摘要：目的 正交设计优选理气散结颗粒的提取工艺。方法 采用HPLC测定芍药苷含量,色谱柱为Diamansil C18柱,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）梯度洗脱（0~14min,0%~15%B;14~15min,15%~90%B;15~25min,90%B;25~26min,15%~90%B;26~30min,85%B）,流速为1.0 ml·min-1;柱温为30℃;检测波长λ=230 nm。以芍药苷提取量和干膏率的综合评分为指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验考察提取时间、料液比、提取次数对提取工艺的影响。结果 最佳提取工艺为加10倍量水提取两次,每次1h;芍药苷提取量为28.96 mg·g-1,干膏得率34.07%。结论 通过正交设计优选的提取工艺简单、经济、合理、可行,为医院制剂-理气散结颗粒的应用提供参考。

摘要：目的:构建高滴度大鼠carabin腺病毒干扰载体(Ad-carabin-shRNA)。方法:设计3对carabin-shRNA寡核苷酸序列,分别构建3个ADV4-U6-CMV-carabin-shRNA腺病毒穿梭质粒,将构建好的ADV4-U6-CMV-carabin-shRNA和pHBAd-BHG质粒共转染293A细胞,以包装Ad-carabin-shRNA,采用微量全细胞病变法检测病毒滴度。Ad-carabin-shRNA感染H9C2心肌细胞,实时荧光定量PCR和Western blotting检测carabin mRNA及蛋白表达。结果:3个ADV4-U6-CMV-carabin-shRNA干扰质粒构建成功,相对应的Ad-carabin-shRNA包装顺利,病毒滴度均为9×108 TU/mL。感染H9C2心肌细胞后,Ad-carabin-shRNA-1和Ad-carabin-shRNA-2均有显著干扰效果,carabin mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论:Ad-carabin-shRNA构建成功,在心肌细胞中具有干扰carabin的效应。