设计,以死亡率为指标观察泻心汤各组分对小鼠的急性毒性作用,结果显示:黄连是泻心汤中的主要有毒物质;大黄有降低黄连急性毒性作用的趋势,但作用明显弱于黄芩;黄芩可显著降低黄连的急性毒性,是泻心汤中的主要解毒物质,这可能是泻心汤在临床应用中表现出较小毒性的重要原因。结论:泻心汤中黄连具有一定的急性毒性,黄芩则是其解毒物质,该方的配伍从某种程度上达到了解毒的目的,具有良好的科学性,其解毒的机制可能与黄连中的生物碱能与黄芩苷或大黄蒽醌生成沉淀有关。

摘要：目的:基于明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67的Microtox微毒测试体系比较研究,明确两者适宜的反应条件。方法:1考察明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67在15℃±1℃、20℃±1℃、25℃±1℃下的相对发光情况;2采用Plackett-Burman法优化设计影响明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67发光的因素;3采用Plackett-Burman法优化得到的反应体系,考察不同p H复苏液对上述两种细菌相对发光强度的影响。结果:1明亮发光杆菌502的相对发光强度随温度的升高而增强,而青海弧菌Q67的相对发光强度随温度的升高先增强后减弱。2Plackett-Burman法得到最优发光条件为:明亮发光杆菌502冻干粉平衡10min后加入复苏液2ml,混匀15min,取100μl菌液测试初始发光度,随后立即加入1ml复苏液或待测样品,反应15min后再次测试相应发光强度;青海弧菌Q67冻干粉平衡10min后加入复苏液2ml,混匀10min,取100μl菌液测试初始发光度,随后立即加入2ml复苏液或待测样品,反应10min后再次测试相应发光强度。3复苏液p H 3.6-p H 3.8时对明亮发光杆菌502发光的影响由抑制转为增强;复苏液p H 4.5-p H 5.0时对青海弧菌Q67发光强度的影响<±15%。结论:与明亮发光杆菌502比较,青海弧菌Q67具有更宽的p H耐受范围并且在检测时无需调节待测样品渗透压。

摘要：目的:以抗Aβ1-42淀粉样蛋白功效指标为核心,结合化学成分和毒性效应对不同产地的姜黄进行综合质量评价。方法:以全国范围内7个省份41个样品采集点收集药材,参考2015版《中国药典》规定测定姜黄的指标成分(姜黄素和挥发油)含量;开展抗Aβ1-42淀粉样蛋白功效试验:表面等离子共振技术分析样品与Aβ1-42及其纤维体fAβ1-42的结合力、fAβ1-42致PC12细胞损伤模型分析样品对损伤细胞的保护作用;以正常生长的PC12细胞检测药物毒性;以功效指标为核心分别对样品成分指标和毒性效应做相关性分析并对不同产地的姜黄抗淀粉样蛋白活性进行综合质量评价。结果:姜黄抗Aβ1-42淀粉蛋白活性功效指标与化学成分姜黄素、挥发油含量成正相关,与毒性效应不相关;各产区中,四川产姜黄抗Aβ1-42淀粉样蛋白活性最强、功效成分姜黄素与挥发油含量最高、毒性效应与其余产地无差异,可认为四川产姜黄质量最佳。结论:以功效为核心的中药质量评价模式可明确中药材在具体功效上的质量优劣,相对以传统感官及化学评价,中药整体品质评价更能体现复杂体系整体控制的设计思想。

摘要：自我国实施药品注册管理以来,中药注册分类在满足公众健康需求、指导中医药科研成果转化及传承创新上发挥了重要作用。三十余年间,中药新药创制均基于"一方一药"的注册转化模式。该模式借鉴了现代药品的研发注册制度,虽然贴近中医临床中的"守方守法"用药,但难以体现中医辨证求因的序贯治疗思想和多措并举的综合治疗手段。2017年,中共中央办公厅、国务院办公厅《关于深化审评审批制度改革鼓励药品医疗器械创新的意见》指出要"建立完善符合中药特点的注册管理制度和技术评价体系,处理好保持中药传统优势与现代药品研发要求的关系"。因此,现阶段中药研发的技术要求和注册制度需要在遵循中医药发展规律、符合中医药理论特点基础上进一步解放思路,更多地基于临床思维去思考设计。该文结合我国中药注册监管情形和现代药物研发模式转变,分析当前"一方一药"研发注册模式的局限和不足,并尝试提出一种更加切合中医临证思维、还原中医临床实景的"系列方药"同步转化的研发注册新模式,希望有助于中医药产业的传承创新和高质量发展。

摘要：目的:优化白及多糖的超声提取工艺,比较不同产地白及多糖含量差异,考察白及多糖稳定性和抗氧化活性。方法:以多糖得率为考察指标,料液比、超声温度、超声时间为考察因素设计L9(34)正交试验优化白及多糖超声波提取工艺;以苯酚-硫酸法测定白及多糖含量,考察陕西汉中、云南普洱、湖南洪江及四川绵阳白及多糖含量产地差异;以化学方法考察白及多糖稳定性,并比较白及多糖对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)和羟基自由基(·OH)的清除率以评价其体外抗氧化活性。结果:最佳超声提取工艺条件为:料液比1∶25(g/mL)、超声温度80℃、超声时间10 min;四川绵阳白及多糖含量最高,达到60.81%,湖南洪江次之,云南普洱最低;白及多糖在柠檬酸及中性溶液中的稳定性较好,在苯甲酸钠、过酸性或过碱性溶液中的稳定性较差;白及多糖能有效地清除DPPH和羟基自由基,具有潜在的体外抗氧化活性。结论:白及多糖超声波提取工艺的优化及其抗氧化活性研究,可为白及多糖提取及综合利用提供借鉴。